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1、第23卷第10期第 三 军 医 大 学 学 报Vol.23,No.102001年10月ACTAACADEMIAEMEDICINAEMILITARISTERTIAEOct.20011197文章编号:100025404(2001)1021197203论著探针浓度对压电传感器基因杂交效应的影响刘明华,府伟灵,汪松林,黄 庆,陈 鸣 (第三军医大学附属西南医院检验科,重庆400038) 提 要:目的 探讨探针浓度对压电传感器基因杂交效应的影响。方法9种浓度的探针与同一浓度的靶序列在压电传感器阵列上进行杂交,计算机采集并分析传感器频率数据,比较各探针浓度下固定前后频率差、杂交达到平衡所需时间,杂交
2、前后频率差,同时,根据较低浓度数据得出的杂交动力学参数,计算各浓度下的频率变化理论值。结果 随探针浓度增加,固定引起的频率变化值逐渐增加;杂交时间有缩短趋势;杂交前后的频率差值在探针浓度较低(1nmol/L～0.5μmol/L)时逐渐增大,而探针浓度较高(1.0～3.5μmol/L)时反而减小。高浓度时杂交前后频率变化理论值与实际值存在明显差异。结论 在石英晶体传感器阵列上,基因杂交效率随探针浓度增加而增大,但探针浓度过高反而抑制杂交,其原因可能主要在于探针之间的空间构象关系和静电排斥。 关键词:核酸杂交;探针;压电晶体;传感器 中图法分类号:R446.5;TP212文献标识码:AEff
3、ectsofprobeconcentrationonhybridizationefficiencyofpiezoelectricgenesensorarraysLIUMing2hua,FUWei2ling,WANGShong2lin,HUANGQing,CHENMing(DepartmentofMedicalLaboratoryScience,SouthwestHospital,ThirdMilitaryMedicalUniversity,Chongqing400038,China)Abstract:ObjectiveToinvestigatetheeffectsofprobeconcent
4、rationonhybridizationefficiencyofpiezoelectricgenesensorarrays.MethodsGenesensorarraysof2×5weremade,9differentconcentrationofgeneprobeswereimmobilizedonAusurfacesandhybridizedwithitscomplemen2tarysequencesofsameconcentrationseperately.Dataoffrequencywascollectedandanalyzed.Hybridizationtimeandfrequ
5、encydifferencescausedbyimmobilizationandhybridizationunderdifferentprobeconcentrationwerecomparedandthefrequencydifferencesobtainedfrommeasurementwerecomparedwiththetheoreticalvalue.ResultsWiththeincreaseoftheprobeconcentration,frequencydifferencecausedbyimmobilizationin2creased,andhybridizationtim
6、ewithatrendsofshortening.Whilethefrequencydifferencemadebyhybridization,tendedtoraiseinaratherlowprobeconcentrationbutdecreasedinhigherprobeconcentration,whichwasquietdifferentwiththatofthetheoricalvalue.ConclusionInthepiezoelectricgenesensorarrays,properprobeconcentrationenhancesgenehybridization,
7、butexcessiveconcentrationwouldinhibitgenehybridiza2tion,whichcouldprobablybeexplainedbythestericandelectrostatichindrances.Keywords:nucleotidehybridization;probe;piezoelectriccrystal;sensorarray 随着分子生物学在医学
