免疫学实验(吉林大学)利用多克隆抗体检测纺锤体蛋白基因inmap在肝癌细胞中的表达

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1、项目名称利用多克隆抗体检测纺锤体蛋白基因INMAP在肝癌细胞中的表达经费1500(元)起止时间2016年6月至2016年12月tt贞人学号姓名年级专业联系电话E-mail341304102013级制药工程一、立项背景和依据(包括研究目的、国内外研究现状分析、研究意义,应附主要参考文献)(一)研究目的INMAP(interphasenucleusandmitoticapparatusprotein)是一种保守的纺锤体相关蛋白W为了制备高特异性的INMAP多克隆抗体和研究INMAP在肝癌细胞中的表达差异,本研究通过原核诱导表达重组蛋白、尿素处理包涵体,用傑亲和柱分离纯化的融

2、合蛋白免疫小鼠,获得特异性较高的1NMAP多克隆抗体,拟为制备INMAP多克隆抗体提供一种经济、便捷的方法,同时也为细胞恶性增殖机理和抑癌途径的探究奠定基础。⑴引(二)国内外研究现状分析多克隆抗体以其能与靶分子特异结合的优良特性,已在疾病的基础研究、诊断和治疗领域取得了广泛的应用,并发挥着重要的作用。⑸多克隆抗体研究经历了多克隆抗体■单克隆抗体■基因工程抗体的漫长历程之后,目前已经已经进入了人源化抗体、全人抗体、小型化工程抗体、多功能抗体并存的新时代。⑹li前抗体在肿瘤、自身免疫疾病、感染性疾病、心血管疾病的诊断和治疗均取得了广泛的应用,成为这些疾病的辅助诊断、鉴别诊断

3、、早期诊断以及分型、判断预后、监测治疗最重要的工具之一,也是这些疾病个体化靶向治疗药物的主力军之一。随着基因组学和蛋白组学的快速进展,新的标志物和靶分子大量涌现,抗体研制和应用也向着抗原更加多样化、抗体或其偶联物的功能多样化、高通暈的快速实时检测和联合应用等方向发展。⑺(三)研究意义功能研究表明INMAP在纺锤体形成、着丝粒蛋白(CENP・B)保持完整性等方面发挥重要作用,跟染色体精确分离息息相关,影响肿瘤细胞的生长命运和增殖属性。&9I获得特异性较高的INMAP多克隆抗体,拟为制备INMAP多克隆抗体提供一种经济、便捷的方法,同时也为细胞恶性增殖机理和抑癌途径的探究奠

4、定基础。(四)主要参考文献[1JZhouYL,ChenZ,LeiY,etal.INMAP,anoveltruncatedversionofPOLR3B,repressesAP-1andp53transcriptionalactivity[J].MolecularandCellularBiochemistiy,2013,374(1/2):81-89.[2JShenEZ,LeiY,LiuQ,etal.IdentificationandcharacterizationofINMAP,anovelinterphasenucleusandmitoticapparatusprote

5、inthatisinvolvedinspindleformationandcellcycleprogression[J]・ExperimentalCellResearch,2009,315(7):1100-1116.[3]TanT,ChenZ,LeiY,etal.AregulatoryeffectofINMAPoncentromereproteins:AntisenseINMAPinducesCENP-Bvariationandcentromerichalo[J].PloSOne,2014,9(3):e91937.[4JWeiY,ShenE乙ZhaoN,etal.Ide

6、ntificationofanovelcentrosomalproteinCrpF46involvedincellcycleprogressionandmitosis[JJ.ExperimentalCellResearch,2008,314(8):1693-1707.[51UhlenM,ForsbergG,MoksT,etal.Fusionproteinsinbiotechnology[J].CurrentOpinioninBiotechnology,1992,3(4):363-369.[6jWangR,ShenWB,LiuLL,etal.Prokaryoticexpr

7、ession,purificationandcharacterizationofanovelriceseedlipoxygenasegeneOsLOXl[J],RiceScience,2008,15(2):88-94.[7]安丽君,李天红.桃成花基因PpLFY的克隆与表达及多克隆抗体制备[J].园艺学报,200&35(11):1573・1580・AnLijun,LiTianhong.Cloning,expressionandproductionofpolyclonalantibodiesofpeachPpLFYfJ].ActaHortic

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