普通小麦中盐胁迫诱导表达基因的鉴定

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1、河南农业大学硕士学位论文普通小麦中盐胁迫诱导表达基因的鉴定姓名：郭慧娟申请学位级别：硕士专业：作物遗传育种指导教师：崔党群；王道文201206河南农业大学硕士学位论文摘要盐碱胁迫是环境胁迫的一种，由于该胁迫的普遍存在性，以及近年来土壤盐渍化不断加剧的情况，而成为限制农作物产量的主要因素之～。大量研究表明，盐碱胁迫降低了植株的干鲜重、减少了其叶面积、根系活力、相对生长量等指标，从而导致其产量的下降，因此提高作物的耐盐特性、培育耐盐品种，是现阶段育种工作者的重要目标。小麦是产量仅次于玉米的世界第二大粮食作物，同时也是

2、一种淡土作物，其耐盐特性的研究对世界农业发展具有举足轻重的意义。本研究中首先对不同小麦品种(系)的耐盐生理指标进行测量，然后通过表达谱分析，进行耐盐相关基因的筛选和鉴定，并对SAMS基因进行了较深层次的研究，为了解普通小麦的耐盐机制提供了技术支持和理论依据。1．盐胁迫下不同小麦品种(系)的生理指标，能够有效的反应材料的耐盐特性。本研究测定了搜集到的19个小麦品种(系)，在盐处理下种子的萌发率、幼苗的电导率、根长、苗长、干重、鲜重等生理指标，根据测定结果又结合材料的亲缘关系，选定了6个材料用于进一步的研究分析。2．

3、对选定的6个小麦材料，在水培条件下进行盐胁迫处理，然后分别测定每个材料的地上部分和地下部分组织中的Na+和K+的含量，通过分析发现，所选定的4个耐盐材料有三种不同的耐盐机制。表明了所选定的小麦材料具有很好的代表性，是研究普通小麦耐盐特性的合适材料。3．采用cDNA．AFLP的方法，在转录组水平上筛选多枝赖草与小麦的二体附加系Linel5的盐胁迫诱导表达基因。本研究中用了76对多态性良好的引物，挑出差异片段TDFl32条，经测序分析发现有78个基因在植物的数据库中存在同源序列，而对功能的分析表明，其中15个基因已被

4、前人在不同物种中研究证明与盐胁迫相关。4．采用荧光定量RealTime—PCR技术，对筛选得到的腺菅甲硫氨酸合成酶基因SAMS，进行盐胁迫处理不同时间段的表达方式验证。研究表明，黝螂基因在盐胁迫处理24h时在六个材料中均有较人幅度的提升，而在材料Linel5中的表达量尤其高。这表明了对Linel5中SAMS基冈的研究，对小麦雨I多枝赖草二体附加系材料的耐盐机制的探索，具有重要的意义。5．通过生物信息学分析和克隆测序相结合的方法，分别设计SAMS基因的保守引物和特异引物，从而鉴定出在普通六倍体小麦中国春中，SAMS

5、基因有六个拷贝，并且定位在了第人群的A组、B组和D组染色体上。该结果为进一步研究SAMS基因的功能等详细信息奠定了基础。关键词：小麦；盐胁迫：cDNA．AFLP；差异表达基冈；腺营甲硫氨酸合成酶基因SAMS；河南农业大学硕：￡学位论文IDENTIFICATIONOFDlFFERENTIALLYEXPRESSEDGENESINDUCEDBYSALrSTRESSlNTriticumaestivumL．ABSTRACTSupervisor：Prof．CuiDangqunMasterCandidate：GuoHuijua

6、nSaltstressiSoneoftheenvironmentalstress．Recentlycultivatedagriculturallandhaslargelybecomesalineowingtolandclearingorirrigation，theconsequenceofsaline．alkalilandisthesignificantlyreductionintheyieldofmostcrop．Ithasbeendemonstratedthatthereductionofcropyieldi

7、sduetothedecreaseonplantweight，leafarea，rootvigor,relativegrowthandSOon．Cun'ently,cropbreedersfacewiththechallengeofimprovingsalttoleranceanddevelopingsalttolerancecultivars．Wheatisoneofthemaincropsintheworld，anditismuchmeaningfullytostudythesalt-tolerancemec

8、hanismofwheatforthedevelopmentofagdculture．Inthisstudy,wemeasuredthephysiologicalindicesofnineteenwheatmaterialsfirstly,andthenanalysedthefingerprintoftranscriptomeinsixwheatmatrials，scre