钬离子溶液诱导蚕豆根细胞凋亡的初步研究

钬离子溶液诱导蚕豆根细胞凋亡的初步研究

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1、’9"""""""""""""""""""""""""""""""""""""""""""""""""""""""""""""""钬离子溶液诱导蚕豆根细胞凋亡的初步研究!汪承润!!,闵莉",蒋继宏#,李宗芸$,屈艾$(!%淮南师范学院化学生物系,安徽淮南,"#"&&!;"%淮南师范学院图书馆,安徽淮南"#!&&!;#%徐州师范大学生物工程中心,江苏徐州""!!!’;$%徐州师范大学生命科学学院,江苏徐州""!!!’)摘要:运用硝酸钬溶液对蚕豆根尖染毒,提取根尖细胞()*进行琼脂糖凝胶电泳;取根尖压片观察细胞核异常情况;同时取根尖细胞进行单细胞凝胶电泳。结果表明,钬离子诱导了根尖细胞核异常;在+

2、,-·./!剂量下,彗星细胞尾长和拖尾细胞数量在"$0内随着根尖处理时间的延长而增加,处理"$0时,琼脂糖凝胶电泳中出现明显的连续拖尾带型;处理$+0后彗星拖尾缩短,琼脂糖凝胶电泳中拖尾带型缩短,推测可能发生了()*修复作用或者交联作用。’$,-·./!剂量处理"$0,彗尾缩短且出现核碎裂,琼脂糖凝胶电泳中未出现拖尾带型。实验中未观察到细胞凋亡的典型()*“梯状带型”和特征性彗星拖尾现象。关键词:植物学;钬离子;()*梯状带型;单细胞凝胶电泳(1234);细胞凋亡;稀土中图分类号:567;8’!$%+!文献标识码:*文章编号:!&&&/$#$#("&&$)&7/&’9"/&’细胞凋亡(:;<;

3、=<>?>)—般也称编程性细胞死液的配制:精确称取定量氧化钬(高纯,购自上海亡(;@<-@:,,ABCADDBA:=0E2(),是细胞在内外环化学试剂采购供应站分装厂),加微量稀H)8#,境作用下由基因调控的主动连续的“自杀”过程。加热反应制备结晶体,配制贮备液(;H约为7%已有研究表明,E2(在细胞的增殖、分化、胚胎7),再稀释成应用液(本文均以氧化钬质量体积比发育、有机体自稳平衡的维持及多种病理过程中表示溶液剂量):’$和+,-·./!。具有重要作用[!]。动、植物细胞的凋亡具有许多彗星电泳试剂的配制:(!)H

4、,NH2D(;HO+%7),!&,,

5、组织中有E2(的存(.P*,购自1?-,:公司),磷酸缓冲液配制,浓度在[$]。彗星实验研究也表明,发生E2(的细胞出/!&%7L;($)细胞裂解液("%7,NH2D,;H!&%"国内外报道较少[’,6],而且均为离体细胞培养方&,!L十二烷基肌氨酸钠(*PT4128分装),用前面的研究。本文运用琼脂糖凝胶电泳和单细胞凝加!LM@?=

6、&,,NH2D,;H6%细胞凋亡的影响。7);(6)溴化乙锭(购自1?-,:公司),浓度!#·,D/!;(+)EU1溶液(;H6%$)和H:IVW>液的配!材料和方法#-制见《细胞生物学实验》(杨汉民主编,高等教育!%!材料及试剂的配制出版社,!9+7年);(9)苔盼兰(曲利本蓝),中国小青皮豆,徐州当地习见品种[+]。硝酸钬溶医药集团上海化学试剂公司进口分装,H:IVW>液!收稿日期:"&&#/!"/#&;修订日期:"&&$/&7/"&基金项目:淮南师范学院引进人才专项基

7、金作者简介:汪承润(万方数据!9’’/),男,安徽金寨人,硕士,讲师!通讯联系人(4N,:?D:XC0@JIY>?I:%C<,)#期汪承润等钬离子溶液诱导蚕豆根细胞凋亡的初步研究M(>!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!配成,浓度!"#$。G-’按0WL混匀,从中取#!!V混合液铺于第一层%&’提取和琼脂糖凝胶电

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