高效液相色谱仪的综述

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1、题目:高效液相色谱仪的综述院部生命科学院学科门类生物仪器分析专址生物技术一班学号1111431017姓名王伟康指导教师陈金式2014年6月15目前,高效液相色谱(HPLC)法由于对复杂样品中的分析物具有极高的分离效率而成为最有效的分离方法。将具有高灵敏度的化学发光分析法和具有高分离效率的高效液相色谱分离法相结合已引起了国内外分析化学家的极大兴趣。本文简单概述了高效液相色谱化学发光的特点、发展史、检测原理、化学发光反应体系以及发展前景。关键词：高效液相色谱仪发展历史原理应用ABSTRACTAtpresent,highperformanceliquidchromatography(HPLC)an

2、dbecomethemosteffectivemethodforseparatingtheseparationefficiencyoftheanalysismethodofcomplexsampleswithhigh.Luminescenceanalysismethodandhighperformanceliquidwithhighseparationefficiencyofchemicalwithhighsensitivityofchromatographicseparationmethodhasarousedgreatinterestofchemistsathomeandabroad.T

3、hispaperbrieflyintroducesthecharacteristics,chemiluminescenceHPLCdetectionprinciple,developmenthistory,chemiluminescencereactionsystemandthedevelopmentprospects.Keywords:Highperformanceliquidchromatography；Developmenthistory；Principle；Application高效液相色谱(highperfonnanceliquidchromatography,HPLC)是一种具有

4、高效、快速及应用广泛的现代分离技术，它是在经典液相色谱法的基础上，引入了气相色谱法的理论和技术，以高压输送流动相，采用高效固定相及较高灵敏度检测器，发展而成的现代液相色谱分析方法己经成为有机物质分析的支柱技术，在牛物化学、临床医学、食品检验、石油化工及环境污染监测等领域得到广泛的应用，成为分析化学家和生物化学家用以解决他们面临各种实际分析和分离必不可缺的工具。与经典的液相色谱法相比，高效液相色谱法具有下列主要优点：①应用了颗粒极细、规则均匀的I古I定相，传质阻抗小，柱效高，分离效率高；②采用高压输液泵输送流动相，流速快，一般试样的分析需数分钟，复杂试样分析在数十分钟内即可完成；③广泛使用了高

5、灵敏检测器，大大提高了灵敏度。高效液相色谱仪是由储液器、泵、进样器、色谱柱、检测器、记录仪等几部分组成。从上个世纪70年代以来，人们经过努力已研究和开发了多种检测器，如紫外-可见光检测器(UV—Vls)、光电二极管阵列检测器(PDA)、荧光检测器(FLD)、示差折光检测器(RID)、电化学检测器(ECD)、蒸发激光散射检测器(ELSD)、光电导检测器(PCD)、磁旋光检测器(MDR)、放射性检测器(RD)、热离子化检测器(TID)、化学发光检测器(CLD)和质谱(Ms)检测器等等。随着色谱技术的发展，结合计算机各种软件的开发，使HPLC与各种检测仪器联用。在众多的HPLC检测器中，化学发光检

6、测器(CLD)结构简单，灵敏度高。在大多数情况下，它的灵敏度比紫外一可见光检测器高2-3个数量级，由于它没有光源，不存在散射光引起的背景，用于荧光物质检测时，灵敏度比荧光检测器更高，对某些物质的检测其至可与激光诱导荧光检测器媲美，灵敏度可达10-21mol的单分子水平。将高灵皱度的化学发光检测器与高分辨的高效液相色谱(HPLC)分离手段以适当的方式相祸合，集分离与分析之精华于一体，发展成为一种理想的分析方法。2历史发展1960年代，由于气相色谱对高沸点有机物分析的局限性，为了分离蛋白质、核酸等不易气化的大分子物质，气相色谱的理论和方法被重新引入经典液相色谱。1960年代末科克兰(Kirkla

7、nd)、哈伯、荷瓦斯(Horvath)、莆黑斯、里普斯克等人开发了世界上第一台高效液相色谱仪，开启了高效液相色谱的时代。高效液相色谱使用粒径更细的固定相填充色谱柱，提高色谱柱的塔板数，以高压驱动流动相，使得经典液相色谱需要数日乃至数月完成的分离工作得以在几个小时甚至几十分钟内完成。1971年科克兰等人出版了《液相色谱的现代实践》一书，标志着高效液相色谱法(HPLC)正式建立。在此后的时间里，高效液相色谱成为最