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1、茨蓉劲片缓解体力疲劳功能动物试验报告敬明武葛宇杰刘科亮郭明(四川省疾病预防控制中心四川成都610041)【中图分类号】R96【文献标识码】A【文章编号】1672-5085(2013)04-0057-02【摘要】目的探讨从蓉劲片缓解动物疲劳功能的效果。方法雄性小鼠160只,体重为18-22go实验设667mg/kg?BW>1333mg/kg?BW>2000mg/kg?BW三个剂量组和蒸谓水组(对照组)。实验分为一、二、三、四组,每组40只小鼠,以蒸倔水作溶剂配制受试物,按20ml/kg?BW分別经口灌胃小鼠,每天给予一次,连续给予30天,并对一、二、三、四
2、组小鼠分别进行血清尿素测定、血乳酸测定、肝糖原测定、负重游泳试验。结果从蓉劲片连续30天经口灌胃给予雄性小鼠后,可见其生长良好,中、高剂量组能明显延长小鼠负重游泳时间,血清尿素显著降低、肝糖原含量显著升高;三个剂量组血乳酸曲线下面积与对照组比较显著降低。结论从蓉劲片对动物具有缓解体力疲劳功能。【关键词】从蓉劲片缓解体力疲劳1材料和方法1.1样品由某公司提供的戏蓉劲片,为棕色片剂,人体每日推荐量为4000mg/60kg?BWo1.2实验动物由四川省中医药科学院实验动物中心提供的雄性昆明种小鼠160只,体重18-22g,生产许可证号为SCXK(川)2008-
3、19.SPF级,实验动物房为屏障系统,使用许可证号为SYXK(JII)2008-043,温度20-25°C,相对湿度40-70%o1.3剂量选择及配制实验设667mg/kg?BW>1333mg/kg?BW>2000mg/kg?BW三个剂量组(分别相当于人体推荐量的10、20、30倍),分别称取8.34g,16.66已25.00g受试物,各加蒸憾水定容至250ml混匀,冰柜保存,用完再配,另设蒸憾水对照组。实验分为一、二、三、四组,每组40只动物。1.4主要仪器和试剂上海天美科学仪器有限公司牛产的UV1100分光光度计、美国贝克曼库尔特有限公司生产的CX4
4、全自动生化分析仪、山东省科学院生物研究所生产的SBA-40C型生物传感分析仪、电子天平、振荡器、游泳箱、匀浆器、秒表、尿素试剂盒、蔥酮试剂、溶血剂、三氯乙酸、葡萄糖标准溶液、乳酸标准溶液。1.5实验方法1.5.1以蒸憎水作溶剂配制受试物,按20ml/kg?BW分别经口灌胃小鼠,每天给予一次,连续给予30天。1.5.2负重游泳试验将试验四组各剂量组的动物末次给予受试物30min后,将鼠尾根部负荷5%体重的细保险丝,再将小鼠放入水温25±1.0°C,水深30cm的游泳箱中游泳,记录小鼠从游泳开始至死亡的时间,计算小鼠的游泳时间。1.5.3血清尿
5、索测定将试验一组各剂量组的动物末次给予受试物30min后,将小鼠放入温度30°C的水中不负重游泳90min,休息60min之后,拔眼球采全血0.5ml,取血清按试剂盒说明书操作,用CX4全自动生化分析仪及美国贝克曼库尔特有限公司提供的试剂盒测定血清尿素含量。1.5.4肝糖原测定将试验三组各剂量组的动物末次给予受试物30min后,处死动物取肝脏经生理盐水漂洗后用滤纸吸干,称取约100mg肝脏,按《保健食品检验与评价技术规范》(2003年版)中的蔥酮法测定肝糖原的含量。1.5.5血乳酸测定将试验二组各剂量组的动物末次给予受试物30min后,不负重在温度30°
6、C的水中游泳lOmin后停止。乳酸测定方法:于游泳前、游泳后Omin及游泳后休息20min各采血20μl,分别加入50μl溶血齐IJ振荡混匀后,再用SBA-40C型生物传感分析仪测定。测定结果乘以稀释倍数3.5即为血乳酸含量。1.6实验数据统计实验数据统计采用SPSS11.0forwindows软件包处理。数据经方差齐性检验,方差齐,进行方差分析,如P值小于0.05,则用Dunnett法进行两两比较;若方差不齐,则进行数据转换,仍不齐,改用秩和检验,如P值小于0.05,则用Dunnett’sT3法进行两两比较。2结果2.1忒蓉劲片
7、对小鼠体重的影响各剂量组及对照组动物的初始体重经统计学处理,方差齐(P>0.05),且方差分析结果(P>0・05),表明各组动物的初始体重是均衡的。三个剂量组动物的中期体重和结束吋体重与对照组比较,经统计学处理,均无显著性差异(P>;0.05)o2.2欢蓉劲片对小鼠负重游泳时间的影响三个剂量组的负重游泳时间与对照组比较,经统计学处理,除低剂量组无显著性差异外(P>;0.05),中、高剂量组的负重游泳时间延长均有显著性差异(P&t;0.05)o2.3欢蓉劲片对小鼠运动后血清尿素的影响由表1可见,三个剂量组小鼠运动后的血清尿素与对照组比较
8、,经统计学处理,除低剂量组无显著性差异外(P>0.05),中、高剂量组的血