分子生物学复习重点

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1、第一章绪论1.什么是分子生物学？2.分子生物学的研究内容3.分子生物学简史1859Darwin:<>1865Mendel:Genetics1869Miescher:discoveredDNA1910,1916Morgan:geneareonchromosomes1944Avery:identifiedDNAasthematerialgenesaremadeof1953Watson&Crick：DNAstructure1958Meselson&Stahl:semiconservativereplicati

2、onofDNA1961Jacobetal:discoveredmRNA1972Berg:recombinantDNAinvitro1973Cohen:firstusedplasmidtocloneDNA1977Gilbert&Sanger:sequence1986Mullis:PCR1990Watsonetal:LauchedtheHGP1997Wilmutandcollegues:Dolly1998-Bioinformatics,Proteomes(ome)第二章染色体与DNA1.核酸的组成2DNA的结构一级结构二级结构：A-form

3、,B-form,Z-form，其他二级结构也有一定的了解稳定双螺旋结构状态的力，包括碱基对之间的氢键、碱基的堆集力、磷酸基团的静电斥力和分子内能。高级结构：正超螺旋、负超螺旋3基因组了解不同生物类基因组特点4.染色体对染色体的组成和结构有一定了解5.DNA的变性和复性Tm值，影响DNA复性反应的因素第三章DNA的复制与修复DNA的复制复制的要点1半保留复制2有起始点、终止点和方向复制如是单向进行的，基因频率在基因图上呈单向梯度，最高频率的基因和最低频率的基因是连锁的；双向复制，基因频率将以O点为中心出现双向梯度。3半不连续复制DNA的复

4、制可被分为三个阶段，即复制起始、延伸和终止。2.1基本概念2.2半保留复制2.3复制的起点、方向和速度2.4复制方式2.5DNA聚合酶2.5.1原核生物：polⅠ与校读，修复有关小片段5′→3′核酸外切酶活性大片段（Klenow片段）聚合活性、3′→5′外切活性常用的工具酶polⅡpolⅢ真正起复制作用的酶由10种亚基组成的不对称二聚体，α、ε、θ组成核心酶聚合活性、3′→5′外切活性2.5.2真核生物（DNA-pol）：α与随从链的合成有关β核酸外切酶活性与修复有关γ存在于线粒体δ与领头链的合成有关ε与校读、修复和填补缺口有关2.6原

5、核生物和真核生物DNA的复制特点一、DNA双螺旋的解旋（一）解链酶(helicase)领头链（前导链）rep蛋白DnaB随从链（滞后链）解链酶Ⅱ•（二）DNA拓扑异构酶•（三）单链DNA结合蛋白（SSB）二、冈崎片段与半不连续复制三、DNA生物合成过程（一）复制的起始前导链合成滞后链合成(二)复制的延长（三）复制的终止领头链是不间断延长的，随从链是生成一个个的冈崎片段，最后连接成一条完整的DNA链。polⅠ5′→3′外切酶活性水解引物polⅠ聚合活性填补空隙DNA连接酶连接缺口。四、DNA复制的调控a)影响因素b)严格的自我调控机制c)

6、调控主要表现在复制的起始水平上突变与诱变•突变•复制的忠实性•物理诱变剂•化学诱变剂•直接诱变•间接诱变DNA损伤的分类紫外诱导的DNA结构变化DNA的修复错配修复恢复错配碱基切除修复切除突变的碱基核苷酸切除修复修复被破坏的DNADNA直接修复修复嘧啶二体或甲基化DNA第四章RNA的合成与加工1概述转录是以DNA为模板合成RNA。在体内，转录是基因表达的第一阶段并且是基因调节的主要阶段。从DNA合成反应的化学本质、极性和模板的使用这三方面来说，转录与复制是相同的但是，也存在三个主要不同点:A转录中不需要RNA引物；B转录反应一般只用一小

7、段DNA做模板；C．在转录区，一般都只有一条DNA链可以作为模板，即转录是不对称的过程。  Ú每个RNA分子都是转录本（transcript），DNA上的转录区域称为转录单位（transcriptionunit)。转录的第一个核苷酸定义为转录单位的+1位。对应DNA链的紧接着上游的核苷酸为-1位，没有0位。催化转录的酶称为（DNA依赖的）RNA聚合酶。与DNA聚合酶不同，RNA聚合酶从头起始链的合成（没有引物）且不校正转录本。Ú成功的转录需要RNA聚合酶作用于基因上游的顺式作用启动子位置。Ú原核生物RNA聚合酶直接与DNA结合而真核生物

8、需要其他蛋白在启动子处形成起始复合物。ÚRNA聚合酶的结合效率受转录因子正或负的作用，还受转录因子与启动子结合或与更远的增强子（正）或沉默子（负）位点结合的影响。2.RNA聚合酶细菌的RNA聚合酶，像DNA