[精品]综述——孙龙燕

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1、总体问题不是很大，主要是一些格式上的问题，按照学校新出的撰写要求，对综述的格式进行修改。摘要部分已经改好了，这样就可以了，文中的文字性的问题自己仔细查找，例如，文中的英文缩写、外文参考文献作者及数字，都要用TimesNewRoman格式。修改完以后发给我看看。RAPD分子标记技术在蔬菜育种上的应用学生姓名：孙龙艳摘要本文对RAPD标记技术的原理、特点进行了介绍，同时对RAPD标记在核心种质资源的保存、蔬菜种质资源亲缘关系、研究蔬菜的遗传多样性、分子标记辅助育种、遗传图谱的构建、品种纯度鉴定等研究领域的应用进行了综述。关键词RAPD蔬菜遗传育

2、种应用1RAPD技术的原理RAPD(RandomAmplifiedPolymorphicDNA,随机扩增的多态性DNA)是和两个研究小组同时(1990)创建的一种运用随机引物扩增基因组寻找多态性片段作为分子标记的新技术。RAPD技术是用短的(通常9-10bp)随机序列DNA作为引物对基因组DNA进行PCR扩增而产生的多态性D7A片段。RAPD技术能够使基因组特定DNA扩增的原理是：用随机引物与某一基因组的总D7A混合、变性、退火后，在较低的温度条件下，引物与基因组中两个反向重复序列互补形成双链，若两个反向重复序列长短在TaqDNA聚合酶的延

3、仲能力之内(200-2000bp),则双链在DNA聚合酶的作用下延伸进行有效地扩增,扩增产物经电泳分离和EB染色来检测扩增产物DNA片断的多态性。RAPD能够进行多态性检测的原理是：RAPD所用的一系列引物的DNA序列各不相同,但对于任一特定的引物，它同基因组D7A序列有其特定的结合位点。如果基因组在这些区域DNA发生片段的插入、缺失或碱基突变就可以导致这些特定结合位点分布发生相应的变化，而PCR产物增加、减少或发生分子量的改变。通过对PCR产物的检测即可检测出基因组DNA在这些区域的多态性。由于进行RAPD分析是可用引物数目很多，虽然对每

4、一个引物而言检测DNA多态性的区域是有限的，但是利用一系列引物就可以使检测区域几乎覆盖整个基因组。因此，RAPD从理论上将可以对整个基因组进行多态性检测。2RAPD技术的应用RAPD技术具有简单方便、费用低等优点，一经问世，就被许多实验室广泛应用。现已在核心种质资源的保存、蔬菜种质资源亲缘关系、蔬菜的遗传多样性、分子标记辅助育种、遗传图谱的构建、品种纯度鉴定等方面取得丰硕成果。2.1核心种质资源的保存种质资源的收集和保存是遗传育种工作的基础。但遗传资源的长期保存需要消耗巨大的人力物力。为了尽可能降低消耗，人们提出了利用“核心种质”来长期保存

5、种质资源，这样在保存了尽可能多的遗传变异的基础上，又可减少保存的样品数目，大大降低所需费用。RAPD技术反映了遗传物质D7A的变界，因此它为筛选“核心种质”提供了一个有利工具。Phippcn［8］利用该技术分析了14份不同地区来源的甘蓝品种GoldenAcre,发现可以将它们分为四类，如果选择每一类作为一个样品来保存，只会损失绝对变异的4.6%,而保存费用却将减少70%。2.2蔬菜种质资源亲缘关系研究种质资源遗传亲缘关系研究是蔬菜育种工作的重要组成部分，它可以为亲本选配提供依据，并有效地预测杂种优势。同时一些原始品种或野牛品种以及一些异源品

6、种中存在的某些优良性状对蔬菜品种的改良有着巨大的潜力，因此确定不同品种间的亲缘关系及其在进化上的地位，并有选择的利用它们来改良蔬菜作物具有重要意义。而RAPD技术从DNA分子水平反映了基因组的多态性，因而更能准确揭示个体间的差异和物种的相关性。一般可以根据各品种指纹图谱的差异程度，判断品种间亲缘关系的远近，通过测量品种之间的遗传距离，进行系谱分析和分类研究。多数学者认为，RAPD方法在种质资源研究中具有潜在价值。然而，也有人认为RAPD方法在种间乃至近缘种之间亲缘关系的研究有一定的局限性。Thorman等［10］在十字花科植物的研究屮也发现

7、RFLP和RAPD标记在种内水平的结果完全吻合，但在种以上等级的研究结果相差甚远。目前RAPD技术在蔬菜作物的属、种、变种和品种等四个不同水平的遗传亲缘关系研究中均有广泛应用。人们先后对芸薑属及其相近类群、不同地域来源的番茄、葱、不同的tt蓝基因型变种、大白菜和紫菜苔两个近缘种以及芹菜、芥菜、黄瓜等不同品种［1,3,6］Z间的遗传亲缘关系进行了深入研究，研究结论大多与经典的分类结果一致。2.3蔬菜遗传多样性的研究基因型不同的品种，基因组内核昔酸序列存在差异。当使用同一随机引物对不同基因组体外扩增时，基因组上与引物互补的DNA片段（模板）的数

8、目、位点是不同的,因而其扩增产物（D7A片段）的大小、数目也不同，亦即扩增产物表现出多态性。当使用一系列不同的随机引物扩增时，这种多态性更加丰富。Quiros［13］等（1991