实验二离子及药物对离体蛙心脏活动的影响

实验二离子及药物对离体蛙心脏活动的影响

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1、大学学生实验报告开课学院及实验室:生科院生化楼6032015年3月17曰学院生命科学学院年级、专业、班生技131姓名学号实验课程名称动物生理学实验成绩实验项H名称实验二离子及药物对离体蛙心脏活动的影响导师指老[实验目的]1.学习离体蛙心灌流的实验方法。2.观察Na、K、Ca三种离子及肾上腺素、乙酰胆碱等因素对心脏活动的影响。[实验原理]1.心脏的正常节律性活动需要一个适宜的内环境,P、j环境的变化直接影响着心脏的正常活动。本实验在蛙心的灌流液内人为地加入一些物质而改变心脏活动的内环境,观察心脏活动有何变化。2.心肌细胞的生理特征:

2、电生理特征:自律性,兴奋性,传导性机械生理特征:收缩性[实验对象]青蛙[实验器材和药品]1.器材生物信号采集系统、张力换能器(10g)、蛙类手术器械1套、蛙心插管、蛙心夹、试管夹、双凹夹、万能支架、滴管、150ml小烧杯4个、任氏液。2.药品0.65°%氯化钠、2%氯化钙、丨°%氯化钾、丨:10000肾上腺素、丨:10000乙酰胆碱等。[实验步骤]1离体蛙心的制备2.观察项目(1)记录心脏在仅有任氏液时的收缩曲线,观察心率及收缩幅度,作为正常对照。(2)吸去管内的任氏液,换以等量0.65%NacCl,观察并记录心跳的变化。(3)等

3、M:任氏液换洗,待心跳恢复正常后,加入5%NaCIl—2滴,记录观察心跳的变化。(4)等量任氏液换洗,待心跳恢复正常后,加入2%CaCl2l—2滴,记录观察心跳的变化。(5)等量任氏液换洗,待心跳恢复正常后,加入1°%KC11〜2滴,记录观察心跳的变化。(6)等量任氏液换洗,待心跳恢复正常后,加入h10000肾上腺素1〜2滴,记录并观察心跳的变化。(7)吸去管闪的任氐液,换以等盤4摄氐度任氐液,观察并记录心跳的变化。(8)等量任氏液换洗,待心跳恢复正常后,加入2.5%NaHCO3l—2滴,记录观察心跳的变化。(9)等量任氏液换洗,

4、待心跳恢复正常后,加3%乳酸1一2滴,记录观察心跳的变化。(10)等量任氏液换洗,待心跳恢复正常后,加入1:10000乙酰胆碱1〜2滴,发生变化后,加入阿托品,记录并观察心跳的变化。[实验结果分析]结果:在蛙心的灌流液内人为地加入一些物质而改变心脏活动的内环境,观察心脏活动,发现心脏跳动的频率、幅度就会发生相应的改变。当用0.65%NaCl置换时,蛙心的心率不变,振幅下降了78.6%,基线不变;用5%NaCr滴加时,心率上升了3.6%,振幅下降了28.6%,基线不变;用2%CaCI2滴加时,心率下降了3.2%,振幅上升了11.1%

5、,基线上升了;滴加1%KCI吋,心率上升了10.3%,振幅下降了22.2%,基线不变;用肾上腺素滴加时,心率下降2.8%,振幅上升22.7%,基线不变;置换4摄氏度任氏液时,心率下降6.7%,振幅也下降了4.5%,基线不变;用2.5%NaHCO3滴加时,心率上升10%,而振幅下降56.5%,基线上升;用3%乳酸滴加时,心率不变,而振幅上升了3.4%,基线不变;用Ach滴加时,心率不变,振幅下降了80%,基线不变;用Adr滴加时,心率不变,振幅上升了75%,基线不变。(结果见表1)表1.离子及药物对离体蛙心活动的影响表示下降,“+”

6、表示上升项验实目acN%5(6•O--aN%52aclC%2C1K%11素肾腺低温3OCHaN%52.3%乳酸chAc阿托品輔(%)心化6+3.23.■3•O+82-■76.■10+1不变不变不变振幅变化(%)68.7■68.2■11+122.2■2.7+25>4■56.5■4+3.80175+基线变化不变不变不变不变分析:1、正常心搏曲线有一定规律。2、置换0.65%NaCr溶液置换0.65%NaCl溶液后心肌的收缩力减弱,这是由于用0.65%NaCl溶液置换灌注液时灌注液中缺乏Ca2+K+等离子,以致心肌细胞动作电位2期内流C

7、a2+减少,胞质Ca2+浓度减少,心肌的收缩活动也随之减弱。3、滴加5%NaCI溶液当滴加入5%NaCl时,心率加强而振幅减弱。其原因是因为当钠离子浓度升高时,心脏的兴奋性和自律性升高,但兴奋的传导性和收缩性却下降。4、滴加2%CaC12溶液2滴Ca2+浓度増高时,Na+A流受抑制,细胞0期除极速度与幅度减小,使兴奋性及传导性均降低,所以心率略减弱。而Ca2+浓度增高使Ca2+内流增多,心肌收缩能力增强。5、滴加1%KC1溶液理论上,当钾离子浓度升高时,心肌收缩减弱,同时心率也略减慢。这是因为钾离子与钙离子相互竞争与肌钙蛋白结合,

8、使得钙P、j流减少。但实验未能得出以上结论,推测其因可能是因为做完钙离子对心脏活动影响后,用任氏液冲洗心脏不彻底,导致有钙离子残留,也可能是其他因素,影响实验结果。6、滴加0.01%Adr溶液滴加肾上腺素后,蛙心收缩增强,心脏舒张完全,描记的心搏曲

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