粗糙脉孢霉四分子遗传分析

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1、真菌类的遗传分析————四分子分析与作图一粗糙脉孢霉的性质与生活史（一）粗糙脉孢霉的性质粗糙脉孢霉(Neurosporocrassa)属于真菌中的子囊菌纲，是低等的真核生物。每一菌丝细胞中含有几十个细胞核。是遗传分析好材料:1子囊孢子是单倍体，其表型直接反应其基因型。2一次只分析一个减数分裂的产物。3体积小，易培养，繁殖快，一次杂交就能产生大量的后代，便于获得正确的统计学结果。4能进行有性生殖，其染色体的结构和功能类似于高等动植物。5更加重要的是，子囊孢子在子囊中的线性排列顺序与减数分裂中期染色体在赤道板两侧的排列顺序相同，这就是粗糙脉孢霉成为了遗传分析的好材料。（二）粗糙链

2、孢霉的生活史粗糙链孢霉有有性生殖和无性生殖。无性世代（单倍体世代）：菌丝体→分生孢子→菌丝体。粗糙脉孢菌（NeurosporaCrassa）的生殖方式有性世代（双倍体世代）：一个交配型的分生孢子落在另一交配型原子囊壳受精丝上，从而进入原子囊（子实体），进行多次有丝分裂，形成多个单倍体核，这些单倍体核与子实体中的单倍体核融合，形成多个二倍体核，然后进入减数分裂，每个二倍体核形成4个单倍体核，再进行一次有丝分裂，形成8个核，最后形成为一个子囊中的8个子囊孢子。无性孢子——分生孢子有性孢子——子囊孢子二　顺序四分子与遗传分析（一）顺序四分子(ordedtetrad)粗糙脉霉菌减数分

3、裂的四个产物保留在一起，称为四分子。但是，在分裂的过程中子囊的外形比较狭窄，以至分裂的纺锤体不能重叠，只能纵立于它的长轴中，这样所有分裂后的核――８个子囊孢子都是从上到下排列成行，所以，脉孢菌减数分裂所产生的四分子是属于顺序四分子(ordedtetrad)。可推知：第一对子囊孢子来自一条染色单体，第二对孢子则是来自这条染色单体的姊妹染色单体;第三和第四对子囊孢子是来自前一条染色体同源染色体的姊妹染色单体。８个子囊孢子都是从上到下排列成行这种顺序四分子在遗传分析上有很多优越性:(1).可以把着丝粒作为一个座位(locus)，计算基因与着丝粒的重组率，即着丝粒作图。(2).子囊中

4、子囊孢子的对称性，证明减数分裂是一个交互过程，而非单向过程。(3).可以检验染色单体的交换有否染色单体干涉现象，还可利用它来进行基因转变(geneconversion)的研究。(4).证明双交换不仅可以包括4线中的两线,而且可以包括3线或4线双交换。（二）着丝粒作图与遗传分析利用四分子分析法，测定基因与着粒间的距离称为着丝粒作图。着丝粒作图是基于这样的事实：减数分裂中在同源染色体的一对非姊妹染色单体的着丝粒和某杂合基因座间有没有发生交换，和其产物四分子中的等位基因在排列方式上是不同的。可分为两种：发生了交换的产物为第二次分裂分离(seconddivisionsegregati

5、on)或称为MII模式没有发生交换的产物为第一次分裂分离(firstdivisionsegregation)或叫MI模式;第一次分裂分离（图示一种可能）第二次分裂分离（图示一种可能性）利用四分子分析，测定基因与着丝粒间的距离，即根据子囊孢子基因型的排列顺序，计算基因与着丝粒的重组率，确定基因与着丝粒之间的距离和排列顺序。一对基因的遗传分析材料有两种不同接合型的脉孢菌菌株：•一种是能合成赖氨酸(lysine)的野生型菌株(记作lys+，或+)，该菌株成熟的子囊孢子呈黑色。•另一种是赖氨酸缺陷型(记作lys—或—)，这种菌株的子囊孢子成熟较迟，呈灰色。序号子囊类型子囊数分裂类型将

6、这两种菌株杂交杂种子囊减数分裂的产物根据黑色孢子和灰色孢子的赖氨酸缺陷型(lys-)×野生型(lys+)，排列次序可有6种子囊型，为方便起见只写出其4个孢子对(sporepairs)，其计数的结果：序号子囊类型子囊数分裂类型序号子囊类型子囊数分列类型1++——105M1非交换型2——++1293+—+—9M2交换型4—+—+55+——+106—+—+16将表3-7中所观察到的各类子囊数代入上式可得：lys+基因与着丝粒间的图距是7.3cM两个基因的连锁图形利用顺序四分子分析，同样可以进行两个基因的连锁作图nic（nicotinicacid）为烟酸依赖型nade（adenine

7、）为腺嘌呤依赖型a两对基因的杂交实验，可产生(6×6)36种不同的子囊型，归纳为7种基本的的子囊型序号1234567子囊型+a+++++a+a+++++a+++anan+nanan+nan++++a+++an+nanan+n+nan+分离类型MIMIMIMIMIMIIMIIMIMIIMIIMIIMIIMIIMII类别PDNPDTTPDNPDT数目80819059015对子囊进行分类统计，不考虑孢子排列顺序，根据性状组合将四分子分为三种类型PD:亲二型（parentalditype)：孢子有2种基因型，且