2019版创新高三一轮复习系列选考总复习（浙江专版）生物讲义：第33讲克隆技术+含答案

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1、第33讲克隆技术考点克隆技术

2、考点

3、自主梳理

4、夯基固本提精华一、植物的克隆1•植物克隆(1)技术基础：植物组织培养(2)理论基础：植物细胞的全能性——原因：植物体的每个生活细胞都具有完整的全套遗传物质。(3)植物细胞的全能性的实现条件：离体；适当的营养(包括水、无机盐、维生素、蔗糖、氨基酸等)；适宜条件(无菌、温度、越、光照等)以及牛长调节物质。(4)植物激素的作用：诱导愈伤组织的形成和生长;诱导和控制再分化过程。2.植物组织培养(1)程序：半固体培养基的配制一小组织块的切取-愈伤组织的获得一新植株的再生。(2)填写基木操作过程图：亙壓］-丄囚旦區］一匿亟图中①脱分化,②再分化,A表示愈伤

5、组织,B表示胚状体或丛状苗。3•植物细胞培养和器官培养(1)植物细胞培养程序：愈伤组织一用摇床进行液体悬浮培养一单个胚性细胞一在适宜培养基中培养一细胞团-球形胚心形胚一胚状体一完整植株。(2)器官发生和形态建成的实现：通过平衡的植物激素配比进行调控。如适量的生长素和细胞分裂素配比,可诱导芽的分化；适量的口弓卩朵乙酸及适当减除其他某些激素，可诱导牛根。4.原生质体培养与植物细胞工程(1)原生质体的获得方法：在0.5〜0.6mol/L的甘露醇溶液环境(较高渗透压)下,用纤维素酶和果胶酶混合液处理根尖、叶片、愈伤组织或悬浮培养细胞，除去细胞壁,获得球形的原生质体。(1)植物细胞工程的操作过程外源

6、遗传物质善起嚴盃转基因细胞逐新植株4.植物克隆技术的应用(1)实现工厂化的植物快速繁殖(2)生产脱毒苗,恢复品种的性状(3)生产重要的次生代谢产物,如药物、色素、香料、杀虫剂等(4)育种(植物细胞工程)：转基因作物，突变体选择，单倍体育种二、动物的克隆1•动物细胞、组织培养仃)动物克隆的技术基础是动物的细胞和组织培养。(2)动物(成纤维)细胞培养的过程：(2)动物细胞培养必需传代的原因：细胞培养到一定时期，细胞会因为密度过大造成接触抑制,或者因为代谢消耗引起营养枯竭,不能正常生长。(3)原代培养和传代培养的含义①原代培养：从机佐取出后立即进行的细胞、组织培养的过程。②传代培养：将原代培养细

7、胞分成若干份,接种到若干份培养基中，使其继续生长、增殖。2.细胞系和细胞株(1)细胞系：是指可连续传代的细胞，可分为连续细胞系(恶性细胞系：具有异体致瘤性；“良性”细胞系：保留接触抑制现象，不致癌)和有限细胞系。(2)细胞株：通过一定的选择或纯化方法，从原代培养物或细胞系中获得的具有特殊性质的细胞。可分为连续细胞株和有限细胞株。2.克隆培养法(1)概念：把二±单细胞从群体中分离出来单独培养，使之繁衍成一个新的细胞群体的技术。单抗细胞株等都是应用克隆培养法建立的。(2)基本要求：必须肯定所建成的克隆来源于单个细胞。(3)提高细胞克隆形成率的措施有：①选择适宜的培养基；②添加血清;③以滋养细胞

8、支持生长;④激素刺激;⑤使用CO、培养箱;⑥调节出。3.动物的克隆繁殖(1)动物难以克隆的根本原因是体细胞中基因选择性表达,细胞质中存在调节因io(2)细胞核移植实验和动物的克隆繁殖(3)动物体细胞核成功克隆的原因：去除了核基因表达的限制。“多莉”诞生说明：动物体细胞核仍能表现全能性;胚胎和个体发育屮，细胞质具有调控作用4.单克隆抗体(1)制备过程:给小鼠注射特定的抗原培养骨髓瘤细胞从脾脏中分离B淋巴细胞(浆细胞)1骨翻瘤I细胞灭活病点诱导融合•未融合细胞］同种融合细胞h杂交瘤细胞」产生特定抗体的抗体_杂交瘤杂交瘤细胞—检测—fflfi(2)单克隆抗体的特点：特异性强、灵敏度高。VS教材选

9、考。真题感悟1.(2015-10月浙江选考节选)科研人员拟将已知的花色基因(目的基因)转入矮牵牛的核基因组中，培育新花色的矮牵牛。请回答：将消毒后的矮牵牛叶片剪成小片，在含有目的基因的农杆菌溶液中浸泡后，取出并转移至加有适当配比生长调节剂的MS培养基（含蔗糖、琼脂和抗生素，下同）上，使小叶先脱分化形成o再将其转移至另一培养基诱导形成芽，芽切割后转移至（A.LB培养基B.MS培养基+适宜浓度NAAC.MS培养基+适宜浓度BAD.NAA/BA小于1的MS培养基）上生根，形成完整植株。解析组培时，先将处理后的外植体接种在适当的培养基上，先经脱分化形成愈伤组织。再将其转移至另一培养基诱导生芽形成的

10、丛状苗，丛状苗经分离后转移至添加适宜浓度NAA的MS培养基上生根，形成完整植株。注意生根培养基中生长素类物质浓度需大于细胞分裂素类。答案愈伤组织B2.（2016-4月浙江选考节选）兔肝细胞中的基因E编码代谢甲醛的酶，拟利用基因工程技术将基因E转入矮牵牛中，以提高矮牵牛对甲醛的代谢能力，请回答:（1）将被侵染的叶片除菌后进行培养，最终得到转基因矮牵牛。其中培养过程正确的是（A.叶片在含合适浓度生长素的培养基上分化形成愈伤组