Agilent 1260 HPLC 操作规程

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1、Agilent1260HPLC操作规程1开机1.1打开电脑1.2打开液相色谱各个模块的电源1.3双击桌面“LC1260(Online)”,进入联机界面1.4排气:1.4.1手动旋开泵处冲洗阀(逆时针旋转约1圈)1.4.2右键单击“Pump”图标区域,选择“Method”选项,进入泵编辑画面,设流速:5ml/min,点击“确定”;1.4.3右键单击“Pump”图标区域,点击“Control”选项,选中“ON”,点击“确定”,则系统开始冲洗,直到管线内(由溶剂瓶到泵入口)无气泡为止(一般为5分钟),切换通道继续

2、冲洗,直到所有要用通道无气泡为止;1.4.4右键单击“Pump”图标,点击“Method”选项,设流速:0ml/min,手动旋紧冲洗阀;1.4.5右键单击“Pump”图标,点击“Method”选项,按照方法要求选择合适比例的流动相,设流速:1.0ml/min;(不一定是1)1.4.6同理右键单击“ColumnComp”,“DAD”图标,点击“Method”选项,按照方法的要求设置温度,波长,点击“控制”选项,“ON”打开柱温箱和检测器。2编辑方法2.1点击“Method”——“EditEntireMetho

3、d”开始编辑完整方法;2.2选中除“DataAnalysis”外的三项,进入下一选项卡,选择“Als”(自动进样),点击“OK”,进入下一选项;2.3选择“Method”菜单下“MethodInformation”选项,在“MethodComments”中加入方法的信息(如:Thisisfortest!),选择“OK”,进入下一选项;2.4泵参数设定:右键单击“Pump”图标,点击“Method…”选项,设置“Flow”:如1.0ml/min;“StopTime”:如10min(该停止时间仅为做一个样品需要

4、的时间),按照要求选择合适比例的流动相配比,选择“OK”,进入下一选项;2.5自动进样器参数设定:右键单击“Sampler”图标,点击“Method”选项,选择“Injectionvolume”,输入进样体积,选择“OK”,进入下一选项;2.6柱温箱参数设定:右键单击“ColumnComp”,点击“Method”选项,设置“Left”温度(可设置温度范围:低于室温10℃-80℃),一般“Left”和“Right”温度一致,选择“Combined”绑定即可,“StopTime”选择“AsPump/Inject

5、or”,选择“OK”,进入下一选项;2.7UV检测器参数设定:右击“DAD”,点击“Method…”选项,下方的空白处输入所需的检测波长(可根据需要选择多个波长,最多可选8个波长);“StopTime”选择“AsPump/Injector”;“Spectrum”——“Store”选项下,根据需要选择“None”或“All(全波长扫描)”等选项,选择“OK”,进入下一选项;2.8编辑方法完毕,从“Method”菜单中,选中“SaveMethodAs”,输入一方法名,选择“OK”,保存方法成功。3单针进样3.1

6、从“RunControl”菜单中,选择“SampleInformation”选项,输入“OperatorName”;在“DataFile”中选择“Path”和“Prefix/Counter(文件命名)”设置“Prefix(一般设置为年月日)”和“Counter”;输入“Location(样品位置)”和“SampleName”,选择“OK”,进入下一选项;3.2基线平稳后选择“RunControl”中的“RunMethod”选项,开始进样。4序列进样4.1选择“Sequence”菜单下“SequenceTab

7、le”选项,在“ConfiqureTable”中选择需要选项,一般为“Vial(样品瓶)”,“SampleName(样品名称)”,“MethodName(方法名称)”,“Inj/Vial(进样次数)”,“SampleType(样品类型)”,“Datafile(文件名)”和“InjVolume(进样体积)”;4.2点击“Inset”生成一行,设置上述参数,选中该行,点击“Copy”和“Paste”复制后修改相应参数,即生成序列表,选择“OK”,进入下一选项;4.3点击“Sequence”菜单下“Sequenc

8、eParameters”选项,选择序列数据的“Path”(序列会自动生成以“序列名称-时间”为名称的文件夹保存数据),数据建议选择“Prefix/Counter”保存;在“Shutdown”选项下选中“Post-SequenceCommand/Macro”,根据需要选择“PUMPALLOFF(序列结束后关闭泵)””“LAMPALLOFF(序列结束后关闭紫外灯)””“STANDBY(序列结束后关闭紫外灯和泵)”,选

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