《生理科学实验作业范本》实验12离体蟾蜍心脏的实验研究

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1、专业：临床医学姓名：沖尢丿•象实验报告H期：2013.11.20地点：C404/512课程名称：牛理科学实验实验类型：动物实验实验项目名称：实验12离体蟾赊心脏的实验研究同组学生姓名：指导老师：陆源实验12离体蟾赊心脏的实验研究【目的】本实验的目的是学习Straub氏法灌流蟾赊离体心脏方法，并观察高钾、高钙、低钙、肾上腺素、乙酰胆碱等因素对心脏活动的影响。【原理】作为蛙心起搏点的静脉窦能按一定节律白动产生兴奋，因此，只要将离体的蛙心保持在适宜的环境屮，在一定时间内仍能产生节律性兴奋和收缩活动。心脏正常的节律性活动需要一个适宜的理

2、化坏境，离体心脏也是如此，离体心脏脱离了机体的神经支配和全身体液因素的直接影响，可以通过改变灌流液的某些成分，观察其对心脏活动的作用。心肌细胞的自律性、兴奋性、传导性和收缩性,都与钠、钾及钙等离子有关。血钾浓度过高吋（高于7.9mmol/L）,心肌兴奋性、自律性、传导性、收缩性都下降，表现为收缩力减弱、心动过缓和传导阻滞,严重时心脏可停搏于舒张期。血钙浓度升高时，心肌收缩力增强，过高可使心室停搏于收缩期。血钙浓度降低，心肌收缩力减弱。血中钠离子浓度的轻微变化，对心肌影响不明显，只有发生明显变化时，才会影响心肌的生理特性。肾上腺素

3、可使心率加快、传导加快和心肌收缩力增强，乙酰胆碱则与肾上腺素的作用相反。【预习要求】1.仪器设备知识参见第二章第三节RM6240微机生物信号采集处理系统P（或第四节PcLab和MedLab微机生物信号采集处理系统）。2.实验理论实验动物知识参见第二章第一节生理科学实验常用实验动物的种类和第四章第一节动物实验的基本操作；统计学知识参见第五章第四节常用统计指标和方法；实验理论知识参见生理学教材屮有关心脏的生物电及心肌的生理特性、自主神经系统对心血管活动的调节内容。检索全文数据库屮的相关研究论文，检索方法参见第五章第五节。1.预绘制实

4、验原始数据记录表格和统计表格。2.预测结果预测无钙灌流液、高钙灌流液、高钾灌流液、肾上腺素、乙酰胆碱对离体蠟赊心脏活动的影响。1实验材料1.1实验动物蟾蛛（中华蟾蛛指名亚种，ZhuoshanToad）1.2药品与试剂肾上腺素（adrenalinehydrochloride）、乙酰胆碱（acetylcholinechloride）＞普蔡洛尔（propranololhydrochloride）＞阿托品（atropinesulfate）、氯化钾、氯化钙、任氏液（Ringer^solution）1.3实验仪器RM6240多道生理信号采集

5、处理系统（成都仪器厂）、JZJO1张力换能器（成都仪器厂）2实验方法2.1仪器连接和参数张力换能器接RM6240多道生理信号采集处理系统第1通道，RM6240多道生理信号采集处理系统采样频率：800Hz,时间常数：直流，滤波：30Hz,灵敏度：7.5go2.2离体蟾赊心脏标本制备（1）収贴赊一只，破坏脑和脊髓后，仰卧固定在蛙板上，从剑突下将胸部皮获向上剪开，然后剪掉胸骨，打开心包，暴露心脏，分离左、右主动脉。（2）在左主动脉下方穿1根线，靠头端结扎作插管时牵引用，在主动脉干下方穿1根线，在动脉圆锥上方系一松结用于结扎固定蛙心插管

6、。（3）左手持左主动脉上方的结扎线，用眼科剪在松结上方左主动脉根部剪一小斜口，右手将盛有少许任氏液的大小适宜的蛙心插管由此切口处插入动脉圆锥。当插管头到达动脉圆锥吋，用银子夹住动脉圆锥少许，将插管稍稍后退，并转向心室中央方向，银子向插管的平行方向提拉，心室收缩期时将插管插入心室（图8-22-2）o蛙心插管进入心室后管内的任氏液的液面会随心室的舒缩而上下波动。蛙心插管进入心室后，用预先准备好的松结扎紧，扎线套在蛙心插管的侧钩上打结并固定。剪断主动脉左右分支。（4）轻轻提起蛙心插管以抬高心脏，用一线在静脉窦与腔静脉交界处作一结扎，结

7、扎线应尽量下压，以免伤及静脉窦，在结扎线外侧剪断所有组织，将蛙心游离出来。（5）用新鲜任氏液反复换洗蛙心插管内含血的任氏液，直至蛙心插管内无血液残留为止。此时离体蛙心已制备成功，可供实验。(6)将蛙心插管固定在铁支架上，用蛙心夹在心室舒张期夹住心尖，并将蛙心夹的线头通过滑轮连至张力换能器的应变梁上，调节此线张力至lg,插管内加灌流约1〜1.5ml,并在插管上标记灌流的高度，在此后的实验过程中，灌流液恒定于该高度。2・3心脏与换能器连接将蛙心插管固是在夹具上，蛙心夹连线通过滑轮连至张力换能器。蛙心夹在心室舒张期夹住心尖，调节微调使

8、心脏舒张期至lgc2.4任氏液的量的影响向插管屮加入1ml任氏液，心搏曲线稳定后记录正常的心搏曲线45so加任氏液25ul,稳定45s后。2.5低钙的影响无钙任氏液lml替换插管内的任氏液，心搏曲线稳定lOmin后记录45s。2.62xl04mo)/L高钙灌流的