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1、院感监测项目一空气监测(布点法):①室内面积≤30cm2,设内外中三个点;室内面积>30cm2设5个点②用直径9cm的琼脂平板分别于上述布点位置,采样时将平板打开,扣于平板旁,暴露时间为5分钟,盖好立即送检.③平板置35-37度48小时培养④计算公式:细菌总数(cfu/m3=50000N/A.T)A为平板面积,T为平板暴露时间,N为平均菌落数即:菌落数/平板数*换算系数换算系数(直径9cm平板)5分钟*157;10分钟*78;15分钟*52;30分钟*26手术室报告方式:个/30minø90二医务人员手监测①手
2、的采样:被检人五指并拢,用生理盐水浸湿棉拭子在双手指曲面从指根到指端往返涂擦2次(一只手涂面积约为30cm2),剪去操作者手触部位,将拭子放入10ml洗脱液中②细菌总数监测:将采样管用力振打80次,用无菌管吸取1ml于灭菌平皿内,加入5ml营养琼脂,摇均,待琼脂凝固后,于37度48小时培养,计数菌落数.计算:细菌总数(cfu/cm2)=平板上菌落数*稀释倍数/60cm2结果判定:环境类别空气cfu/cm3物表cfu/cm2医务人员手cfu/cm2Ⅰ类(层流洁净室)≤10≤5≤5Ⅱ类区域(普通手术室产房婴儿室
3、人工肾烧伤科重症监护)≤200≤5≤5Ⅲ类(儿科注射室换药室等)≤500≤10≤10Ⅳ类(传染科及病房)-≤15≤15注意:①不得检出乙型链球菌金黄色葡萄球菌及其它致病菌②母婴同室,婴儿室,新生儿室及儿科病房的工作人员手上不得检出沙门氏菌铜绿金葡.三物表监测采样:用5*5cm2的方框取样4个不同位置,其余方法同手表检测细菌总数及其他方法无同手表检测计算:细菌总数(cfu/cm2)=平板上菌落数*稀释倍数/采样面积(cm2)结果判定:同手表四A一次性物品(无菌):取5-10套样品用洗脱液洗脱后,各
4、吸取1.0ml接种于平板,35-37度培养3-5天,不得检出细菌.B无菌物品:取供试品2个包装,拆开后于不同部位剪取约1cm*3cm的样品放入增菌液,如果有菌生长,转平板.不得检出细菌五消毒剂:吸取1ml正在使用中的消毒剂加入9ml肉汤中(含有相应中和剂)振80次后吸入1.0ml于灭菌平皿内,加入5ml营养琼脂,摇均,待琼脂凝固后,于37度48小时培养,计数菌落数.报告:cfu/ml结果判定:<100cfu/ml六透析水:1.取透析水1ml于无菌平皿,加入56度琼脂,冷却后于37度48小时作细菌总数计数.结果判
5、定:出口水<200cfu/ml入口水<200cfu/ml报告:cfu/ml注:氧气湿化瓶液监测同上,结果判定:<1000cfu/ml,不得检出致病菌克氏双糖培基配制方法:取克氏双糖商品化干粉培基55g，加入装有1000ml蒸溜水的三角烧瓶中，加热溶解,调PH7.8,分装小试管(约2.5ml),12磅15分钟灭菌。Ｖ－Ｐ培养基:成份：酵母浸肉膏0.2g,胰蛋白胨1.4g,大豆蛋白胨1.0g,葡萄糖2.0g,NaCl1.0g,蒸溜水200ml制法：将上述成份加热溶解,调PH7.0,分装小试管,10P15’高压灭菌。
6、VP试剂:成份：甲液:α-奈酚6g乙醇100ml乙液:40%氢氧化钾靛基质培基:成份：牛肉膏0.6g,胰蛋白胨6g,盐酸胱氨酸(L-半胱氨酸)0.04g,琼脂0.6g,硫代硫酸钠：0.01g蒸溜水200ml制法：将上述成份加热溶解,调PH7.4,分装小试管,15磅15分钟高压灭菌。硝酸盐培基成份：硝酸钾(KON3)0.2g,优质蛋白胨2.0g,蒸溜水200ml制法：将上述成份加热溶解,调PH7.4,分装小试管,10P20’高压灭菌。碱性蛋白胨水成份：蛋白胨10g,氯化钠2.5g,H2O500ml混合溶解,调节P
7、H8.4,高压15分钟灭菌血液保养液成份：枸橼酸0.47g;枸橼酸钠1.33g;葡萄糖:1.5克蒸馏水100ml每25ml可使100ml血保养复方中和剂成份：吐温80(0.5-3%)+卵磷脂(1-2%)+硫代硫酸钠(0.1-1.0%)
