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1、现代食品科技ModernFoodScienceandTechnology2017,Vol.33,No.4桑葚提取物体外抗炎作用及机制的研究1,2,31,211111,24441朱翠玲,陈铭,汪孟涵,沈婷,强倩,王新风,纪丽莲,冯作山,陶永霞,白羽嘉,胡卫成(1.淮阴师范学院,江苏省高校区域现代农业与环境保护协同创新中心,江苏淮安223300)(2.淮阴师范学院生命科学学院,江苏省环洪泽湖生态农业生物技术重点实验室,江苏淮安223300)(3.扬州大学食品科学与工程学院,江苏扬州225127)(4.新疆农业大学食品科学与药学学
2、院,新疆乌鲁木齐830052)摘要:本文采用脂多糖(LPS)刺激小鼠腹腔巨噬细胞RAW264.7,建立细胞体外的炎症模型,研究桑葚提取物对LPS诱导巨噬细胞RAW264.7分泌功能的影响及其作用机制。实验用1μg/mLLPS刺激RAW264.7细胞,在不同浓度样品的干预下,用MTT法检测不同浓度的样品对RAW264.7细胞的作用;用Griess法检测细胞液中NO的含量;用酶联免疫吸附法(ELISA)检测细胞液中PGE2含量;用免疫印迹法(WesternBlot)和RT-PCR法检测桑葚提取物对细胞iNOS和COX-2表达的影
3、响;用HPLC法检测桑葚提取物中白藜芦醇的含量。结果表明桑葚提取物浓度在0.5~2mg/mL范围内对细胞生长无明显影响;在1~2mg/mL范围内能有效抑制NO和PGE2的分泌并能有效抑制iNOS和COX-2的表达;桑葚提取物中白藜芦醇的含量为107.44±0.48μg/g。这表明桑葚提取物抑制炎症相关因子表达量,从而减弱促炎症反应,发挥抗炎功效,其抗炎活性可能与桑葚中含有较高的白藜芦醇相关。关键词:桑葚;内毒素;抗炎;白藜芦醇文章篇号:1673-9078(2017)4-61-66DOI:10.13982/j.mfst.167
4、3-9078.2017.4.010InvitroCharacterizationoftheAnti-inflammatoryEffectsofMulberryExtractandtheMolecularMechanisms1,2,31,211111,2ZHUCui-ling,CHENMing,WANGMeng-han,SHENTing,QIANGQian,WANGXin-feng,JILi-lian,4441FENGZuo-shan,TAOYong-xia,BAIYu-jia,HUWei-cheng(1.JiangsuCol
5、laborativeInnovationCenterofRegionalModernAgriculture&EnvironmentalProtection,HuaiyinNormalUniversity,Huai’an223300,China)(2.JiangsuKeyLaboratoryforEco-AgriculturalBiotechnologyaroundHongzeLake,SchoolofLifeScience,HuaiyinNormalUniversity,Huai’an223300,China)(3.Coll
6、egeofFoodScienceandEngineering,YangzhouUniversity,Yangzhou225127,China)(4.CollegeofFoodScienceandPharmacy,XinjiangAgriculturalUniversity,Urumqi830052,China)Abstract:AninvitromodelofinflammationwasestablishedbystimulatingthemouseperitonealmacrophagecelllineRAW264.7w
7、ithlipopolysaccharide(LPS).Thismodelwasemployedtoinvestigatetheanti-inflammatoryeffectsofmulberryextractandtheunderlyingmolecularmechanisms.RAW264.7cellswerestimulatedwith1μg/mLLPS,followedbytreatmentwithdifferentconcentrationsoftheextract.TheeffectoftheextractonRA
8、W264.7cellviabilitywasevaluatedbythe3-(4,5-dimethylthiazol-2-yl)-2,5-diphenyltetrazoliumbromide(MTT)assay.Thenitricoxide(NO)andprostaglandinE2(PG