杨树应答盐胁迫wrky基因的筛选及功能分析

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1、学校代码；１０２２５学号；Ｓ１５７２６学化冷文杨树应答盐胁迫ＷＲ公ｒ基因的筛选及功能分析王继颖指导教师姓名：姜廷波教授东北林业大学申请学位级别：硕±学科专业；林木遗传育种论文提交日期１５年４月论文答辩日期；２０１５年６月：２０授予学位单位；东北林化大学授予学位日期；２０１５年６月答辩委员会主席：论文评阅人；‘．■？．．．．．．－．＇、产：－又于＼心＇：；；心Ｖ．二一；Ｖｉ＾／’Ｖ／．＇＇．ｔ－．？．．．Ｖ．？＇．？．

2、．—＇一．’．占：＾ｖ；一：．请．Ｋ苗巧，＇－．？ＶＶ一二■＇．＇、■－．＞．－：＇＇＇ＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙＣｏｄｅ：１０２２５ＲｅｇｉｓｔｅｒＣｏｄｅ；ＳＩ５７２６ＤｉｓｓｅｒｔａｔｉｏｎｆｏｒｔｈｅＤｅｒｅｅｏｆＭａｓｔｅｒｇＳｅｌｅｃｔｉｏｎａｎｄｆｕｎｃｔｉｏｎａｌａｎａｌｓｉｓｏｆｏｌａｒＷＲＫＹｙｐｐｔｒａｎｓｃｒｉｔｉｏｎｆａｃｔｏｒｅｎｅｉｎＫｓｏｎｓｅ化ｓａｌｔｓｔｒｅｓｓｐｇｐＣ

3、ａｎｄｉｄａ化：ＪｉｉｎｇＷａｎｙｇＳｕｅｒｖｉｓｏｒ：Ｐｒｏｆ．ＴｉｎｂｏＪｉａｎｐｇｇＡｃａｄｅｍｉｃＤ巧ｒｅｅＡｌｉｅｄｆｏｒ：ＳｃｈｏｏｌｏｆＦｏｒｅｓｔｒｙｐｐＳｅｃｉａｌｉｔ：ＦｏｒｅｓｔＧｅｎｅｔｉｃｓａｎｄＢｒｅｅｄｉｎｐｙｇＤａｔｅｏｆＯｒａｌＥｘａｍｉｎａｔｉｏｎ：Ｊｕｎｅ２０１５，Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ：ＮｏｒｔｈｅａｓｔＦｏｒｅｓｔｒｙＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙ＾摘要植物受到不良环境脉迫，会通过激活或抑制胁

4、迫相关基因的转录及生理生化的改变来适应环境的变化。转录因子在响应环境信号和调控基因表达变化中起重要作用。本研ＷＲＫＹ转录因子基因究为筛选和鉴定耐盐胁迫的杨树，从杨树基因组数据库中获得１１９个杨树ＷＲＫＹ转录因子基因的全长ｃＤＮＡ序列，并对其表达特性进行分析，对２个盐胁迫诱导表达的眠Ｒｉｉ：巧６、基因进行功能分析，结果如下：利用实时癸光定量ＰＣＲ技术分析１１９个杨树ＷＲＫＹ转录因子基因在盐胁迫条件下的表达水平。结果表明，有５１个ＷＲＫＹ转录因子基因在盐胁迫条件下表现出差异表达，

5、其中１７个基因下调表达，３４基因上调表达。Ｗ１３个应答盐胁迫的基因为代表，研究杨树ＷＲＫＹ转录因子基因在胁迫条件下不同胁迫时间和不同组织的差异表达。结果表明，杨树ＷＲＫＹ转录因子基因在根，茎，叶组织中均有表达，但它们的表达水平和３表达模式显著不同，在根部，送１３个基因从处理小时后开始被诱导表达，并在９小时表达水平最商。在叶中的表达情况与根中相似。在茎中，１３个基因表这没有响应ＮａＣＩ胁迫。将盐胁迫诱导表达水平最商的ＷＲＫＹ５６、ＷＲＫＹＨ６转录因子基因ｃＤＮＡ插入到植物表达载体

6、ＰＢＩ１２１，用簾花法转化拟南芥，比较转基因拟南芥和野生型拟南芥■的根长，鲜重Ｗ、种子萌发率和生理指标等。结果表明，转趴２／：巧６和Ｗ化基因拟南芥在盐胁迫条件下种子萌发率、根长、鲜重明显提高、ＭＤＡ含量明显降低、脯氨酸含量明显提高。在转ＷＲＫＹ５６基因株系和转ＷＲＫＹ１１６基因株系ＳＯＤ巧ＰＯＤ活性一ＷＲＫＹ表现不致，转５６基因株系ＳＯＤ和ＰＯＤ活性比野生型明显提髙，转ＷＲＫＹ１１６基因株系ＳＯＤ和ＰＯＤ活性比野生型明显降低。关键词ＷＲＫＹ转录因子；基因差异表达；小黑杨：盐胁迫

7、－Ｉ－ＡｂｓｔｒａｃｔＡｂｓｔｒａｃｔＴｈｅａｄａｐｔｉｖｅＫｓｏｎｓｅｓｃｏｍｍｏｎｌｕｓｅｔｒａｎｓｃｒｉｔｉｏｎａｌａｃｔｉｖａｔｉｏｎｏｒｒｅｒｅ巧ｉｏｎｏｆｅｎｅｓｐｙｐｐｇｕｏｎｓｉｇｎａｌｅｒｃｅｔｉｏｎａｎｄｔｒａｎｓｄｕｃｔｉｏｎｏｆｔｈｅｅｘｔｅｒｎａｌｓｔｉｍｕｌｉ．ＷａｎｔａｄａｔａＷｌｉｔｙｉｓｍａｉｎｌｙｐｐｐｐ＊ｏｐｅｒａｔｅｄｂｙｔｈｅＫｌａｔｉｏｎｏｆｖａｒｉｏｕｓｔｒａｎｓｃｒｉｔｉｏ

8、。ｆａｃｔｏｉｓ．Ｓｉｎｉｆｉｃａｎｔｒｏｒｅｓｓｈａｓｂｅｅｎｍａｄｅｇｕｐｇｐｇ＇ｉｎｕｎｄｅｒ巧ａｎｄｉｎｔｈｅｅｎｅｓｒｅｓｏｎｓｅｔｏｖａｒｉｏｕｓｓｔｒｅｓｓｅｓ打ｕｍｅｒｏｕｓｔｒａｎｓｃｒｉｔｉｏｎｆａｃｅｒｓｉｎｇｇｐ，ｐｔｒ－ｌａｎｔｓｈａｖｅｂｅｅｎｉｄｅｎｔｉｆｉｅｄ．ＷＲＫＹａｎｓｃｒｉｔｉｏｎｆａｃｔｏｒｓａｒｅｏｎｅｏｆｔｈｅｌａｒｇｅｓｔｒｏｕ