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时间:2019-08-30
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1、基因工程知识点图解1、[反转录酶杂交双链(单链RNA/单链DNA)MtiSDNA
2、DNA聚合酶双链DNA(目的基因)DNA连接酶与DNA聚合酶的比较DNA连接酶DNA聚合醃相同点催化两个脱氧核昔酸之间形成磷酸二酯键不同点模板不需耍模板以DNA的一条琏为模板作用对象游离的DNA片段单个的脱氧核昔酸形成完整的DNA分子形成DNA的一条链用途基因工程DNA复制2、人工合成FI的基因反转录法:根据已知的氨基酸序列合成DNA法:目的基因的mRNA蛋白质的氨基酸序列!推测mRNA的核昔酸序列I推测基因的脱氧核昔酸序列
3、化学合成基因组文库的构建模
4、式基因厨DNA限•性内切・CDN蚊库脚輾式图—=:DNA片段携到敘体上进入细㈱寄主细胞DNA受体菌的整个群体包含了这种生物的全部基因——某种生物的刪反转录酶——械双链(单链RNA/戦DNA)某种酶单链DNADNA聚合酶双链DNA(cDNA)与鮒连接后导入受体菌It荊组成cDNA文库目的基因4、真核细胞的基因结构编码冈外显子内含子非编解列原核、真核基因表达比较-编码[X非编码区r2菲编码区转录mRNA
5、翻译初始mRNA多肽链COCCCCOO[剪接成熟mRNA出核孔翻译转录多肽链000000005、利用PCR技术扩增目的基因inwnnn
6、TnTrVi〕11mhniHrniirn—irnnnniTiiiiirnnirmiliiiinnnniiironiiOtii1.变性(90£-95£)双链DNA模板在热作用下,氢键断裂,形成单链DNA2.复性(55°C-65°C)温度降低,引物与DNA模板结合,形成局部双链。3.延伸(70°C-75°C)在Taq酶的作用下,$fWnnnHW-nnWrnnjrniinnnTnwTnnrnn叫町UJUidii血阵蒔葡亥昔酸,合・、、八「「「;、厂/成与模板互补的DNAySiSifiSlSuuAiuiiwyjWi^imj^严°PCR技术
7、与DNA复制的比较用相同的限制核酸内切酶分别切割目的基因和载体DNA(如质粒),目的基因和载体DNA的两端形成相同的黏性末端,在DNA连接酶的作用下,将目的基因和载体DNA连接在一起,形成重组DNA分1!质粒DNA分子同一种限制酶处理—个切口(位点)两个切口(位点)两个黏性末端获得目的基因DNA复制PCR技术不解旋方式解旋酶催化高温变性解旋场所细胞内主要在细胞核内细胞外主要在PCR扩增仪内同酶解旋酶.普通的DNA聚合酶等耐热的DNA聚合酶(Taq酶)点温度条件细胞内温和条件需控制温度,在较高温度下进行引物不需要需宴(一对)联系模板*
8、原料均相同子。DNA连接酶、f重组DNA分子(重组质粒)8、总结基因工程相关原理1)目的基因与受体细胞DNA分子相互整合的原理:两者的组成成分及结构基本相同2)目的基因在受体细胞内表达合成蛋白质的原理:目的基因通过转录和翻译表达遗传信息3)目的基因在受体细胞内能表达与供体生物相同产物的原理:生物共用一套遗传密码4)基因工程育种的原理:基因重组9、用转基因的动物生产药物方法:乳腺生物反应器★为什么乳腺能成为基因药物最理想的表达场所呢?⑴乳腺是一个外分泌器官,乳汁不进入体内循环,不会影响转基因动物本身的生理代谢反应。⑵从乳汁中获取目的基
9、因产物,产量高,易提纯,表达的蛋白质己经过充分的修饰加工,具有稳定的生物活性。⑶从乳汁中源源不断获得目的基因的产物的同时,转基因动物又可无限繁殖。
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