马铃薯高产栽培中农艺,生理,生态指标及测定方法

马铃薯高产栽培中农艺,生理,生态指标及测定方法

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1、马铃薯高产栽培中的农艺性状、生理、生态指标及测定方法(2011050094尚辉作物栽培学及耕作学)马铃薯块茎干物质的95%以上來口光合产物,因此其生理生化反应,马铃薯的生长状况以及周围的生态坏境都会影响到马铃暮的最终产量,现将马铃暮高产栽培屮的农艺性状、生理、生态指标及测定方法介绍如下:1农艺性状及其测定方法1.1出苗率:现蕾期分小区调查出苗率,出苗率二出苗数/播种穴数X100%。1.2主茎数:盛花期开始,每20d在各小区随机选取5株,数其主茎数,共测定4次,最后计平均值;1.3株高:盛花期测定,每小区随机选20株,测量自然株高,取平均值;1・4叶面积指数:在块

2、茎形成期和块茎增长期,每小区采样10株,用剪纸称重法测叶而积,再计算叶面积指数;也可以川叶面积测定仪进行测定。叶面积指数二叶面积和/样地面积X100%。1.5单株结薯数:成熟期挖取20株,数块茎个数;1.6穴鲜薯质量:成熟期挖取20株,分株称虽块茎质量;1・7产量:成熟期按小区单收,计产(kg)。1・8叶数,叶形,叶色等进行观测记录,记录参照马铃薯农艺性状指标。2生理指标及其测定方法2.1叶绿素含量叶绿素含量的测定采用分光光度比色法或者叶绿素测定仪测定。取0.5g生菜叶片研磨,加少最的碳酸钙粉及80%丙酮进行研磨,匀浆过滤后用80%的丙酮定容15ml,以80%的

3、丙洞作对照,在分光光度计上测定665nm,649nni,470nm处的光密度值。以Amon公式计算叶绿素的含量。叶绿素总量(mg/g)=色素浓度(C)X提取液体积X稀•释倍数一样品干重(或者湿重)2.2还原糖含量采用3,5一二硝基水杨酸(DNS)比色法。称取生菜叶片样品lg,加8mL蒸馆水匀浆,lOOOOrpm离心20min,吸取上清液2.OmL,加1.5mL的DNS试剂,沸水中煮5min,冷却后蒸懾水用定容到25.OniL,测A51oo以葡萄糖作标准曲线并计算还原糖含量。2.3电导率测定用打孔器取10片68mm的生菜叶片,用自来水冲洗数次,再用去离子水冲洗,然

4、后用50ml的去离子水加盖浸泡lh,测电导率3,(以蒸憎水为空白对照组。总沸l-2min,静置lh,再测电导率S2。相对电导率L=Si/S2.)o2.4丙二醛(MDA)含量采用硫代巴比妥酸(TBA)比色法。取马铃薯叶片样品lg加入2mL10%TCA和少量石英砂,研磨,再加8mlTCA进一步研磨,匀浆液4000r/min离心lOmin。取2ml,上清液,加2ml质量分数为0.6%TBA溶液,沸水中煮15min,冷却后离心,取上清液测定450,532和600nm波长下的吸光度值,以TCA溶液取代酶液作为空口。根据公式:MDA质量摩尔浓度(umol.L-l)=c.N.

5、W计算出MDA浓度及生菜样甜中的含量2.5超氧化物歧化酶(SOD)活性取马铃薯叶片0.5g,加入6mL提取介质(0.05mol/LPH=7.8磷酸缓冲液,内含质量分数为1%的聚乙烯毗咯烷酗),冰浴研磨,加入提取介质使得终体积为10ml,4°C下10500r/min离心20min,上清液为SOD粗酶液。酶活力测定:反应体系屮顺次加入0.05mol/LpH7.8磷酸缓冲溶液3mL,130mmol/LMet溶液0.6mL,750umol/LNBT溶液0.6mL,lOOumol/LEDTA溶液0.6mL,粗酶液0.2mL,20umol/L核黄素0.6mL,蒸懈水0.4

6、ml振荡摇匀,以缓冲液作空白对照,不加酚液(以PBS代替)的反应悸作为授大光化还原管,在40001ux下照光20min后立即避光迅速测定A560的值。SOD活性二(A0-As).VT.(0.5A0.WF.Vj'1SOD比活力二SOD总活性.2.6过氧化物酶POD活力测定愈创木酚比色法测定过氧化物酶活性,取马铃薯叶片样品0.5g,加入PH5.5磷酸缓冲液6mL,冰浴研磨匀浆,匀浆液转移至离心管中,4000r/min离心10min,上清液转入25ml容量瓶,沉淀物用5mlpH5.5磷酸缓冲液再提取两次,上清液并入容最瓶中,定容至刻度。酶活性测定反应体系:2.9mL磷

7、酸缓冲液(pH5.5),1.OmL0.05mol/L愈创木酚,0.ImL粗酶液,最后加入0.ImL质量分数2%H2O2溶液,迅速颠倒混匀,于37°C水浴中15min,转入冰浴中,并加2.0ml20%三氯乙酸终止反应,过滤,稀释,以煮沸5min酶液代替粗酚液作为对照,测a.70o以每分钟A470的化变值0.01为一个相对酶活单位,计算植物组织内过氧化物酶酶活力的大小(单位:U/g鲜重)。2.7多酚氧化酶PPO活力测定(比色法测定多酚氧化酶活性)1称取马铃薯叶0.5g,加入2.5ml.PH7.2磷酸缓冲液,少许PVP,研磨匀浆,转移至离心管,再用2・5ml、PH磷酸

8、缓冲液冲洗研钵,合并提取

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