固定化酶生产壳寡糖的研究【毕业论文】

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1、本科毕业论文（20届）固定化酶生产壳寡糖的研究专业：食品科学与工程目录摘要1Abstract21.前言31.1壳寡糖的概述31.2制备壳寡糖的方法41.2.1化学法41.2.2酶解法41.2.3物理法51.2.4糖转移法51.3固定化细胞技术51.4壳聚糖酶的固定化62实验材料、主要仪器与试剂62.1实验材料62.2主要仪器62.3主要试剂72.4培养基73实验方法73.1B.thuringiensisZJOU-010的培养条件73.2壳聚糖酶液的制备73.3DEAE-22纤维素的交联73.4壳聚糖酶的固定化83.5酶活力的测定83.5.1固定化壳聚糖酶酶活的测

2、定83.5.2游离壳聚糖酶酶活的测定84实验结果与讨论84.1固定化壳聚糖酶的制备条件优化84.1.1戊二醛浓度对固定化B.thuringiensisZJOU-010壳聚糖酶活力的影响84.1.2加酶量对固定化B.thuringiensisZJOU-010壳聚糖酶酶活的影响94.1.3固定化时间对固定化B.thuringiensisZJOU-010壳聚糖酶酶活的影响94.2固定化酶反应条件的优化104.2.1不同的pH值对固定化B.thuringiensisZJOU-010壳聚糖酶活力的影响104.2.2不同的温度对固定化B.thuringiensisZJOU-

3、010壳聚糖酶酶活的影响114.2.3固定化B.thuringiensisZJOU-010壳聚糖酶的热稳定性124.2.4对固定化B.thuringiensisZJOU-010壳聚糖酶动力学参数的测定134.2.5对固定化B.thuringiensisZJOU-010壳聚糖酶反应批次的试验145小结15摘要：壳寡糖是一种具有很多功能的产品，广泛的应用在食品、医药、化妆品等诸多领域。而利用壳聚糖酶来降解壳聚糖已经成为了现今生产功能性壳寡糖的首选途径。本文采用的是吸附交联技术，以DEAE-22纤维素作为载体、戊二醛作为交联剂，固定Bacillusthuringien

4、sisZJOU-010壳聚糖酶，考察了固定化酶制备的条件，并且研究了固定化酶的性质等。实验结果表明B.thuringiensisZJOU-010壳聚糖酶的最佳固定化条件为：加酶量20mg，戊二醛浓度3.0%，固定化时间10h；并且在此条件下制备得出的固定化壳聚糖酶的最适温度和pH值分别为50℃和5.0；与游离酶相比，该固定化酶的热稳定性比较好，在40℃和50°C下的半衰期(t1/2)分别为36.3h和6.2h，动力学参数Km值为9.19g/L；该固定化酶重复使用了10批后，活力仍然可以保持初始的87.96%。关键词：壳聚糖；壳寡糖；固定化；壳聚糖酶；Bacill

5、usthuringiensisZJOU-010；15Abstract:Chitooligosaccharideshasbeenprovedtoexhibitabroadrangeofpotentialapplicationsinbiomedicines,pharmaceuticals,food,cosmeticandagriculture.Recently,bioconversionofchitinousmaterialstooligosaccharidesmediatedbychitosanasehasbeenproposedasanattractivealt

6、ernative.Inthisstudy,chitosanaseinB.thuringiensisZJOU-010wasimmobilizedbycross-linkingtechnologywhereDEAE-22cellulosewasadoptedascarrierandglutaraldehydewasusedcrosslinkingagent.Theimmobilizationconditionsandthecharacteristicsoftheimmobilizedenzymewereinvestigated.Itwasindicatedthatt

7、heoptimumpreparationconditionsweresetasfollows:3.0%ofglutaraldehyde,20mgofaddedenzyme,4hofimmobilizationtime.Undertheseconditions,theobtainedimmobilizedenzymeexhibitedanoptimalpHandtemperatureof5.0and50℃,respectively,andthekineticparameterKmwas14.29g／L.Half-life(t1/2)oftheimmobilized

8、enzymeat40℃a