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《黄花倒水莲提取物促凝血作用及机制的研究》由会员上传分享,免费在线阅读,更多相关内容在工程资料-天天文库。
1、黄花倒水莲提取物促凝血作用及机制的研究严金玲严文华(通讯作者)李斌曾洁钟声杨人泽(赣南医学院第一附属医院江西赣州341000)【摘要】目的观察黄花倒水莲提取物促凝血作用及机制的影响。方法采用体外血浆法测定药物对凝血作用的影响。采用凝血因子分析仪测定血浆纤维蛋白原、优球蛋白溶解时间、活化部分凝血活酶时间。结果黄花倒水莲提取物能明显缩短血浆凝血酶时间;减小凝血酶原时间;升高血浆纤维蛋白原和延长优球蛋白溶解时间;缩短活化部分凝血活酶时间。结论黄花倒水莲提取物具有明显的促凝血作用,其促凝血作用机制可能与升高血浆纤维蛋白原和优球蛋白溶解
2、时间;降低活化部分凝血活酶时间有关。【关键词】黄花倒水莲凝血酶时间(TT)凝血酶原时间(PT)血浆纤维蛋白原(Fib)优球蛋白溶解时间(ELT)活化部分凝血活酶时间(APTT)黄花倒水莲(PFH)又称假黄花远志,主产于湖南、广西、江西、广东和云南等地,药用其全草[1-2]o其性平、微温、味甘、微苦;具补益气血、健脾祛湿、活血化瘀、调经等功效。研究表明:黄花倒水莲根含有皂昔、多糖、有机酸、氨基酸等,具有明显的抗衰老、改善心肌缺血、免疫调节、抗应激、抗衰老、抗病毒活性[3・5]等作用,主治虚弱虚肿、急慢性肝炎、腰腿酸痛、跌打损伤。
3、有人报道黄花倒水莲提取物抗血脂作用[6]、对实验性胃黏膜损伤的保护作用、对实验性肝损伤的保护作用。现报道黄花倒水莲提取物促凝血作用及机制的研究。1材料和方法1.1材料黄花倒?K莲提取物的希9备取干燥黄花倒200g,加双蒸水过液面2cm,煮沸2次。30min/次,合并滤液,浓缩至400mlo加3倍量95%的乙醇,放冰箱静置过夜,次日减压过滤,并回收滤液中乙醇,继续浓缩滤液得无醇味的提取物。提取物加双蒸水至200ml使药液为相当于生药lg/mL用0.5%NaOH调整pH为7.0。置冰箱中备用。1.1.2试验动物健康成年SD大鼠(江
4、西中医学院实验动物中心提供),体重300〜400g,雌雄各半,随机分纽,1.1.3药品与试剂10%的水合氯醛(国药集团化学试剂有限公司,批号:20090407);枸椽酸钠(1:9)真空采血管(江西富尔康实业集团有限公司,批号:20090903);凝血酶原时间测定试剂盒和凝血酶时间测定试剂盒(上海太阳生物技术有限公司产品)。统计分析:实验结果均以・x±s表示,数据进行单因素方差分析。2方式与结果2.1分组及给药清洁级SD大鼠15只,随机分为三组:A.空白对照组;B.低剂量黃花倒水莲提取物组(1.5g/kg);C.高
5、剂量黄花倒水莲提取物组(3.0g/kg)o高、低剂量组每天以相应量的药物灌胃,空片对照组给予等量生理盐水灌胃,每天一次,持续5天。2.2黄花倒水莲提取物对体外凝血时间的测定实验前动物禁食12h,末次给药后0.5h,以10%的水合氯醛麻醉(0.35ml/100g),用毛细管从眼睛内眦部插入眼底,血液即进入毛细管内,直至血液从毛细管内流出,舍弃第一滴,然后取洁净玻片接一滴血(直径约5mm左右),并按下秒表开始计吋,每10-20S用清洁6号针头自血滴边缘向里轻轻拨动,观察有无血丝挑起。从采血开始至挑起血丝为止即为凝血时间,记录凝血时
6、间。表1黄花倒水莲提取物对大鼠玻片凝血时间的影响(-x±s;n=5)与空白组比较,*P<0.05;**P<0.01o2.3黄花倒水莲提取物对凝血酶原吋间(PT)的测定取待测血浆0.1mL,37°C水浴孵育3min,加入37°C预温的凝血活酶0.2mL,混匀,立即启动秒表,记录凝固吋间,即为凝血酶原时间值(s)。每个样品重复实验5次,取其平均值。图1黄花倒水莲提取物对凝血酶原时间的影响与空白组比较,*P<0.05o2.4黄花倒水莲提取物对凝血酶时间(TT)的测定眼眦取血后,暴露大鼠腹腔,分离腹主静脉,用枸椽酸钠抗凝
7、(1:9)真空采血管自腹主静脉采血2mL,轻轻摇匀,后3000r/min离心15min,取上清液,即待测血浆。取待测血浆O.lmL,37°C水浴孵育3min,加入凝血酶0.1mL,混匀,立即启动秒表,记录凝固吋间,即为凝血酶吋间值⑸。每个样品重复实验5次,取其平均值。图2黄花倒水莲提取物对凝血酶时间的影响与空白组比较,*P<0.05o2.5黄花倒水莲提取物对优球蛋白溶解吋间(ELT)的测定SD大鼠,体重200±20g,心脏采血1.8ml,O.lmol/L草酸镀1:9抗凝,3000r/min离心lOmin,分离贫血
8、小板血浆。取0.5ml新鲜血浆,按文献方法制得纤维蛋白凝块,加不同浓度的黄花倒水莲提取物,对照组加生理盐水,37°C孵育,记录凝块完全溶解吋间。表2黄花倒水莲提取物对优球蛋白溶解时间的影响(-x±s;n=5)与空白组比较,*P<0.05;**P<0.01o2.6