《陈新-生理科学实验教学资料》实验22离子与药物对离体蟾蜍心脏活动的影响

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1、专业:临床医学一系0401姓名:寿春晖沖尢必象实验报告囂:盘血地点:生理科学实验室课程名称:生理科学实验指导老师:陆源实验名称:离子耳药物对离体蟾赊心脏活动的影响实验类型:操隹同组学生姓名:徐柏升离子与药物对离体蟾蛛心脏活动的影响寿春晖徐柏升(浙江大学医学院2004级临床医学043B班3041811025)[摘要]目的:学习Straub氏法灌流蟾赊离体心脏方法,观察低钙、高钙、高钾、肾上腺素、乙酰胆碱等因素对心脏活动的的影响。方法:制备蟾蛛离体心脏标本,分别灌流CaCL.KCK肾上腺素+普奈洛尔、乙酰胆碱和乙酰胆碱+阿托品,用张力换能器与

2、RM6240生物信号采集处理系统描记心搏曲线并记录心搏变化。结果:将插管内的任氏液全部更换为无钙任氏液后,心脏的舒张张力无明显改变,收缩期张力显著减小(P〈0.01),心率增加不明显;滴加11X10-MCaCl2溶液25M后,收缩期、舒张期张力增加,心率没有明显变化;在任氏液中滴加5X103MKC1溶液25M后,心脏的收缩期张力显著减小(P〈0.01),舒张期张力增加(P〈0.01),心率变化不大;在任氏液中滴加6X105M肾上腺素溶液10M后,心脏的收缩期张力增加,舒张期张力、心率基本不变;在任氏液中加5X105普奈洛尔溶液10M,心搏

3、曲线稳定后,再加入6X10~5M肾上腺素溶液10M,可见心脏的舒张期张力、收缩期张力以及心率基本不变;在任氏液中加6X10'6M乙酰胆碱溶液10M后,心脏的舒张期张力变化不明显,收缩期张力显著减小(P〈0.01),心率也有显著减小(P〈0.01);随后再加2X101M阿托品15M,舒张张力减小不大,收缩张力明显增大(P〈0.01),心率变化不明显。结论:心肌细胞外高C屮时心肌收缩性增强;高钾使心肌收缩性减弱;肾上腺索使心输出量增加,心肌收缩性增强,而普奈洛尔可不可逆转性的抑制肾上腺素的作用;乙酰胆碱可使心肌收缩性降低,阿托品可以阻断乙酰胆

4、碱的负性肌力作用。[关键词]钙离子钾离子肾上腺素普奈洛尔乙酰胆碱阿托品离体心脏灌流1•材料和方法1・1实验动物:蟾赊。1・2实验仪器:微机生物信号采集处理系统,张力换能器。1・3实验药品:任氏液,30g/LCaC12溶液,10g/LKCl溶液,0.1g/L肾上腺素溶液,10-2g/L乙酰胆碱溶液,10g/L普蔡洛尔溶液。1・4仪器连接和参数设置:使用RM6240系统,选择“蛙心灌流”项li,进入实验信号记录状态。仪器参数:通道时间常数为直流,滤波频率10Hz,灵敏度3g,采样频率400Hz,扫描速度5s/divo灶心恤忖红心如心央1.5离

5、体蛙心制备1.5.1暴霧蛙心:破坏蟾赊脑和脊髓后,剪开胸骨,打开心包,暴露心脏,分离左、右主动脉。靠头端结扎左主动脉,在主动脉干下方穿线系一松结备用。1.5.2蛙心插管:用眼科剪在松结上方左主动脉根部剪一小斜口,将盛有少许任氏液的蛙心插管由此插入动脉圆锥,在心室收缩期时将插管插入心室,吸去插管内血液,更换新鲜任氏液,用线固定。1.5.3蛙心离体:剪断主动脉左、右分支,抬高心脏,自静脉窦以下结扎其余血管,分离周围组织。1.6.4蛙心固定:将蛙心插管固定在铁支架上,用蛙心夹在心室舒张期夹住心尖,调节舒张张力至lgo2.观察项目2.1向插管中加

6、入lml任氏液,心搏曲线稳定后记录正常的心搏曲线45s。2.2无钙任氏液51替换插管内的任氏液,心搏曲线稳定后记录45so2.3用任氏液洗脱3次,加入无钙任氏液lml,待曲线稳定45s后,向灌流液屮加11X101MCaCl2溶液25M,心搏曲线稳定后记录45s。2.4用任氏液洗脱数次,曲线基本恢复后,加入Ind任氏液,待曲线稳定45s后,在任氏液中加5X10_3MKC1溶液25A1,心搏曲线稳定后记录45s。2.5用任氏液洗脱数次,曲线基本恢复后,加入1ml任氏液,待曲线稳定45s后,在任氏液中加6X10°M的adrenaline(Adr

7、)溶液10P1,心搏曲线稳定后记录45s。2.6用任氏液洗脱数次,曲线基本恢复后,加入1ml任氏液,待曲线稳定45s后,在任氏液中加5X10~1Mpropranolol(Pro)溶液10M,心搏曲线稳定后记录45s,再加入6X10*1的Adr溶液10M,心搏曲线稳定后记录45s。2.7将上述溶液吸出,用新鲜任氏液换洗数次,加入1ml任氏液,待曲线稳定后记录45s,在任氏液中加6X106M的acetylcholine(ACh)溶液15M,心搏曲线稳定后记录45s。再加2X104Matropine(Atr)15M,心搏曲线稳定后记录45s。2

8、・8数据测量:测量各项处理前后的心脏舒张末期张力(enddiastolictension,EDT)、心脏收缩末期张力(Endsystolictension,EST)、心率(heartrate,

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