2017-2018学年高中生物专题2微生物的培养与应用课题1微生物的实验室培养练习新人

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1、课题1微生物的实验室培养1•培养基中含有水、无机盐、碳源、氮源和生长因子等营养物质。2.实验室常用的灭菌方法有灼烧灭菌、干热灭菌和压蒸汽灭菌等。用常的3.固体培养基的配制过程为：计算一称量一化一灭菌一倒平板。逆物体表面或内部一部分对人体有'死物体内外所有的微生物，包括知识点一［自读教材•夯基础］1.培养基（1）概念：人们按照微牛物対营养物质的不同需求,配制出的供其牛长繁殖的营养物质。液体培养基（加入琼脂等凝固剂）（2）种类｛”固体培养基:微生物在上面可形成菌落⑶营养成分：水、无机盐、輕、氮遞，此外还要满足微生物生长对凶、特殊营养物质及氧

2、气的要求。2.无菌技术（1）目的：获得纯净培养物。（2）关键：防止外来杂菌的入侵。⑶不同对象的无菌操作方法［连线］:I方法I①灼烧灭菌②干热灭⑤化学药剂⑥高压蒸汽灭菌类型2•消毒II•培养皿③巴氏消毒④紫外线DL操作者双手对象I.接种针（环）IV.水源地::思考探究1.下面是查氏培养基（培养霉菌所用）的主要成分，请根据下述培养基，回答下列问题:蔗糖15gNaNOs3gK2IIPO11gKC10.5gMgSO.i・7出00.5gFeSOi0.01g琼脂15〜20g水定容至1000mL(1)该培养基根据物理性质划分应是什么培养基？为什么？提

3、示：固体培养基。因为该培养基加入了凝固剂琼脂。(2)该培养基包含微牛物牛长和繁殖所需要的几类营养物质？分别是什么？提示：4类物质。分别是碳源、氮源、无机盐和水。(3)蔗糖提供的是哪类营养物质？NaNO：＜提供的是哪类营养物质？提示：蔗糖提供的是碳源。Na'Q提供的是氮源和无机盐。(4)在提供上述几种主耍营养物质的基础上，培养基述需要满足微生物所需要的哪些条件？提示：满足微生物生长对pH、特殊营养物质以及氧气的需要。2.探讨培养基、培养皿、接种环、实验者的双手、空气和牛奶所采用的灭菌或消毒方法。提示：分别为高压蒸汽灭菌、干热灭菌、灼烧灭菌

4、、化学消毒、紫外线灭菌、巴氏消毒法。3.消毒与灭菌的相同点与区别分别是什么？提示：消毒是杀灭病原微生物和有害微生物，并不要求杀灭一切活的微生物；而灭菌则是杀死物体内外所有微生物，包括芽葩和范子。［跟随名师・解疑难］1•培养基的成分营养物质定义作用主要来源碳源凡能提供所需碳元素的物质构成生物体的细胞物质和一些代谢产物，有些是异养生物的能源物质无机化合物：CO2、NaHCOy等；有机化合物：糖类、脂肪酸、花生粉饼、石油等氮源凡能提供所需氮元素的物质合成蛋白质、核酸以及含氮的代谢产物无机化合物：2、側、钱盐、硝酸盐等；有机化合物：尿素、牛肉膏

5、、蛋白腺等生长因了生长必不可少的微酶和核酸的组成成分维生素、氨基酸、碱基等量有机物水在生物体内含量很高不仅是优良的溶剂而且町维持生物大分子结构的稳定外界摄入无机盐为微生物提供除碳、氮以外的各种重要元素，包括大量元素细胞内的组成成分，生理调节物质，某些化能自养菌的能源，酶的激活剂无机化合物知识点二大肠杆菌的纯化培养2.实验室常用的消毒和灭菌方法项目概念常用方法应用范围消毒使用较为温和的物理或化学方法仅杀死物体表面或内部一部分微生物（不包括芽砲和范子）煮沸消毒法：在100°C煮沸5〜6min一般物品巴氏消毒法:在70〜75°C煮30min或

6、在80°C煮15min一些不耐高温的液体，如牛奶化学药剂消毒法如用酒精擦拭双手、用氯气消毒水源等紫外线消毒法：紫外灯照射30min接种室、操作台灭菌使用强烈的理化因素杀死物体内外所有的微生物（包括芽抱和泡子）灼烧灭菌：酒精灯火焰接种工具的灭菌和试管口的灭菌干热灭菌：在160〜170°C下灭菌1〜2h玻璃器皿、金属工具的灭菌高压蒸汽灭菌：在压力为100kPa,温度为121°C的条件下，灭菌15〜30min培养基及容器的灭菌［自读教材・夯慕础］1.制备固体培养基计算依据牛肉膏蛋口腺培养基ffl配方比例，计算各成分的用拭②称绘)-牛肉膏比较黏

7、稠，可用称量纸称取，牛肉膏和蛋白腺都易吸潮，称取的动作要迅速，称后及时盖上瓶盖③溶化一牛肉膏和称址纸+水一取出称赴纸一-加蛋口陈和氯化钠一A加琼脂(注意：不断用玻璃棒搅拌，防止琼脂糊底而导致烧杯破裂)一-补加蒸憎水至100mL灭菌培养基：高压蒸汽灭菌培养皿：辺干热灭菌国倒平板待培养基冷却至50°C左右时,在⑥洒精灯火焰附近倒平板1.纯化大肠杆菌(1)方法：①平板划线法:通过接种环在琼脂固体培养基表面连续划线的操作,将聚集的菌种逐步稀释分散到培养皐的表面。②稀释涂布平板法:将菌液进行一系列的梯度稀释,然后将不同稀释度的菌液分别涂布到琼脂固

8、体培养基的表面，进行培养。(2)鉴定：将接种后的培养基和一个未接种的培养基都放入37°C恒温箱中,培养12h和24h后，分别记录观察。(3)菌种保存：对于频繁使用的菌种，可以釆用临时保藏法;对于需要长期保存