微生物实验室培养学案设计2

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1、微生物的实验室培养(二)［考纲要求】本部分内容在考纲屮包括传统发酵技术和微生物的培养和应用，能力要求均为实验与探究。近五年高考中课标全国卷出现的频率非常高，近五年全国一卷考察的均为微主物的培养与应用。全为非选毎题，分值均为15分。预计2019高考，该考点还会作为热点出现。【基础感知】考点一、微生物的分离与纯化技术1.纯化大肠杆菌(1)平板划线法①原理：通过接种坏在琼脂固体培养基表面的操作，将聚集的菌种逐步—到培养基的表面。(§)步骤接种环灭菌：将接种环放在酒精灯火焰上灼烧直至烧红在酒精灯冷却接种环，并打开盛有菌液的试管的取菌种＜b.将试管口通过—达到消灭试管口杂菌的目的C.将已的接种环伸入菌液

2、中，沾取一环菌液•d.将试管口,并塞上棉塞5.左手将U11盖打开一条缝隙，右手把沾有菌种的接种环迅速伸入平板内，划条平行线，盖上皿盖。注意O平板Ib.灼烧接种环，待其冷却后，从第一划线］区域开始往第二区域内划线。重复以上操作，完成三、四、五区域内划线。注意不要将最＜后一区的划线与相连培养：将平板,放入培养箱中培养(2)稀释涂布平板法①原理：将菌液进行一系列的,然后将不同稀释度的菌液分别涂布到琼脂固体培养基的表面，进行培养。②步骤I.系列稀释操作1mL1mL1mL1mL1mL1mLa.编号为10i〜1()6试管中分别盛有水。b.用移液管吸取培养的菌液，注入IO】倍稀释的试管中，得到稀释菌液。c.

3、从IO】倍稀释的试管中吸取1mL稀释液，注入IO?倍稀释的试管屮。依次类推，完成菌液的稀释。注意移液管要经过灭菌，并且操作应在酒精灯火焰附近完成。II.涂布平板操作涂布器消毒：将涂布器浸在盛有的烧杯中涂布器取菌液：取少量菌液滴加到表面/I涂布器灭菌：将沾有少量酒精的涂布器在火焰上引燃，待酒精燃尽后,8-10s涂布平板：用涂布器将均匀涂布在培养基表面，涂布时町转动培养皿,使菌液分布均匀比较项目临时保藏甘油管藏适用范围的菌种的菌种具体方法接种到固体斜面培养基上f适宜温度下培养f冰箱中保藏甘油瓶中装入甘油后f将菌液转移至廿油瓶中一混匀后冷冻箱中保存考点二.菌种保藏【深入学习】1.平板划线操作注意事项

4、(1)平板划线法接种菌种吋，哪些操作可防止杂菌污染？①接种前将接种环放在酒精灯火焰上灼烧。②划完一个区域后，将接种环灼烧，冷却后再划下一区域。③接种环沾取菌液时，要将试管口、棉塞等通过火焰。④划线时将培养皿打开一条缝隙，将沾有菌种的接种环迅速伸入平板内。(2)在灼烧接种坏之后，为什么要等其冷却后再进行划线?⑶为什么在操作的第一步以及每次划线之前都要灼烧接种环？操作的第一步灼烧接种环是为了避免接种环上可能存在的微生物污染培养物。每次划线前灼烧接种环是为了杀死上次划线结束后，接种环上残留的菌种，使下一次划线时，接种环上的菌种直接来源于上次划线的末端，从而通过划线次数的增加，使每次划线时菌种的数目逐

5、渐减少,以便得到菌落。(4)在划线操作结束时，仍然需要灼烧接种坏吗？为什么？(4)在做第二次划线以及其后的操作时，为什么总是从上一次划线的末端开始划线?(5)为何最后一次划线不能与第一次划线相连？最后一次划线已经将细菌稀释成单个的细胞，如杲与第一次划线相连则增加了细菌的数目，得不到纯化的效果。1.稀释涂布平板操作注意事项(1)涂布平板的所有操作都应在火焰附近进行。结合平板划线与系列稀释的无菌操作耍求，想一想将菌液滴加到培养基上时应如何进行无菌操作？应从操作的各个细节保证“无菌”。例如，酒精灯与培养皿的距离要合适，吸管头不要接触任何其他物体，吸管要在酒精灯火焰附近等。(2)操作结束后，为什么要将

6、一个未接种的培养基和一个接种的培养基放在一起培养？未接种的培养基表面是否有菌落生长很关键。如果有菌落生长，说明了什么？【课堂检测】1.(2014课标，39,15分)为了调查某河流的水质状况，某研究小组测定了该河流水样小的细菌含量，并进行了细菌的分离等工作。回答下列问题：(1)该小组采用稀释涂布平板法检测水样中的细菌含量。在涂布接种前，随机取若干灭菌后的空平板先行培养了一段时间，这样做的目的是:然后，将ImL水样稀释100倍，在3个平板上用涂布法分别接入0.1mL稀释液；经适当培养后，3个平板上的菌落数分别为39、38和37。据此可得出每升水样中的活菌数为。(2)该小组采用平板划线法分离水样中的

7、细菌。操作时，接种环通过灭菌，在第二次及以后划线时，总是从上一次的末端开始划线。这样做的目的是(4)该小组将得到的菌株接种到液体培养基中并混匀，一部分进行静置培养，另一部分进行振荡培养。结果发现：振荡培养的细菌比静置培养的细菌生长速度快。分析其原因是：振荡培养能提高培养液的的含量，同时可以使菌体与培养液充分接触，提高的利用率。1.农业生产上有一种广泛使用的除草剂在土壤中不易被降解，长期使用会污染土