2017-2018学年高中生物 专题2 微生物的培养与应用 课题1 微生物的实验室培养练习 新人教版选修1

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1、1.培养基中含有水、无机盐、碳源、氮源和生长因子等营养物质。2.实验室常用的灭菌方法有灼烧灭菌、干热灭菌和高压蒸汽灭菌等。3.固体培养基的配制过程为:计算―→称量―→溶化―→灭菌―→倒平板。4.平板划线法和稀释涂布平板法是微生物接种的常用方法。5.消毒的目的是杀死物体表面或内部一部分对人体有害的微生物;灭菌则是杀死物体内外所有的微生物,包括孢子和芽孢。课题1微生物的实验室培养培养基及无菌技术[自读教材·夯基础]1.培养基(1)概念:人们按照微生物对营养物质的不同需求,配制出的供其生长繁殖的营养物质。(3)营养成分:水、无机盐、碳源、氮

2、源,此外还要满足微生物生长对pH、特殊营养物质及氧气的要求。2.无菌技术(1)目的:获得纯净培养物。(2)关键:防止外来杂菌的入侵。(3)不同对象的无菌操作方法[连线]:  1.下面是查氏培养基(培养霉菌所用)的主要成分,请根据下述培养基,回答下列问题:蔗糖15gNaNO33gK2HPO41gKCl0.5gMgSO4·7H2O0.5gFeSO40.01g琼脂15~20g水定容至1000mL(1)该培养基根据物理性质划分应是什么培养基?为什么?提示:固体培养基。因为该培养基加入了凝固剂琼脂。(2)该培养基包含微生物生长和繁殖所需要的几类

3、营养物质?分别是什么?提示:4类物质。分别是碳源、氮源、无机盐和水。(3)蔗糖提供的是哪类营养物质?NaNO3提供的是哪类营养物质?提示:蔗糖提供的是碳源。NaNO3提供的是氮源和无机盐。(4)在提供上述几种主要营养物质的基础上,培养基还需要满足微生物所需要的哪些条件?提示:满足微生物生长对pH、特殊营养物质以及氧气的需要。2.探讨培养基、培养皿、接种环、实验者的双手、空气和牛奶所采用的灭菌或消毒方法。提示:分别为高压蒸汽灭菌、干热灭菌、灼烧灭菌、化学消毒、紫外线灭菌、巴氏消毒法。3.消毒与灭菌的相同点与区别分别是什么?提示:消毒是杀

4、灭病原微生物和有害微生物,并不要求杀灭一切活的微生物;而灭菌则是杀死物体内外所有微生物,包括芽孢和孢子。[跟随名师·解疑难]1.培养基的成分营养物质定义作用主要来源碳源凡能提供所需碳元素的物质构成生物体的细胞物质和一些代谢产物,有些是异养生物的能源物质无机化合物:CO2、NaHCO3等;有机化合物:糖类、脂肪酸、花生粉饼、石油等氮源凡能提供所需氮元素的物质合成蛋白质、核酸以及含氮的代谢产物无机化合物:N2、NH3、铵盐、硝酸盐等;有机化合物:尿素、牛肉膏、蛋白胨等生长因子酶和核酸的组成成分维生素、氨基酸、碱基等生长必不可少的微量有机物

5、水在生物体内含量很高不仅是优良的溶剂而且可维持生物大分子结构的稳定外界摄入无机盐为微生物提供除碳、氮以外的各种重要元素,包括大量元素细胞内的组成成分,生理调节物质,某些化能自养菌的能源,酶的激活剂无机化合物2.实验室常用的消毒和灭菌方法项目概念常用方法应用范围消毒使用较为温和的物理或化学方法仅杀死物体表面或内部一部分微生物(不包括芽孢和孢子)煮沸消毒法:在100℃煮沸5~6min一般物品巴氏消毒法:在70~75℃煮30min或在80℃煮15min一些不耐高温的液体,如牛奶化学药剂消毒法如用酒精擦拭双手、用氯气消毒水源等紫外线消毒法:紫

6、外灯照射30min接种室、操作台灭菌使用强烈的理化因素杀死物体内外所有的微生物(包括芽孢和孢子)灼烧灭菌:酒精灯火焰接种工具的灭菌和试管口的灭菌干热灭菌:在160~170℃下灭菌1~2h玻璃器皿、金属工具的灭菌高压蒸汽灭菌:在压力为100kPa,温度为121℃的条件下,灭菌15~30min培养基及容器的灭菌大肠杆菌的纯化培养[自读教材·夯基础]1.制备固体培养基2.纯化大肠杆菌(1)方法:①平板划线法:通过接种环在琼脂固体培养基表面连续划线的操作,将聚集的菌种逐步稀释分散到培养基的表面。②稀释涂布平板法:将菌液进行一系列的梯度稀释,然

7、后将不同稀释度的菌液分别涂布到琼脂固体培养基的表面,进行培养。(2)鉴定:将接种后的培养基和一个未接种的培养基都放入37_℃恒温箱中,培养12h和24h后,分别记录观察。(3)菌种保存:对于频繁使用的菌种,可以采用临时保藏法;对于需要长期保存的菌种,可以采用甘油管藏法。1.培养基灭菌后,需要冷却到50℃左右时,才能用来倒平板,你用什么办法来估计培养基的温度?提示:可以用手触摸,感觉上以刚不烫手为准。2.如果需要调节培养基的pH,应在哪一步骤后进行?提示:溶化后,灭菌前。3.在用平板划线法接种大肠杆菌时,第一次划线前、每次划线前及划线操

8、作结束后,都要灼烧接种环,请分析其目的分别是什么。提示:第一次灼烧每次划线前灼烧划线结束灼烧目的避免接种环上可能存在的微生物污染培养物杀死上次划线结束后接种环上残留的微生物,使每次划线的微生物来自上次划线末端杀死接种环上

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