高中生物选修1《专题5dna和蛋白质技术》复习课件

《高中生物选修1《专题5dna和蛋白质技术》复习课件》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在教育资源-天天文库。

1、专题5DNA和蛋白质技术一、多聚酶链式反应扩增DNA片段1．细胞内DNA复制与PCR技术的比较细胞内DNA复制PCR不同点解旋在解旋酶作用下边解旋边复制80～100℃高温解旋，双链分开(变性)酶DNA解旋酶、DNA聚合酶TaqDNA聚合酶引物RNADNA或RNA温度体内温和条件高温相同点①需提供DNA复制的模板②四种脱氧核苷酸作原料③子链延伸的方向都是从5′端到3′端④都需要酶的催化2.PCR的反应过程一般要经历三十多次循环，每次循环可分为变性→复性→延伸三步。学.科.网zxxk.3．PCR技术反应过程中控制不同温度的意义(

2、1)90℃以上时变性，双链DNA解聚为单链；(2)50℃左右时复性，两种引物与两条单链DNA结合；(3)72℃左右时延伸，TaqDNA聚合酶促使DNA新链的合成。【例】关于DNA的复制，下列叙述正确的是()A.DNA聚合酶不能从头开始合成DNA，只能从引物的5′端延伸DNA链B.DNA复制不需要引物C.引物与DNA母链通过碱基互补配对进行结合D.DNA的合成方向总是从子链的3′端向5′端延伸【答案】C1．多聚酶链式反应(PCR)是一种体外迅速扩增DNA片段的技术。PCR过程一般要经历30多次下述循环：95℃条件下使模板DNA

3、变性、解链→55℃条件下复性(引物与DNA模板链结合)→72℃条件下引物链延伸(形成新的脱氧核苷酸链)。下列有关PCR过程的叙述，不正确的是()A．变性过程中破坏的是DNA分子内碱基对之间的氢键，也可利用解旋酶实现B．复性过程中引物与DNA模板链的结合是依靠碱基互补配对原则完成的C．延伸过程中需要DNA聚合酶、ATP、4种核糖核苷酸D．PCR与细胞内DNA复制相比，其所需要酶的最适温度较高【答案】C二、DNA的粗提取与鉴定1．基本原理(1)DNA在不同浓度的NaCl溶液中的溶解度不同，在0.14mol/L的NaCl溶液中的溶

4、解度最低；(2)DNA不溶于酒精溶液；(3)DNA不被蛋白酶所水解；学.科.网zxxk.(4)DNA可被二苯胺染成蓝色。2．方法目的方法目的溶于NaCl溶液中并稀释①NaCl浓度为2mol/L时，DNA溶解，而部分蛋白质发生盐析而生成沉淀，通过过滤可除去部分蛋白质及不溶于NaCl溶液的杂质②当NaCl溶液稀释至0.14mol/L时，DNA析出，过滤可除去溶于NaCl中的部分蛋白质和其他杂质加入嫩肉粉嫩肉粉中含木瓜蛋白酶，水解蛋白质加入冷却酒精(95%)DNA析出，除去溶于酒精的蛋白质加入二苯胺，并沸水浴鉴定DNA(1)哺乳动

5、物成熟的红细胞中不含细胞核，也没有DNA，不适于作DNA提取的材料，但却是提取血红蛋白的理想材料。(2)实验过程中两次用到蒸馏水，第一次目的是使成熟的鸡血细胞涨破释放出DNA，第二次目的是稀释NaCl溶液。【例】下表是关于“DNA粗提取与鉴定”实验中所使用的材料、操作及其作用的表述。正确的是()学.科.网zxxk.试剂操作作用A柠檬酸钠溶液与鸡血混合防止血液凝固B蒸馏水与鸡血细胞混合保持细胞形状C蒸馏水加入到溶解有DNA的NaCl中加速DNA的溶解D冷却的酒精加入到过滤后DNA的NaCl中产生特定的颜色反应【答案】A1.实验

6、中共3次过滤。过滤时使用的纱布层数与取其滤液或黏稠物有关。第1、3次要收集其滤液，使用的纱布为1～2层，第2次要收集其滤出的黏稠物，使用的纱布为多层。2.实验中有6次搅拌，除最后一次搅拌外，前5次搅拌均要朝向一个方向，并且在析出DNA、DNA再溶解和提取中，各步搅拌均要轻缓，玻璃棒不要直插烧杯底部，以防止DNA分子断裂。3.实验中有两次使用蒸馏水。第一次加蒸馏水是为了使血细胞吸水膨胀破裂；第二次加蒸馏水是为了稀释NaCl溶液使DNA析出。4.用高盐浓度的溶液溶解DNA，能除去在高盐中不能溶解的杂质；用低盐浓度的溶解使DNA析

7、出，能除去不能溶解在低盐溶液中的杂质。因此，通过反复溶解与析出DNA，就能够除去与DNA溶解度不同的多种杂质。5.最后析出DNA必须使用冷酒精(至少在5℃以下存放24小时)，并且将1份含DNA的NaCl溶液加入到2份的冷酒精中。如果悬浮在溶液中的DNA丝状物较少，可将混合液放入到冰箱中再冷却几分钟。1.(改编)在DNA分子的粗提取实验中，两次向烧杯中加入蒸馏水的作用是()A.稀释血液、冲洗样品B.使血细胞破裂、降低NaCl浓度使DNA析出C.使血细胞破裂、增大DNA溶解量D.使血细胞破裂、提取含杂质较少的DNA【答案】B2．

8、(2010年青岛模拟)下列关于DNA粗提取与鉴定的说法正确的是()A．氯化钠的浓度越低，DNA的溶解度越大B．人的血液不可代替鸡血进行该实验C．柠檬酸钠的主要作用是加速血细胞破裂D．利用DNA易溶于酒精的特点可除去DNA中的部分杂质【答案】B3．向溶有DNA的2mol/L的NaCl溶液中不