sop-agilent 1260 hplc(hplc标准操作程序)

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1、密级密编号文件名称Agilent1260（Chemstation）高效液相色谱仪操作、维护、维修及校准版本第Ⅰ版编订人批准人分发号审核人复制份数颁布日期1.目的此SOP为Agilent1260（Chemstation）高效液相色谱仪的操作、维护、维修及校准提供指导。2.范围此SOP适用于仪器管理员和实验人员对Agilent1260（Chemstation）高效液相色谱仪的操作、维护、维修及校准。3.定义无4.职责4.1仪器管理员4.1.1负责对实验人员进行培训。4.1.2负责确保实验人员遵循此SOP中的规定。4.1.3负责对仪器的维修及校准。4.1.4登记仪器的故障检查及处理情况。

2、4.2实验人员4.2.1按照此SOP中描述的程序进行操作和维护。4.2.2登记仪器使用情况和日常维护情况。4.2.3液相色谱仪或程序发生故障时需立即通知仪器管理员。5.程序5.1操作步骤5.1.1查看仪器的校验标志，未经校验的仪器不得使用。5.1.2检查仪器使用记录登记，了解前一次仪器使用情况及仪器完好情况。5.1.3开机5.1.3.1准备好流动相5.1.3.2打开计算机电源，输入用户名和密码，进入Windows2007画面。5.1.3.3打开1260HPLC各模块电源。双击桌面上“HPLC1260（联机）”图标，出现登录画面，在“登录名”中输入用户名，“密码”中输入密码，点击“确

3、定”。工作站自动与1260HPLC通讯，进入联机工作站画面。切换至“方法和运行控制”界面。本仪器有两名管理员，用气用户名和密码进入系统可增加用户，设定权限。可有多名实验人员，实验人员可进行方法、序列和报告的创建和修改。5.1.4更换色谱柱安装色谱柱，确保管路管口顶住柱芯，旋紧螺帽。确保色谱柱的方向正确。1.1.1排气1.1.1.1把流动相放入溶剂瓶中。1.1.1.2检查泵密封垫清洗溶剂瓶中的15%异丙醇是否足量，是否干净。在泵运行前，右键点击系统视图中的四元泵模块，选择“控制”，泵密封垫清洗组件下勾选“定期”，设置“周期”和“开启时间”，点击确定。1.1.1.3打开排气阀，为各个泵

4、排气，设置泵的参数，右键点击四元泵模块，勾选溶剂A，设定比例为100%，流量设为5.0mL/min，运行2分钟后，依次用同样的方法设置溶剂B、溶剂C、溶剂D。4个泵排气完成后，每个泵比例设为25%，流量为5.0mL/min，混合脱气2分钟，待排气完成后停泵，关闭排气阀。1.1.2方法，序列及数据路径及文件名的设置。1.1.2.1进入脱机工作站：双击桌面上“HPLC1260（脱机）”图标，进入脱机工作站画面。1.1.2.2方法：文件夹图标→“调用方法”→选择“仪器名方法”文件夹→新建文件夹“项目名”→在“项目名”下新建“项目”→最后一个文件夹中以当日的日期为文件名。1.1.2.3序

5、列：文件夹图标→“调用序列模板”→选择“仪器名序列”文件夹→新建文件夹“项目名”→在“项目名”下新建“项目”→保存序列时以最后一个文件夹中以当日的日期为文件名。1.1.2.4数据：文件夹图标→“调用数据”→选择“仪器名数据”文件夹→新建文件夹“项目名”→在“项目名”下新建“项目”→在“项目”文件夹下新建当日检测文件夹→在其中新建“日期”文件夹，序列数据名保存为“001，002，......”。（仪器数据存储路径暂时无法更改）1.1.3新建及调用方法1.1.3.1新建方法5.1.7.1.1在联机工作站画面，切换至“方法和运行控制”界面。选择“方法”菜单下的“新建方法”，调用化学工

6、作站的缺省方法DEF.LC.M。1.1.3.2设置仪器参数5.1.7.1.2.1设置进样器：右键点击进样器模块，选择“方法”。在弹出的界面下进行如下设置：设置进样量；“针清洗”项下勾选“启用洗针”并设置洗针瓶位置；“停止时间”项下点选“与泵一致/无限制”；其他选项一般采用默认设置。5.1.7.1.2.2设置四元泵：右键点击四元泵模块，选择“方法”。在弹出的界面下进行如下设置：设置流量；“溶剂”项下勾选所用溶剂，并设置溶剂百分比和名称；“停止时间”项下设置采集时间；“后运行时间”是一次运行结束后，到第二次进样前的等候时间，做梯度洗脱时，一定要设置该数值，等待系统中的流动相真正变成下一

7、次进样的初始比例；在“时间表”处设置梯度洗脱程序，规定溶剂比例变化方式，要注意程序时间与“停止时间”和“后运行时间”之间的协调关系；其他选项一般采用默认设置。5.1.7.1.2.3设置柱温箱：右键点击TCC模块，选择“方法”。在弹出的界面下进行如下设置：在“温度”项下选择柱温箱左侧及右侧控温模块的控温模式，设置温度；“停止时间”项下点选“与泵一致/无限制”；其他选项一般采用默认设置。5.1.7.1.2.4设置DAD检测器：右键点击DAD模块，选择“方法”。在弹出的界面