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《低氧时反义寡核苷酸对胰腺癌乙酰肝素酶表达及侵袭力的影响_百替生物》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在行业资料-天天文库。
1、·实验研究·低氧时反义寡核苷酸对胰腺癌乙酰肝素酶表达及侵袭力的影响孟珂伟吴武军宋占文周先亭王雪峰张永明李绍军(注：可于万方数据库下载该论文的全文。该论文的著作权及相关财产权属于中华医学会，即中华医学会对本文的部分或全文具有但不限于以下的专有使用权：汇编权、发行权、复制权、翻译权、网络出版及信息传播权)【摘要】目的研究低氧对胰腺癌乙酰肝素酶（Hpa）表达的影响及与肿瘤细胞侵袭力的关系。方法体外低氧培养细胞，观察低氧在不同时间胰腺导管癌细胞株BxPC-3细胞HpamRNA和蛋白表达的变化；以Tranwell侵袭小室实验观察低氧及应用反义寡核苷酸（AS-ODN
2、）阻断Hpa表达后肿瘤细胞侵袭力的变化，明确低氧促进肿瘤细胞侵袭力增加是否与Hpa有关。结果在常氧条件下，BxPC-3细胞HpamRNA和蛋白即有低量表达。在低氧条件下，HpamRNA和蛋白表达在3h受到轻度抑制，在6h、12h、24h和48h表达明显升高，且mRNA和蛋白的表达水平一致。预先以HpaAS-ODN序列阻断Hpa的表达，则低氧不能诱导HpamRNA和蛋白表达上调。低氧使穿过Transwell小室的BxPC-3细胞数量增加了96.2%（P＜0.01），HpaAS-ODN（400nmol/L）对低氧诱导的侵袭细胞的抑制率为37.2%，差异有统计
3、学意义（P＜0.05）。结论低氧可通过上调胰腺癌BxPC-3细胞HpamRNA和蛋白的表达，提高肿瘤细胞侵袭力。【关键词】胰腺癌；乙酰肝素酶；反义寡核苷酸类；低氧【中图法分类号】R735.9【文献标识码】ADOI：10.3760/cma.j.issn.1674-6090.2010.03.002基金项目：山东省烟台市科学技术发展计划项目（2006131-15）作者单位：264000烟台，青岛大学医学院附属烟台毓璜顶医院肝胆外科（孟珂伟、宋占文、周先亭、王雪峰、张永明、李绍军）；710061西安，陕西省人民医院肝胆外科(吴武军)通信作者：孟珂伟，Email:
4、doctormkw@126.comEffectsofantisenseoligodeoxynucleotideonexpressionofheparanasemRNAandinvasionofpancreaticcarcinomainhypoxiaMENGKe-wei*,WUWu-jun,SONGZhan-wen,ZHOUXian-ting,WANGXue-feng,ZHANGYong-ming,LIShao-jun.*DepartmentofHepatobiliarySurgery,YuhuangdingHospital,MedicalCollegeo
5、fQingdaoUniversity,Yantai264000,ChinaCorrespondingauthor:MENGKe-wei,Email:doctormkw@126.com【Abstract】ObjectivesTostudytheregulationofheparanaseexpressionbyhypoxiaanditscorrelationtotheinvasivenessoftumorcells.MethodsBxPC-3cellswereculturedinhypoxiainvitroandtheheparanasemRNAandpr
6、oteinexpressionweredetectedbyreversetranscriptionalpolymerasereactionchains(RT-PCR)andwesternblotrespectively.Matrigelinvasionassaywasusedtoobservetheinvasiveabilitiesoftumorcellsinhypoxiaandinthestatusofheparanasebeinginhibitedbyantisenseoligodeoxynucleotide(AS-ODN)targetingtoth
7、eheparanasegenepromoter.ResultsInnormoxia,therewasarelativelylowlevelofheparanasemRNAandproteinexpressioninculturedBxPC-3cells.Inhypoxia,heparanaseexpression,mRNAandproteinwhichexpressedconsistently,wereinhibitedslightlyat3handupregulatedsignificantlyat6h,12h,24hand48h.Whenthehep
8、aranaseexpressionwasinhibitedbyAS-ODN,th
