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1、粗糙链抱霉顺序四分子分析AnalysisoftheNeurosporacrassa'sordedtetrad摘要：本实验通过菌种活化、杂交、显微镜观察等方法对粗糙链孑包霉的顺序四分了进行遗传分析，从而达到以下目的：1、了解粗糙链沦霉的牛活周期及生长特性；2、通过对粗糙链抱霉杂交后代的表型分析，掌握顺序四分子的遗传学分析方法：3、通过有关基因的着丝粒作图，进一步理解基因的分离和连锁交换定律。Abstract:Thisexperimentbystrainsofactivation,hybridization,microscopeobservationandothermethodsofroughch
2、ainsporemouldorderfourmoleculargeneticanalysis,soastoachievethefollowingobjectives:1andunderstandthelifecycleoftheroughchainsporemouldandgrowthcharacteristics;2,throughtheroughchainsporemildewhybridoffspringphenotypeanalysis,graspthesequeneeoffourmoleculargeneticsanalysismethod;3,throughtherelevantg
3、enescentromeremapping,separationoffurtherunderstandingthegeneticchainandexchangelaw.顺序四分子，连锁交换定律，基因转换，笫一次减数分裂，第二次减数分裂Keywords：Ordedtetrad,Chainexchangelaw,Geneconversion,Firstdivisionsegregation,Seconddivisionsegregation前言：粗糙链他霉（Neurosporacrassa）又称红色面包霉，属于真菌中的了囊菌纲、球壳冃、脉砲菌属，冃前已知4〜5种。粗糙链抱霉是低等的真核生物，对英进
4、行遗传学分析具冇以下特点：（1）子囊砲子是单倍体，没有显隐性，其表型直接反应其基因型；（2）一次只分析一个减数分裂的产物，就可观察到遗传结果，简单易行；（3）体积小，易培养，繁殖快，一次杂交就能产生人量的示代，便于获得正确的统计学结果；（4）既能进行有性生殖，又能进行无性生殖，其染色体的结构和功能类似于高等动植物，研究结果可在遗传学广泛应用:（5）子囊他子在子囊中的线性排列顺序，与减数分裂中期染色体在赤道板两侧的排列顺序相同，便于观察。因此，粗糙链他霉是进行基因分离和连锁交换遗传分析的好材料。而且顺序四分子在遗传分析上有很多优越性：（1）可以把着丝粒作为一个座位（locus）,计算基因与着丝粒
5、的重组率，即着丝粒作图；（2）子囊屮子囊砲子的对称性，证明减数分裂是一个交互过程，而非单向过程；（3）可以检验染色单体的交换是否存在干涉现象；（4）还可利用它来进行基因转变（geneconversion）的研究；（5）证明双交换不仅可以包括4线中的两线,而且可以包括3线或4线双交换。7.次分裂分离（JC交换）第：次分裂分离“交换）第二次分裂分离子囊数11nno/=石,灼x—x100%有关基因与着丝粒之间的垂组值了裝息数2实验用品与方法：实验用品：1•材料粗糙链他霉：野生型菌株（Lys+,mt+）；赖氨酸缺陷型菌株（Lys・,mt・）2.试剂（1）5%次氯酸钠（NaCIO）溶液。（2）5%的石炭
6、酸（苯酚）溶液。（3）马铃薯培养基（4）补充培养基（培养赖氨酸缺陷型）：lOOOmL马铃薯培养基补加0.1g赖氨酸。（5）玉米杂交培养基3.器具超净工作台、恒温培养箱、高压灭菌锅、电了天平、显微镜、酒精灯、镀子、解剖针、接种环，载玻片、具塞试管（18mmX180mm）、培养皿（①90mm）、滤纸、烧杯、最筒等。方法：1•菌种活化将粗糙链抱霉野生型和赖氨酸缺陷型菌种从冰箱屮取岀，在超净工作台上分别接种到两支马铃蒋斜面培养基上，28°C恒温箱培养7d左右。培养到菌丝的上部有分住沦子产牛。2.杂交在玉米杂交培养基滤纸条上同时接种两亲木菌株的分生他了或菌丝,26°C恒温箱进行混合培养。注意要贴上标签，
7、写明亲本菌株及杂交H期。在杂交后5〜7d就能看到许多棕色的原了囊果出现，以示原了囊果变人变黑成了囊果，7〜14d左右可在显微镜下观察。3.显微镜观察用蹑子将朵交培养基上长有子囊果的滤纸条取出，放入5%次氯酸钠溶液中。取一载玻片,滴1〜2滴5%次氯酸钠溶液，然后丿1］接种针挑出了囊果放在载玻片上，取另一载玻片垂叠盖上，川手指压片，将子囊果压破，直显微镜卜•检查，观察子囊屮子囊抱子的排列情况。观察过的
