狂犬疫苗研究进展

《狂犬疫苗研究进展》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在学术论文-天天文库。

1、生物制药技术新进展论文题目：狂犬疫苗研究进展作者王磊完成日期2012年11月20日 学院化学工程学院指导教师穆畅道专业制药工程学号2012223070127狂犬疫苗研究进展。摘要：狂犬病系病毒性疾病，临床经过凶险，发病者几乎100%死亡,至今尚无特效药物可以治愈。但狂犬病毒在动物脑组织连续传代后，可获得毒力减弱的固定毒，用固定毒制备的狂犬疫苗，可有效地防治狂犬病。因此,接种狂犬疫苗就成了人类征服狂犬病的一种重要手段。本文综述了狂犬病毒抗原结构、狂犬疫苗、狂犬疫苗的不良反应、不良反应的处理原则、不良反应的预防，帮助人们更全面了解狂犬疫苗。关

2、键词：狂犬病，疫苗，预防1狂犬病毒抗原结构的研究概况1.1狂犬病毒有五种结构蛋白（1）包膜糖蛋白（2）核蛋白（3）膜蛋白（4）膜蛋白（5）多聚酶。其中以包膜糖蛋白和核蛋白为主要抗原结构。包膜糖蛋白抗原是嵌在病毒表面的突起,每个病毒约有突起1072-1451个。包膜糖蛋白抗原具有免疫原性和抗原特异性，它能诱生中和抗体，是制备疫苗的重要抗原成分。核蛋白抗原是狂犬病毒刺激T细胞产生细胞免疫的主要抗原。核蛋白抗原较稳定。1.2狂犬病毒可通过鼻分泌物在动物中传播沈定霞等对我国狂犬病毒北京株和国际标准株（CVS株）的抗原定位进行比较研究，发现两病毒在

3、小鼠脑内的抗原分布相当广泛，主要分布在嗅球、海马及大小脑中。其中嗅球中狂犬病毒抗原出现最早，数量又多，并可通过嗅神经传播到鼻粘膜，随分泌物向外扩散。认为这对狂犬病毒在动物中的传播，起着重要作用。这是狂犬病毒通过唾液传播学说以来的最新学说。1.3病毒在中枢神经内移行，不受抗血清和疫苗干预法国巴斯德研究所Tsiang博士介绍，对大鼠背部感觉神经节体外感染狂犬病毒，证明病毒在神经细胞内移行速度为1mm/h,且不受细胞外中和抗体的干预,表明病毒一旦侵入神经轴索和神经细胞，再用疫苗和抗血清防治，均不奏效，提示疫苗和抗血清接种宜早,细胞免疫值得研究。

4、·2狂犬疫苗研究的若干进展2.1细胞培养狂犬疫苗细胞培养狂犬疫苗相继出现包括：人二倍体细胞疫苗（HDCV）、恒河猴二倍体细胞疫苗（RDRV）,原代胎牛肾细胞疫苗（FBKCV）、原代地鼠肾细胞疫苗（PHKV）、纯化鸭胚细胞疫苗（PDEV）和vero细胞疫苗（PVRV）。由于PDRV、FBKCV、PCECV、PDEV临床应用尚少,或未投入批量生产,故从略，仅重点介绍HDCV、PHKV和PVRV。2.1.1人二倍体细胞狂犬疫苗自1884年法国巴斯德获得狂犬固定毒而制备疫苗以来，历经近百年，虽方法上略有改进，但本质上仍多沿用脑组织来制备疫苗。实践

5、证明，预防狂犬病疫苗起了主要作用。它的缺点是注射针次过多，局部及全身反应较重，甚至可引起脑及脊髓组织损害的变态反应。其发生率为1/10000-1/3000，甚至可高到1/50。1955年Peek等研制成鸭胚疫苗,可是疫苗免疫后的抗体滴度较低，而且仍有脑脊髓变态反应,所不同者是脑脊髓变态反应发生率较低,估计为1/25000。因此，狂犬疫苗的改进成为迫不及待的问题。七十年代前后研制了人两倍体狂犬病疫苗（HDCV），注射针次少,局部反应轻微,免疫效果良好。现将国外研制该疫苗的概况,动物试验及人体接种结果作一简要介绍。2.1.1.1狂犬病毒对人两

6、倍体细胞（HDC）的适应狂犬病毒是嗜神经细胞的病毒,要适应到以成纤维细胞为主的HDC上,有一定的困难。Wiktor等间首先报导了狂犬固定毒可以感染HDC，但若用已接种病毒的培养液或细胞提取液在同种细胞上传代，则滴度逐渐下降,最多传至4-7代即行消失,不能继续传代，为探索其原因，他们用萤光抗体测定法，观察到HDC感染狂犬病毒后,仅极少数细胞被感染。因此，证实用上清液或细胞提取液不可能进行传代。以后他们根据狂犬病毒在细胞内复制繁殖较慢,尤其是病毒由细胞中释放出来系属于芽生方式，很难顶破细胞膜进入培养液而引起HDC再感染，从而改变了传代方法。具

7、体做法是将狂犬病毒感染HDC后,培育3-4天,用HDC本身的传代方法进行传代,由细胞自身的分裂逐步扩大感染,这样传至6代被感染的细胞明显增多。传代时必须用胰酶分散细胞,若用乙二胺四乙酸二钠（Versene）则感染细胞不能逐代增多，甚至下降，最后消失。这是因为胰酶能破坏影响狂犬病毒繁殖的干扰素,还是其他原因,仍不太清楚。他们还发现随着代次的增长,细胞浆内的嗜伊红性及多形性包捆体逐渐增多增大，传至20代左右这种包涵体儿乎布及所有细胞而连成片，细胞由此完全裂解而使细胞不能继续传代。若用传至15代左右的上清液或细胞提取液在健康人两倍体细胞上感染传

8、代，则仍然传不下去。只有每代将感染细胞与健康细胞进行馄合传代，才能使病毒在细胞上传下去。一直传至第47代，再用上清液或细胞提取液，就可在健康细胞上进行传代。这说明病毒在HDC内复制后,已能自由