医学检验技能操作

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1、···红细胞计数······1、加稀释液取小试管1支，加红细胞稀释液2ml。2、加血用清洁干燥微量吸管或一次性微量吸管采集末梢血或抗凝血10ul，擦去管外余血，······轻轻加至红细胞稀释液底部，再轻吸上清液清洗吸管2-3次，立即混匀。······3、充池混匀后用微量吸管或玻璃棒将红细胞悬液充入计数池，室温下平放3-5分钟，待······细胞下沉后于显微镜下计数。······4、计数用高倍镜依次计数中央大方格内4角和正中5个中方格内的红细胞。······5、计算······12红细胞/L=N/200

2、×10/LN：表示5个中方格内数得的红细胞数。白细胞计数1、加稀释液用吸管吸取白细胞稀释液0.38ml于小试管中。2、吸取血液用微量吸管吸取新鲜全血或末梢血20ul，擦去管尖外部余血，将吸管插入小试管中白细胞稀释液的底部，轻轻放出血液，并吸取上层白细胞稀释液清洗吸管2-3次。3、混匀将试管中血液与稀释液混匀，待细胞悬液完全变为棕褐色。4、充池再次将小试管中的细胞悬液混匀。用滴棒蘸取细胞悬液1滴，充入改良Neubauer计数板的计数池中，室温静置2-3分钟，待白细胞完全下沉。5、计数在低倍镜下计数四角4个大方格内的白细胞

3、总数。6、计算白细胞=4个大方格内白细胞数（N）/20×109/L白细胞分类计数1、将血涂片用瑞氏染液染色，冲洗干净，自然干燥后待用。2、镜下观察低倍镜下观察白细胞的分布和染色情况。3、观察选择血涂片体尾交界处细胞分布均匀、着色良好的区域，按一定的方向顺序对所见到的每1个白细胞进行分类，并用白细胞分类计数器作好记录，共计数100个白细胞。计算求出各类细胞所占的百分比率。血涂片的制备和瑞氏染色1、采血：用微量吸管在距载玻片一端1cm处加1滴抗凝血。2、推片：左手平执载波片，右手持推片从后方或前方接近血滴，使血液沿推片边缘

4、展开成适当的宽度，立即将推片与载波片呈30度到45度角，轻压推片边缘将血液推制成厚薄适宜的血涂片，血涂片应呈舌、头、尾三部分。3、干燥：将推好的血涂片在空气中晃动，使其迅速干燥。4、标记：在载玻片的一端用记号笔编号。5、染色：血涂片自然干燥后，用蜡笔在两端画线，以防染色时染液外溢。随后将玻片平置······于染色架上，滴加染液3-5滴，使其盖满血涂片，大约1分钟后，滴加等量或稍多的II液，······用吸耳球轻轻混匀。······6、冲洗：1分钟后，用流水冲去染液，待干。······7、观察结果：将干燥后的血涂

5、片置显微镜下观察。用低倍镜观察血涂片体尾交界处的血细胞。ABO血型鉴定（一）正定型法······1、5%被检红细胞生理盐水悬液制备抗凝血离心或红细胞自然沉降后取下层红细胞2滴于小试管中，加入生理盐水2ml，用尖滴管将红细胞与生理盐水充分混匀，2500r/min离心3分钟后弃去上清液，重复洗涤三次后自管底吸取1滴血红细胞加入19滴生理盐水中，此即为5%的红细胞生理盐水悬液。2、标记试管取小试管2支，分别标记抗A、抗B。3、加标准抗血清分别加入抗A、抗B标准血清各1滴于相应标记的试管中。4、加入红细胞悬液分别加入被检者5%

6、红细胞生理盐水悬液1滴于各试管中，混匀，立即以1000r/min，离心1min。5、观察结果先观察上层液有无溶血现象，再斜持试管轻轻摇动或轻轻弹动，使管底的红细胞慢慢浮起，肉眼观察有无凝集、再用低倍镜观察凝集强弱程度，如轻微凝集或不见凝集，必须将反应物倒于玻片上，再以低倍镜观察。6、判断结果（1）凝集结果判断标准：红细胞呈均匀分布，无凝集颗粒，显微镜下红细胞分散存在，无凝集靠拢现象为阴性；红细胞出现凝集为阳性。（二）反定型法······1、分离血清2500r/min2、标记并加被检者血清，离心3min，分离血清。取小

7、试管3支，分别标记A、B、O字样，于各管加入被检者血清······1滴。3、加标准红细胞按标记分别加入5%的A、B、O型标准红细胞生理盐水悬液1滴，混匀，立即以1000r/min，离心1min。4、观察结果先观察上层液有无溶血现象，再斜持试管轻轻摇动或轻轻弹动，肉眼观察有······无凝集，再用低倍镜观察。5、判断结果6、凝集结果判断标准：同正定型法。网织红细胞计数······1、加染液取煌焦油蓝生理盐水溶液2滴，再加入新鲜全血2滴，立即混匀，置室温下······15-20分钟。······2、制备涂片取1

8、小滴制成薄血涂片，自然干燥。3、观察在低倍镜下选择红细胞分布均匀的部位进行观察。4、计数在油镜下计数至少1000个红细胞中的网织红细胞数。5、计算网织红细胞分数数=计数的网红细胞数/1000······尿蛋白定性检查（加热乙酸法）1、加尿液取大试管1支，各加清晰尿液5ml。2、加热倾斜试管下端，在酒精灯上加热尿液上1/3段，煮沸即