分子生物重点

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1、哈尔滨医科大学基础医学学院第十章DNA的生物合成本章主要内容：1、中心法则：分子生物学的基本法则，是1958年由克里克(Crick)提出的遗传信息传递的规律，包括由DNA到DNA的复制、由DNA到RNA的转录和由RNA到蛋白质的翻译等过程。20世纪70年代逆转录酶的发现，表明还有由RNA逆转录形成DNA的机制，是对中心法则的补充和丰富。2、半保留复制：DNA生物合成时，母链DNA解开为两股单链，各自作为模板(template)按碱基配对规律，合成与模板互补的子链。子代细胞的DNA，一股单链从亲代完整地接受过来，另一股单链则完全从新合成。两个子细胞的DNA都和亲代DNA

2、碱基序列一致。这种复制方式称为半保留复制。3、半不连续复制：领头链连续复制而随从链不连续复制，就是复制的半不连续性。4、DNA聚合酶（重点）：依赖DNA的DNA聚合酶，简写为DNA-pol；①、5®¢3¢的聚合活性；②、核酸外切酶活性。分类作用原核DNA-polⅠ对复制中的错误进行校读，对复制和修复中出现的空隙进行填补。DNA-polⅡ参与DNA损伤的应急状态修复。DNA-polⅢ是原核生物复制延长中真正起催化作用的酶。真核DNA-pola起始引发，有引物酶活性。分子生物学复习题第35页共35页哈尔滨医科大学基础医学学院DNA-polg在线粒体DNA复制中起催化作用。

3、DNA-pold延长子链的主要酶，有解螺旋酶活性。DNA-pole在复制过程中起校读、修复和填补缺口的作用。5、拓扑异构酶（难点）：既能水解、又能连接磷酸二酯键。①、拓扑异构酶Ⅰ：切断DNA双链中一股链，使DNA解链旋转不致打结；适当时候封闭切口，DNA变为松弛状态。反应不需ATP。②、拓扑异构酶Ⅱ：切断DNA分子两股链，断端通过切口旋转使超螺旋松弛。利用ATP供能，连接断端，DNA分子进入负超螺旋状态。6、单链DNA结合蛋白（SSB）：在复制中维持模板处于单链状态并保护单链的完整。7、DNA连接酶：连接DNA链3¢-OH末端和相邻DNA链5¢-P末端，使二者生成磷酸

4、二酯键，从而把两段相邻的DNA链连接成一条完整的链。8、原核生物复制的过程：①、复制起始：DNA解链，形成引发体；②、复制的延长过程：领头链连续复制，随从链不连续复制；③、复制的终止：切除引物、填补空缺、连接切口；过程酶和蛋白作用复制的条件起始解链酶解开DNA双链模板拓扑异构酶松驰超螺旋 SSB(DBP)①防止复性；②防止被水解。 分子生物学复习题第35页共35页哈尔滨医科大学基础医学学院引物酶合成RNA引物RNA引物延长DNA-polⅢDNA链的延伸、校读底物dNTP终止DNA-polⅠ切除引物,填补空隙,校读DNA连接酶连接DNA片段   能源ATP  酶和蛋白9

5、、真核生物复制的特点：①、真核生物每个染色体有多个起始点，是多复制子复制。复制有时序性，即复制子以分组方式激活而不是同步起动。②、真核生物复制的延长发生DNA聚合酶α/δ转换；10、真核生物与原核生物DNA复制的差异：①、真核生物复制子多、冈崎片段短、复制叉前进速度慢等；②、DNA复制从引发进入延伸阶段发生DNA聚合酶a/d转换；③、切除冈崎片段RNA引物的是核酸酶RNAseHⅠ和FEN1等。11、端粒：指真核生物染色体线性DNA分子末端的结构。（1）、端粒的结构特点：①、由末端单链DNA序列和蛋白质构成。②、末端DNA序列是多次重复的富含G、C碱基的短序列。（2）、

6、端粒的功能：①、维持染色体的稳定性；②、维持DNA复制的完整性；分子生物学复习题第35页共35页哈尔滨医科大学基础医学学院12、端粒酶：端粒酶RNA(humantelomeraseRNA,hTR)；端粒酶协同蛋白(humantelomeraseassociatedprotein1,hTP1)；端粒酶逆转录酶(humantelomerasereversetranscriptase,hTRT)一、选择题：D1.下列哪一方法技术用于证明了DNA半保留复制A.分光光度法B.层析法C.电镜技术D.同位素与密度梯度离心E.电泳技术C2.下列哪一关于DNA复制的说法不恰当A.半保留

7、复制B.半不连续复制C.以一条链为模板的双向复制D.保真性的复制E.具校对功能的复制C3.在本书中使用N15标记的NH4Cl是研究下列哪一内容A.转录B.DNA损伤和修复C.DNA复制方式D.蛋白质生物合成E.基因表达与调控B4.关于DNA的复制规律，说法错误的是A.半保留复制B.全保留复制C.半不连续复制D.双向复制E.高保真复制B5.原核生物的双向复制是指子A.在DNA聚合酶的两端同时复制B.在一个起始点形成两个方向相反的复制叉C.只有两个引物同时在复制D.是滚环复制特有的规律E.复制时，一条链从5’至3’方向，另一条链是3’至5’方向D6.若将