GBT18644-2002猪囊尾蜘病诊断技术

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1、免费标准网(www.freebz.net)标准最全面GB/'r18644--2002前台猪囊尾拗病(cysticercosiscellulosae)(俗称猪囊虫病)，是由寄生在人体小肠内的猪带绦虫(taeniasolium)的幼虫(cysticercuscellulosae)所引起的，是一种危害严重的人兽互源性寄生虫病世界动物卫生组织[WorldOrganizationforAnimalHealth(英),OfficeIntentionaldesEpizootic(法),OIE1将该病列为B类疾病目前，该

2、病还广泛存在于发展中国家，不仅严重地影响着养猪业的发展，造成巨大的经济损失，而且还威胁着人类身体健康，乃至生命。因此，1993年联合国卫生组织将该病列为需要根除的六大疾病之一猪囊尾坳病多不表现临床症状。目前，该病的检疫方法有舌检查法和免疫学检查法。前者仅适用于舌上寄生(27%030写)的病猪。后者包括皮内变态反应、炭粒凝集试验、间接红细胞凝集试验、补体结合反应、琼脂扩散试验、免疫电泳和酶联免疫吸附试验(ELISA)等等。其中，ELISA法具有高敏感性和特异性，是最常用的一种方法。本标准从病原分离、鉴定和血

3、清学(ELISA方法)两方面规定了猪囊尾坳病检查方法，结果更为h(靠本标准规定的ELISA法，适用于感染猪的定性，最早可以检出感染9天的囊尾勤病猪。也适用于免疫猪群抗体水平的评估。本标准的附录A为标准的附录。本标准由中华人民共和国农业部提出。本标准由全国动物检疫标准化技术委员会归口。本标准起草单位:吉林农业大学。本标准主要起草人:韩宇、姜秀云、赵权。免费标准网(www.freebz.net)无需注册即可下载免费标准网(www.freebz.net)标准最全面中华人民共和国国家标准GB/7门86442002

4、猪囊尾蜘病诊断技术Diagnostictechniquesforcysticercosiscellulosae1范围本标准规定r猪囊尾坳病的病原分离与鉴定和酶联免疫吸附试验(ELISA)两种诊断技术本标准适用于猪囊尾坳病的诊断和流行病学调查以及检疫。2病原分离与鉴定2.1病原分离2.1.1样品采集采集猪的咬肌、舌肌、内腰肌、隔肌、肋间肌、肩脚肌等，亦可采集脑、心脏、肝脏、肺脏等2门.2样品分离成熟的猪囊尾坳为长椭圆形仁(6mm-10mm)X5mm]，半透明的囊壁内充满液体，上有一个黍粒大小的白色小结节即为

5、头节(scolex)和颈节(neck)脑内寄生的则为圆球形郁mm-10mm将上述任何部位的囊尾蝴，以手术刀和镊子剥离后，以生理盐水洗净，并用滤纸吸干2.2病原鉴定2.2门分离样品的压片制备以剪刀剪开囊壁，取出完整的头节，再以滤纸吸干囊液后，将其置于两张载玻片之间并压片，于两张载玻片问加人1-2滴生理盐水后置于显微镜下镜检2.2.2镜检以低倍(物镜8倍、目镜5倍)观察囊尾蝴头节的完整性。2.2-3结果判定低倍镜检，可见到头节的顶部有顶突，顶突上有内外两圈排列整齐的小钩，顶突的稍下方有四个均等的圆盘状吸盘，即

6、判为猪囊尾蝴3酶联免疫吸附试验(ELISA)11材料准备3.1.1器材ELISA反应板、酶联免疫检测仪、加样器、洗瓶、10cmxlcm普通滤纸条等3门.2试剂猪囊尾黝层析抗原、葡萄球菌A蛋白(SPA)辣根过氧化物酶(HRP)标记物(HRP-SPA),猪囊尾蝴标准阴性和阳性全血滤纸片等3门-3被检猪全血血片将10cmx1cm普通滤纸条的一端标记被检猪号码，另一端吸取被检猪任何部位血液1-2滴。于室内阴干后，置于4C冰箱内(可保存6个月)。3·1.4溶液配制_中华人民共和国国家质且监督检验检疫总局2002-0

7、2-19批准2002-05-D1实施标准分享网www.bzfxw.com免费下载免费标准网(www.freebz.net)无需注册即可下载免费标准网(www.freebz.net)标准最全面GB/T18644一2002溶液配制的方法见附录A(标准的附录)3.2操作方法I2门抗原包被3.2.1.1Ii先以抗原包被液(见附录A中Al洗涤ELISA反应板各孔三次3.2门.2以抗原包被液将抗原按使用说明书稀释至工作浓度。3.2.1.3月1加样器加I_作浓度抗原至ELISA反应板各孔内，每孔。1m工，加盖后置于室温

8、(11〔一29〔)过夜。注:包被过夜的ELISA反应板加盖后置于冰箱冷冻室内(可保存G个月)。或将包被过夜的ELISA反应板按3.2.2方法洗涤后.晾干，装人塑料袋内密封置于4(冰箱内(可保存1个月)12.2洗涤川力甩净包被过夜的ELISA反应板孔内的抗原包被液，每孔加人洗涤液(见附录A中A2),浸泡3min后，用力甩去洗涤液，并用滤纸吸去残留的洗涤液和驱除孔内气泡，重新加人洗涤液，按同样方法共洗涤3次，即3X3min冲洗。1