实验二水质的细菌学检测(教案)

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1、实验二水质的细菌学检测1水中细菌总数的检测H的和原理水屮细菌总数往往同水体受有机物污染的程度呈正相关，它是评价水质污染程度的一个重要指标之一。山于重金属及某些其它有毒物质对细菌有杀灭或抑制作用，因此总细菌数少的水样，并不能排除已被这些物质所污染。本试验采用标准平皿法対水样中细菌作计数,这是一•种测定水中好氧的和兼性厌氧的界养细菌密度的方法，由于细菌在水体中能以单独个体、成对、链状，成簇或成团的形式存在,此外没有单独的一种培养基或某一环境条件能满足一个水样屮所有细菌的生理要求，所以由此法所得的菌落数实际上要低于被测水样屮真正存在的活细菌的数目。细期总数是指1毫升水样在营养琼脂培养基中，37

2、C、24小吋培养后所生长的菌落数。一•般规定，1毫升口来水中总菌数不得超过100个。材料和器皿（1）培养基①营养琼脂培养基②2216E培养基：蛋白腺5.0克酵母膏1.0克FeP040.01克琼脂1&0克陈海水1000毫升pH7.6〜7.8（2）无菌采样瓶、灭菌移液管、灭菌培养I1IL,盛有90ml及9mL灭菌蒸懈水的锥形瓶和试管。方法和步骤（1）采集水样。（2）吸取10ml水样（河水、污水、游泳池水或港湾水等），注入盛有90ml无菌水或无菌海水的三角瓶屮，混匀成10-1稀禅液，在吸水样前，水样应彻底搅动均匀。（3）按10倍稀释法将水样稀释成10-2.10-3.10-4o（4）根据水样的洁

3、净程度，污染严重者选KX10-2.10-3.10-4稀释度；中等的选取10-1、10-2、10-3稀释度，每个稀释液分别注入两个培养皿，每皿lmlo稀释度的选择是本试验精确度的关键，选择适宜者，平皿上菌落总数介于30?/F0NT>300个之间。（5）注入彻底融化，然后冷却到45°C的营养琼脂培养基（用于河水样）或2216E培养基（用于海水、港湾水样）约1亦1,立即旋摇培养血，充分混匀，水平放置至固化。（6）接种河水的培养皿，倒置于37C培养24小吋。接种海水样，港湾水样的培养皿，应倒置后于18?/F0NT〉20°C下培养到长出明显菌落（5天左右）止。结果与分析取同一稀禅度的平板培养物，依

4、菌落计算原则进行计算。（1）菌落计算原则平1111菌落的计算，可用肉眼观察，必要时用放人镜检查，防I上遗漏，也可借助于菌落计数器计数。对长得相当接近，但不相触的菌落，应予以榆患剖6粤酷淳洌①弊魁桓髦淅醇扑恪F侨篋腥粲薪洗笃淳洎痹虽灰瞬捎茫抵淳洵儆谄矫》!善囊话胧保娥话胫芯淀植加志闌蚩山渚泊?/F0NT>2倍作为全皿的数目。算岀同一稀释度的平均菌数，供下一步计算吋用。（2）计算方法①首先选择平均菌落数在30〜300者进行计算。当只冇一个稀释度的平均菌落数符合此范围时，即可用它作为平均值乘其稀释倍数（见表5-9的例1）o②若有两个稀释度的平均菌落数都在30?/F0NT>300Z间，则应按两者

5、的比值来决定。若其比例小于2,应报告两者的平均数；若大于2,则报告其中较小的数字（见表7-例2和例3）o③如果所有稀释度的平均菌落数均人于300,则应按稀释度最高的平均菌落数乘以稀释倍数报告之（见表5-9例4）。④若所有稀释度的平均菌落数均小于30,则应按稀释度最低的平均菌落数乘以稀释倍数报告Z（见表5-9例5）。⑤如果全部稀释度的平均菌落数均不在30?/F0NT>300之间，则以最接近300或30的平均菌落数乘以稀释倍数报告Z（见表5-9例6）o①菌落计数的报告，菌落在100以内时，按实有数报告；大于100时，采用二位有效数字,在二位冇效数字后面的数值，以四舍五入方法计算，为了缩短数字

6、后面的零数也可用10的指数来表示（见表5-9的“报告方式”栏）。表5-9稀释度选择及菌落报告方式例次不同稀释度的平均菌落数两个稀释菌落总数报告方式10-110-210-3度菌落数之比（个/ml）（个/ml）1136016420—1640016000或1.6X10422760295461.63775038000或3.8X10432890271602.2I2710027000或7X1044无法计数4651513—513000510000或5.1X105527115—270270或2.7X1026无法计数30512—3050031000或3.1X1042.水中大肠菌群（Coliformgrou

7、p）细菌的检测目的和原理如果水源被粪便污染，则冇可能也被肠道病原菌污染而引起肠道传染病。由于肠道病原菌在水中数量较少，故从水中特別是口来水中分离病原菌常常II：-常困难。大肠菌群细菌是肠道好氧菌中最普遍和数量最多的一类细菌，所以常常将其作为粪便污染的指示菌。即根据水中大肠菌群细菌的数目來判断水源是否受粪便所污染，并间接推测水源受肠道病原菌污染的可能性。一般规定每1000ml自来水屮人肠菌群细菌不得超过3个。人肠菌群细菌是指一类好氧或