GB12392-90 蔬菜、水果及其制品中总抗坏血酸的测定方法 - 下载地址.pdf

《GB12392-90 蔬菜、水果及其制品中总抗坏血酸的测定方法 - 下载地址.pdf》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在行业资料-天天文库。

1、中华人民共和国国家标准蔬菜、水果及其制品中总抗坏血酸的测定方法(荧光法和294-GB12392一go二硝基苯阱法)MethodfordeterminationoftotalascorbicHeadinfruits,vegetablesandderivedproducts-Fluorometricmethodandcolorimetricmethod1主题内容与适用范围本标准规定了用荧光法和2，4一二硝基苯麟比色法测定抗坏血酸。本标准适用于蔬菜、水果及其制品中总抗坏血酸的测定。第一篇荧光法本标准参照采用国际标准ISO

2、6557/1一1986《蔬菜、水果及其制品中抗坏血酸的测定方法》。2原理样品中还原型抗坏血酸经活性炭氧化为脱氢抗坏血酸后，与邻苯二胺(OPDA)反应生成有荧光的峰呢琳(quinoxaline)，其荧光强度与脱氢抗坏血酸的浓度在一定条件下成正比，以此测定食物中抗坏血酸和脱氢抗坏血酸的总量。脱氢抗坏血酸与硼酸可形成复合物而不与OPDA反应，以此排除样品中荧光杂质产生的干扰，最小检出限0.022u8/mLo3试剂本实验用水均为蒸馏水。3.1偏磷酸一乙酸液:和取159偏磷酸，加人40mL冰乙酸及250mL水，加温，搅拌，使

3、之逐渐溶解，冷却后加水至500mL。于40C冰箱可保存7一10d,3.20.15mol/L硫酸:取IOmL硫酸，小心加人水中，再加水稀释至1200mL。3.3偏磷酸一乙酸一硫酸液:以0.15mo1/L硫酸液为稀释液，其余同3.1配制。3.450%乙酸钠溶液:和橄500g乙酸钠(CH,000Na"3H,O)，加水至1000ml,。3.5硼酸一乙酸钠溶液:称取39硼酸，溶于100mL乙酸钠溶液(3-4)中。临用前配制。3.6邻苯二胺溶液:称取20mg邻苯二胺，于临用前用水稀释至100mL。3.T抗坏血酸标准溶液(1mg

4、/mL)(IIw用前配制):准确A橄50m3抗坏血酸，用溶液(3.1)溶于50mL容量瓶中，并稀释至刻度。3.8抗坏血酸标准使用液(l00PB/mL):取lOmL抗坏血酸标准液，用偏磷酸一乙酸溶液稀释至100mL。定容前试PH值，如其PH>2.2时，则应用溶液(3.3)稀释。3.90.04%百里酚蓝指示剂溶液:称取0.19百里酚蓝，加0.02mo1/L氢氧化钠溶液，在玻璃研钵中华人民共和国卫生部1990-03一19批准1990一12一01实施.www.bzxzk.com.GB12二2一.0中研磨至溶解，氢氧化钠的用

5、量约为10.75mL，磨溶后用水稀释至25o-L。变色范围:pH值等于1.2红色pH值等于2.8黄色pH值大于4蓝色5.10活性炭的活化:加2009炭粉于1L1十9盐酸中，加热回流1一2h，过滤，用水洗至滤液中无铁离子为止，置于110-1200C烘箱中干燥，备用。仪器和设备4.1实验室常用设备。4.2荧光分光光度计或具有350nm及430nm波长的荧光计。4.3捣碎机。操作方法5.1样品液的制备:和橄100e鲜样，加1008偏磷酸一乙酸溶液(3.1),倒人捣碎机内打成匀浆，用百里酚蓝指示剂调试匀浆酸碱度。如呈红色，

6、即可用偏磷酸一乙酸溶液稀释，若呈黄色或蓝色，则用偏磷酸一乙酸一硫酸溶液稀释，使其pH为1.2。匀浆的取量需根据样品中抗坏血酸的含量而定。当样品液含量在40^-10048/mL之间，一般取208匀浆，用偏磷酸一乙酸溶液稀释至100mL，过滤，滤液备用。5.2测定步骤5.2.1氧化处理:分别取样品滤液(5.1)及标准使用液(3.8)各l00mL于200-L带盖三角瓶中，加28活性炭，用力振摇1min,过滤，弃去最初数毫升滤液，分别收集其余全部滤液，即样品氧化液和标准氧化液，待测定。5.2.2各取lOmL标准氧化液于2个

7、l00mL容量瓶中，分别标明“标准”及“标准空白”。5.2.3各取lomL样品氧化液于2个l00mL容量瓶中，分别标明“样品”及“样品空白”。5.2.4于“标准空白”及“样品空白”溶液中各加5mL硼酸一乙酸钠溶液，混合摇动15min，用水稀释至100mL，在4℃冰箱中放置2~3h，取出备用。5.2.5于“样品”及“标准”溶液中各加人5-L50%乙酸钠液，用水稀释至l00mL，备用。5.3标准曲线的制备取上述“标准"溶液(5.2.5)(抗坏血酸含量lou8/-L)0.5.1.0.1.5和2.OmL标准系列，取双份分别

8、置于lomL带盖试管中，再用水补充至2.OmL,荧光反应按5.405.4荧光反应取(5.2.4)中“标准空白”溶液，“样品空白”溶液及(5.2.5)中“样品”溶液各2mL，分别置于lomL带盖试管中。在暗室迅速向各管中加人5mL邻苯二胺溶液，振摇混合，在室温下反应35min，于激发光波长338nm、发射光波长420nm处测定荧光强度。标准系列荧光强度分别减去