鱿鱼墨多肽对SKBR3细胞的增值抑制究【开题报告+文献综述+毕业论文】

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1、本科毕业论文开题报告药学鱿鱼墨多肽对SKBR3细胞的增值抑制研究一、综述本课题国内外研究动态，说明选题的依据和意义癌症已经成为影响人类生命健康与致死的重要因素,经典的化疗药物虽然可以在一定程度上抑制肿瘤生长，但同时也损害了患者的正常细胞与器官，给病人带来极大的痛苦。随着海洋药物和肿瘤细胞分子生物学研究的快速进展，恶性肿瘤的细胞内信号转导、细胞凋亡的诱导、细胞的转移、血管生成以及细胞与胞外基质的相互作用等各种基本过程正逐渐被阐明。以一些与肿瘤细胞分化增殖相关的细胞信号转导通路的关键酶(蛋白酪氨酸激酶、芳香化酶、拓朴异构酶I等)作为药物筛选靶点已经被大量研究,并由此发现了选择性地作用于特定靶位

2、的高效、低毒、特异性强的新型抗肿瘤药,即分子靶向药(Moleculartargeteddrugs，MTD)和抗体靶向药(Antibodytargeteddrugs，ATD)，该类型药物已成为当今世界各国抗肿瘤药物研发的重要方向。乳腺癌是女性最常见的恶性肿瘤之一，其发病率在我国女性恶性肿瘤中居第二位，且呈明显上升的趋势，尤其在一些沿海发达地区，如上海市，其发病率在2000年已跃居女性恶性肿瘤发病率之首。所以能找到一种特定靶位的高效、低毒、特异性强的新型抗肿瘤药尤为重要。生物活性肽（biologicallyactivepeptides）是指那些具有特殊生理活性的肽类，是世界上药物及保健品研究的

3、热点，目前通过提取生产的活性肽主要来源于陆地的蛋白源，如牛乳酯蛋白、大豆蛋白、玉米醇溶蛋白等。海洋生物为了适应高盐、高压、低温、缺氧等极端的海洋生境，其蛋白质的氨基酸组成或序列都与陆地生物蛋白有很大的不同，在种类和数量上也远远超过陆地蛋白资源。近年来对海洋生物活性肽21,特别是抗肿瘤活性肽的研究取得了很大进展。人们现如今所提取的抗肿瘤蛋白主要有从海鞘、海绵、软体动物、珊瑚中提取的环行多肽，从贝类、海参、乌贼墨等中提取的糖蛋白，还有从海藻、鲎、鲨鱼软骨中提取的多肽。但是由于海洋资源的开发利用较晚，海洋活性肽尚未形成规模产业，因此，借鉴陆地活性肽开发的酶工程技术，以海洋生物蛋白资源为原料，通过

4、对酶解、制备等工艺的综合研究，即可研制出陆地蛋白源和化学合成所无法生产的系列天然、高效、新颖的生物活性肽。鱿鱼盛产于我国渤海、黄海等海域，现代研究表明，鱿鱼蛋白质含量较高，并含有丰富的维生素、微量元素及较高含量的不饱和脂肪酸，被作为防治动脉粥样硬化及预防高血压的保健食品。已有研究表明,鱿鱼蛋白提取物有抗肿瘤、抗衰老、抗病毒和抗菌等功能，具有增加机体免疫能力、降低血脂含量的功效。浙江海洋学院地处海岛，附近海域鱿鱼十分丰富，仅嵊泗县鱿鱼年产量就达5吨左右，样品采集方便，价格较低。长期以来，对于鱿鱼的开发利用以鲜品为主，部分被加工成为干品及罐装品，所有这些产品都未能使鱿鱼的药用价值得到利用。近年

5、来，研究人员开始从鱿鱼中提取多糖、蛋白质、多肽等活性物质，试图开发利用其在疾病治疗与预防方面的功能，但是对于鱿鱼酸解多肽抗肿瘤的研究在国内外尚属空白。二、研究的基本内容，拟解决的主要问题：主要内容：1.酸解工艺部分：选取四种常见的酸，通过正交实验，确定鱿鱼的最佳酸解条件。本人对该部分的见解：首先，正交实验中各因素与水平的选择要合理；其次，实验号的选择要具有随机性；最后，为了尽可能的减少误差，每个实验号做三个平行实验，取其平均值。2.分离纯化部分：以抑制乳腺癌细胞增殖率以及在显微镜下观察的细胞形态为评价标准，通过超滤法、色谱层析等技术分离纯化出具有较强抗乳腺癌细胞增殖的酸解多肽。本人对该部分

6、的见解：该部分的关键点是色谱柱平衡缓冲液及洗脱液的选择，洗脱流速及洗脱液的收集。3.酸解物抗乳腺癌作用：选用HE染色法、MTT法、流式细胞术等技术方法，研究酸解多肽对乳腺癌细胞形态的影响、酸解多肽作用浓度对乳腺癌细胞增殖率及凋亡率的影响。本人对该部分的见解：本部分在三个部分当中具有重要的位置，该部分所采用的方法和技术是整个实验成败的关键，因为本研究的最终目的是分析酸解多肽抗乳腺癌细胞的作用，从而为将来抗肿瘤保健品和药品的开发提供理论和技术支持4.采用mtt法培养肿瘤细胞，研究其抑制作用。拟解决的主要问题：211.酸解技术的研究。2.分离纯化过程中超滤技术、层析技术、高效液相色谱等技术的研究

7、。3.凝胶电泳技术的研究。4.细胞培养技术、HE染色技术、MTT法、流式细胞术。三、研究步骤、方法及措施：步骤：1.选用4种酸进行比较，考虑到酸提料液比、酸的种类、酸解温度及酸解时间对鱿鱼墨多肽的影响，最终确定酸解鱿鱼墨多肽的最佳条件。2.利用超滤法、凝胶层析法、离子交换层析法、反相高效液相色谱法等分离纯化出具有高效抗乳腺癌活性的酸解多肽。3.鱿鱼墨多肽对SKBR3细胞的增值抑制研究。MTT法研究不同浓度的鱿鱼墨多肽对S