《生理科学实验作业范本》实验药物对离体豚鼠回肠的作用

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1、实验15药物对离体豚鼠回肠的作用【目的】了解胆碱能神经递质乙酰胆碱(acetylcholine,ACh)和局部炎症介质组胺(histamine)对肠道平滑肌1胆碱受体和Hl受体的激动作用,以及它们的受体拮抗剂阿托品(atropine)和扑尔敏(chlorpheniramine)的阻断作用。【原理】消化道平滑肌与骨骼肌、心肌一样,具有肌肉组织共有的特性,如兴奋性.传导性和收缩性等。但消化道平滑肌兴奋性较低,收缩缓慢,富有伸展性,具有紧张性、自动节律性,对化学、温度和机械牵张刺激较敏感等特点。给予离体肠肌以接近于在体情况的适宜环境,消化道平滑肌仍可

2、保持良好的牛理特性。胃肠道、膀胱等平滑肌以胆碱能神经占优势,小剂量或低浓度的ACh即能激动M胆碱受体,产牛与兴奋胆碱能神经节后纤维相似的作用,兴奋胃肠道平滑肌。Atropine与胆碱受体结合而本身不产生或较少产生拟胆碱作用,却能阻断胆碱能递质或拟胆碱药物与受体的结合,从而产生抗胆碱作用。Histamine对多种动物的胃肠道和气道平滑肌III受体有兴奋作用,豚鼠尤其敏感。Chlorpheniramine为111受体拮抗剂,能阻断histamine与Ill受体的结合,从而产牛抗histamine作用。【预习要求】1.预习相关理论生理学教材中平滑肌的生

3、理特性和药理学教材acetylcholine,histamine相关章节和木书的实验34。2.仪器使用参见第二章第三节RM6240微机生物信号釆集处理系统(或第四节PcLab和MedLab微机牛物信号采集处理系统)。3.实验理论实验动物知识参见第四章第一节动物实验的基本操作、第四节实验动物手术;统计学知识参见第5章第四节常用统计指标和方法;检索全文数据库中的相关研究论文,检索方法参见第五章第五节。4.预绘制实验原始数据记录表格和统计表格。5.预测实验结果。【材料】豚鼠;麦氏浴槽,超级恒温器,张力换能器,牛物信号采集处理系统;台氏溶液,10-2g/

4、Lacetylcholinechloride溶液,lg/Latropinesulfate溶液,10-2g/Lhistaminephosphate溶液、103g/Lchlorpheniramine溶液、lOg/LBaC12溶液。【方法】1.实验装置准备和仪器参数设置(1)离体肠管描记装置的准备见图7-15-1,麦氏浴槽中加固定量的台氏液,调节超级恒温器的温度,使麦氏浴槽内温度稳定在37±0.5°Co通气管接95%02+5%C02混合气体管道。用螺丝夹调节气体管道的气体流量,调节至浴槽中气泡一个个逸出为止。(2)张力换能器固定于铁支柱上,换能器输出线

5、接微机生物信号处理系统,仪器参数设置:RM6240系统:点击“实验”菜单,“自定义实验项目”菜单屮的“肠肌记录”。系统进入该实验信号记录状态。仪器参数:通道时间常数为直流,滤波频率10Hz,灵敏度3g,采样频率200Hz,扫描速度ls/divo3n<-•i8?<-?ch■

6、iai>as8O~Ier<-□吕5.Oi/4>v197c1.标本准备(1)取豚鼠一只,用木槌击其头部致昏死,立即剖开腹腔,找到回盲部,然后,在离回盲部lcm处剪断,取出回肠约10cm左右一段,置于氧饱和的台氏液培养皿中,沿肠壁除去肠系膜,然后将回肠剪成数小段(约广1.5cm),

7、用5ml注射器吸取台氏液将肠内容物冲洗干净,换以新鲜台氏液备用。注意操作时勿牵拉肠段以免影响收缩功能。(2)収一小段肠管置于盛冇台氏液的培养皿中,在其两端对角壁处,分别用缝针穿线,并打结。注意保持肠管通畅,勿使其封闭。肠管一端连线系于浴槽固定钩上,然后放入37°C麦氏浴槽中。再将肠管的另一端系结在张力换能器的悬臂梁上,调节肌张力至旷3g(图7-15-1)。【观察项目】1.待离体回肠稳定10、30分钟后,记录一段正常收缩曲线后,依次向麦氏浴槽中滴加下列药物。加入一种药液后,观察旷3分钟,并连续记录肠管收缩曲线,然后用台氏液连续冲洗二次,待基线恢复到

8、用药前的水平,随后记录一段基线。再加入第二种药液。浴槽液体的容量应相等。2.加入10-2g/LACh0.2ml,观察并记录其收缩曲线,2~3分钟后换液。1.重复以上Ach剂量,待收缩达最高点时,加入lg/Latropine0.2ml,观察并记录其收缩曲线。不换液,待曲线降至基线或基本稳定后,再加入相同浓度的ACh,观察并记录其收缩曲线。1.加入10-2g/Lhistamine0.3ml,待作用明显时(1~2分钟),迅速换液。使肠肌张力恢复止常。2.加入10-3g/Lchlorpheniramine溶液0.加15分钟后(不换液),加入同量hista

9、mine,观察并记录其收缩曲线。3.加入10g/LBaC12溶液lml,观察其反应,当作用达最高点,肠段持续于痉挛收缩状态时,加入lg/

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