普通菜豆PvGF14a-g基因在盐胁迫下的功能分析

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1、分类号：Ｓ６４３．１单位代码：１０１８３２０１６８６４００３密级研究生学号：：公开吉林大学硕士学位论文专业学位（）普通菜豆ＰｖＧＦ４ａ／ｇ基因在盐胁迫下的功能分析ＦｕｎｃｔｉｏｎａｌａｎａｌｓｉｓｏｆｃｏｍｍｏｎｂｅａｎｅｎｅｙｇＰｖＧＦ１４ａ／ｇｕｎｄｅｒｓａｌｔｓｔｒｅｓｓ作者姓名：高国丽：类别．农业硕士领域（方向）：园艺指导教师：李绪彦副教授培养单位：植物科学学院２０１８年６月普通菜豆PvGF14a/g基因在盐胁迫下的功能分析Functionalanalysisofcommo

2、nbeangenePvGF14a/gundersaltstress作者姓名：高国丽领域（方向）：园艺指导教师：李绪彦副教授类别：农业硕士答辩日期：2018年5月29未经本论文作者的书面授权，依法收存和保管本论文书面版本、电子版本的任何单位和个人，均不得对本论文的全部或部分内容进行任何形式的复制、修改、发行、出租、改编等有碍作者著作权的商业性使用（但纯学术性使用不在此限）。否则，应承担侵权的法律责任。吉林大学硕士学位论文原创性声明本人郑重声明：所呈交学位论文，是本人在指导教师的指导下，独立进行研宄工作所取得的成果。除文中己经注

3、明引用的内容外，本论文不包含任何其他个人或集体已经发表或撰写过的作品成果。对本文的研宄做出重要贡献的个人和集体，均己在文中以明确方式标明。本人完全意识到本声明的法律结果由本人承担。学位论文作者签名：？５象〇］日期：《年《月日中文摘要普通菜豆PvGF14a/g基因在盐胁迫下的功能分析普通菜豆（PhaseoleaevulgarisL.）是重要的食用豆类之一，具有很高的营养和食用价值，土壤盐渍化已成为限制普通菜豆生产的主要环境因素，因此研究普通菜豆的抗盐机理，发掘并利用耐盐相关基因，培育抗盐菜豆品种具有重要意义。14-3-3蛋白是一类

4、普遍存在于真核生物中的保守蛋白家族，在响应非生物胁迫中具有重要作用。SOS2基因是盐过敏感（SOS）途径的重要组成部分，在盐胁迫信号转导中发挥着关键作用。在拟南芥中的相关研究表明，14-3-3λ通过与SOS2基因互作参与调控拟南芥对盐胁迫的适应性，但是关于普通菜豆14-3-3蛋白在盐胁迫响应方面的报道很少。本研究选取了两个普通菜豆14-3-3蛋白基因PvGF14a和PvGF14g，并对它们在盐胁迫下的功能进行了分析。本研究的主要结果如下：1.PvGF14g启动子序列分析表明，在它的启动子区域中存在非生物胁迫相关的顺式作用元件，通过对PvGF14a/gp

5、ro::gus转基因植物的GUS组织化学染色分析，发现PvGF14a和PvGF14g启动子驱动的gus基因在拟南芥各组织中均有表达，但是在种子中不表达，推测这两个基因在植物整个生长阶段及环境胁迫中具有重要作用，但可能不直接参与种子生长发育的调控过程。此外，PvGF14a转基因荚果的GUS染色比PvGF14g转基因荚果的GUS染色要深，表明菜豆14-3-3蛋白基因PvGF14a、PvGF14g具有组织表达特异性；2.通过分析盐胁迫下35Spro::PvGF14a/g转基因植物的表型，发现盐胁迫处理下转基因种子发芽率低于野生型，盐胁迫处理对转基因幼苗的生长

6、抑制大于野生型，但土壤中盐胁迫处理后转基因植株叶绿素含量与野生型并无明显差异，说明PvGF14a和PvGF14g在种子萌发和幼苗早期生长阶段负向调控植物的耐盐性；3.PvSOS2是拟南芥ATSOS2在菜豆中的同源基因，盐胁迫下PvSOS2的基因表达量显著降低。通过载体构建，获得了携带有PvGF14a、PvGF14g和PvSOS2基因的酵母表达载体和双分子荧光表达载体。酵母双杂交试验表明，在酵母细胞中PvGF14g与PvSOS2能够发生相互作用，而PvGF14a与PvSOS2间没有互作I发生，双分子荧光互补试验显示，PvGF14a和PvGF14g在烟草植

7、物体内均能与PvSOS2发生互作，但是相对于PvGF14a，PvGF14g与PvSOS2的相互作用更强，说明PvGF14a和PvGF14g存在异形体特异性。以上结果为揭示普通菜豆的抗盐机理和进一步培育普通菜豆抗盐品种提供了理论依据。关键词：普通菜豆，14-3-3蛋白，盐胁迫，SOS2基因IIAbstractFunctionalanalysisofcommonbeangenePvGF14a/gundersaltstressCommonbean(PhaseoleaevulgarisL.)isoneofthemostimportantediblelegume

8、sintheworld,whichhashighnutritionalandedibleval