资源描述：
《老鹰茶乙醇提取物对α-葡萄糖苷酶的抑制作用》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在工程资料-天天文库。
1、老鹰茶乙醇提取物对a-葡萄糖昔酶的抑制作用苟琳'钟昱阳丄阳艺2王西瑶決（1.四川农业人学生命科学学院，2.四川农业人学农学院，四川成都611130）摘要：探讨老鹰茶醇捉取物对⑴葡萄糖昔酶活性的抑制作用。以老鹰茶为材料，经乙醇浸提得醇提取物，并通过高效液相色谱法对提取物主耍成分进行分析，进阳测定该提取物对衙萄糖廿酶活性的影响。结果表明，老聘茶醇提取物主要活性成分为黄酮类物质，该提取物对炉葡萄糖廿酶活性有较强的抑制作用，半抑制率（/C50）7J0.12mg/mLo进一步的酶动力学研究表明其抑制机理为可逆混合型抑制，对游离酶的抑制常数（KJ为0.058mg/m
2、L,而对酶.底物络合物的抑制常数（Vs）为0.178mg/mJ山此可知，老鹰茶醇提物对a■葡萄糖昔酶具有抑制作用，能有效的抑制-葡萄糖琶酶的活性。其结果揭示老騰茶有望成为抑制收稿日期：2015-10-31录用日期：201602-23基金项目：国家H然科学基金（31071433）通信作者：wxyrtl@163.com葡萄糖营酶活性的保健或医疗产品原料,具冇值得深入研究和开发应用的潜在价值。关键词：老鹰茶；a■葡萄糊廿酶；抑制作用；乙醉提取物中图分类号：Q356.1文献标志码：A%葡萄糖ffK（a-glucosidase）对糖的分解代谢具有重耍作用，是一类能
3、从低聚糖的非述原末端催化a-1,4糖昔键水解,释放出衙萄糖的一类酶,主要有麦芽糖酶、蔗糖酶、异构麦芽糖酶、乳糖解等解类⑴。已有的研究结果显示，糖尿病、肥胖症和高血脂等很多代谢性疾病都与a■葡萄糖井酶有关⑵。对于糖尿病患者而言，抑制（X■葡萄糖井酶的活性可有效的降低餐后血糖的水平，有利于控制糖尿病的发展及防治并发症的发生。因此，寻找有效的a・葡萄糖首酶抑制剂便成为了糖尿病治疗药物研发的一个重耍途径。卅i物中存在着多种生物活性成分，大都具冇重要的生物学功能。李春英⑶等在研究中发现辣椒叶的乙醇提取物对*衙萄糖廿酶具有抑制作用。作者在％匍萄糖廿酶抑制剂筛选的研究
4、中发现老鹰茶醇提物对*匍萄糖卄酶的活性具有抑制作用，但相关的酶学研究鲜见报道。老鹰茶通常是指由植物毛豹皮樟（Litseacoreanavar.lanuginosa）的叶加「•制成的茶占占，毛豹皮樟为樟科木姜子属植物⑷，我国西南四川、贵州和云南等地分布较广，民间常将毛豹皮樟的叶经干燥处理后，作为茶饮,具冇生津止渴、清热解毒的功效。冇研究表明老鷹茶中含冇多糖⑸、多酚⑹和黄酗⑺等多种生物活性成分。Jia［可等人还报道了从老鹰茶屮分离得到的多糖具有抗氧化作用。作者试图从酶学角度了解老鹰茶对（X■葡萄糖甘酶活力的影响，探讨其对■酶作用的机理，以期为老鹰茶作为相关天
5、然药物的开发利用奠定基础。1.材料与方法1.1材料老鹰茶來自于四川省雅安市老鹰茶开发繁殖场，由当年生长的毛豹皮樟嫩叶制成。主要试剂心匍萄糊廿酶（G0660・750UN）、4・硝基酚-a-D-Utt喃匍萄W（PNPG,N1377-1G）购占美国Sigma-Aldrich公司，四氢咲喃（色谱级）购HMERK,甲醇（色谱级）购6FISHER,芦丁对照晶购自中国生物制晶检定研究院，磷酸氮二钠和磷酸二氮钠等试剂为国产分析纯。主要仪器：高速万能粉碎机（FW80型）北京市永光明医疗仪器厂，三孔电热恒温水槽（DK・8D型）上海齐欣科学仪器冇限公司，电了分析天平（BS21
6、0S型）Sartorins公司，紫外可见分光光度计（UVJ240型）SHIMADZU公司，高效液相色谱仪（Agilent1260型）安捷伦科技有限公司。1.2方法1.2.1老鹰茶醇提取物的制备老丿鸳茶原材料经60°C烘干，粉碎，过筛备用。称取1.0g老丿鸳茶干粉，置于100mL三角瓶中,加入60%的乙醇30mL,60°C恒温浸提2h,8000r/min,离心10min,收集上清液。余下的残渣另加30mL60%的乙醇,经60°C浸提lh,8000r/min,离心lOmin,取上清。合并2次上清液并定容5100mL,即得老鹰茶醇提取液，浓度为10mg/mL（
7、以每毫升提取液所含的老謄茶克数表示）。1.2.2老鹰茶醇提取物主要成分高效液相色谱（HPLC）分析供试品溶液：取老鹰茶醇提取液ImL,置10mL最瓶屮，用流动相B稀释至刻度，摇匀,即得。芦丁对照站溶液：取10.05mg芦丁对照站置于10mL容量瓶中，力112.0mL甲醇溶解，再用流动相B稀释至刻度，从中精密量取l.OmL,置50mL量瓶中，用流动相B稀释至刻度，摇匀,即得。参照文献叨对老鹰茶醉提取液进行检测分析，以芦丁作为标示物质。色谱条件：色谱柱LichrospherC8,250mm><4.0mm><5pm；柱温30°C；检测波长280nm；流速1.0
8、mL/min；进样M20pLo流动相（A：四氮咲喃/15.6g/L的磷酸二氮钠溶
