羟基喜树碱与甲氨蝶呤对hela细胞抑制作用的比较研究

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1、山西医科大学硕士学位论文羟基喜树碱与甲氨蝶呤对Hela细胞抑制作用的比较研究姓名：杨兆文申请学位级别：硕士专业：风湿免疫学指导教师：李小峰20060508摘要目的通过体外细胞培养的方法，研究羟基喜树碱（ＨＣＰＴ）对细胞增殖和细胞周期的影响，并与甲氨蝶呤（ＭＴＸ）比较，探讨ＨＣＰＴ在类风湿关节炎治疗方面的潜在价值，为进一步研究提供科学依据。方法用ＭＴＴ法检测不同浓度和时间的ＨＣＰＴ及相同浓度和时间的ＨＣＰＴ与ＭＴＸ各自作用的吸光度值（Ａ），计算细胞生长抑制率（ＩＲ％）：用碘化丙啶（ＰＩ）染色流式细胞术（ＦＣＭ）检测不同浓度ＨＣＰＴ作用及相同浓度的Ｈ

2、ＣＰＴ与ＭＴＸ各自作用下细胞周期构成的变化。结果ＨＣＰＴ、ＭＴＸ对体外培养的Ｈｅｌａ细胞均具有增殖抑制作用，且均有时间、剂量依赖关系，表现为：吸光度值（Ａ）下降，具有明显的统计学意义（Ｐ＜Ｏ．００１），细胞抑制率（ＩＲ％）增加，不同的是：ＭＴＸ的Ｉｃ。。值小于ＨＣＰＴ，而ＨＣＰＴ的最大抑制率约为ＭＴＸ的２倍：ＨＣＰＴ、ＭＴＸ均可使体外培养的Ｈｅｌａ细胞的细胞周期构成发生明显变化，并且随着药物浓度的增大阻滞作用更加明显（ｐ＜０．００５），二者均作用于Ｓ期，ＭＴＸ使Ｓ期细胞减少、Ｇ０／Ｇ，期细胞增多，而ＨＣＰＴ使Ｓ期细胞增加、Ｇｏ／Ｇ．期细胞减少。结

3、论ＨＣＰＴ、ＭＴＸ均可对体外培养的Ｈｅｌａ细胞产生增殖抑制作用，且均表现出时间、剂量依赖关系，不同的是：ＭＴＸ的效应强度大于ＨＣＰＴ，而ＨＣＰＴ的最大效能大于ＭＴＸ；ＨＣＰＴ、ＭＴＸ均可对体外培养的Ｈｅｌａ细胞的细胞周期构成产生影响，且均作用于ｓ期，不同的是ＨＣＰＴ作用于Ｓ中、晚期，即Ｓ—Ｇ：／Ｍ检测点，使ｓ期细胞增加、Ｇ。／Ｇ。期细胞减少；从而提示ＨＣＰＴ在治疗ＲＡ方面有潜在价值。关键词Ｈｅｌａ细胞，羟基喜树碱，甲氨蝶呤，ＭＴＴ法，流式细胞术山西医科太学硕士学位论文ＡｂｓｔｒａｃｔｏｂｊｅｃｔｉｖｅＴｏｉｎｖｅｓｔｉｇａｔｅｔｈｅｅｆｆｅｃｔ

4、ｏｆｌ０一Ｈｙｄｒｏｃａｒｎｐｔｏｔｈｅｃｉｎ（ＨＣＰＴ）ＯｉｌｃｅｌｌｐｒｏｌｉｆｅｒａｔｉｏｎａｎｄｅｅｌｌｃｙｃｌｅｏｆｔｈｅｃｕｌｔｕｒｅｄＨｅｎｒｉｅｔｔａＬａｃｋｓｓｔｒａｉｎｏｆｃａｎｃｅｒｃｅｌｌｓ（Ｈｅｌａｃｅｌｌｓ）．Ｆｕｒｔｈｅｒｍｏｒｅ．ｔｈｒｏｇ曲ｃｏｎｔｒａｓｔｗｉｔｈｍｅｔｈｏｔｒｅｘａｔｅ（ＭＴＸ），ｔｒｙｔｏｆｉｎｄｏｕｔｔｈｅｐｏｔｅｎｔｉａｌｖａｌｕｅｏｆｔｒｅａｔｍｅｎｔｆｏｒｒｈｅｕｍａｔｏｉｄａｒｔｈｒｉｔｉｓ（ｇａ）．ＭｅｔｈｏｄｓＵｓｉｎｇｔｈｅＭＴＴｍｅｔｈｏｄｔｏｍｅａｓｕｒｅｔ

5、ｈｅｓｕｃｋ—ｌｉｇｈｔｄｅｇｒｅｅｖａｌｕｅｏｆｔｈｅｃｅｌｌｓｔｒｅａｔｅｄｗｉｔｈｄｉｆｉｅｒｅｎｔｄｏｓｅｓｏｆＨＣＰＴａｔｄｉｆｆｅｒｅｎｔｔｉｍｅａｎｄｔｈｅｓａｍｅｄｏｓｅｓｏｆＨＣＰＴａｎｄＭＴＸａｔｔｈｅｓａｍｅｔｉｍｅ，ａｎｄｔｏｃｏｕｎｔｔｈｅｉｎｈｉｂｉｔｉｏｎｒａｔｅ（ＩＲ％）；ｕｓｉｎｇｔｈｅｆｌｏｗｃｙｔｏｍｅｔｒｙ淅ｔ１１ＰＩｓｔａｉｎｉｎｇｔｏｄｅｔｅｃｔｔｈｅｃｈａｎｇｅｓｏｆｅｅｌｌｃｙｃｌｅｏｆｔｈｅＨｅｌａｃｅｌｌｓｔｒｅａｔｅｄｗｉⅡ１ｄｉｆｆｅｒｅｎｔｄｏｓｅｓｏｆＨＣＰＴｓａｍｅｄｏｓｅ

6、ｓｏｆＨＣＰＴａｎｄＭＴＸ．ａｎｄｔｈｅＲｅｓｕｉｔｓＢｏｔｈＨＣＰＴａｎｄＭＴＸＣａｎｉｎｈｉｂｉｔｔｈｅｐｒｏｌｉｆｅｒａｔｉｏｎｏｆｔｈｅｃｕｌｔｕｒｅｄＨｅｌａｃｅｌｌｓａｎｄｔｈｅｅｆｆｅｃｔｉｓｄｏｓｅ—ａｎｄｔｉｍｅ—ｄｅｐｅｎｄｅｎｔ．ＩｔｍａｋｅｓＩＲ％ｉｎｃｒｅａｓｉｎｇ，ｗｈｉｃｈｈａｓｓｔａｔｉｓｔｉｃｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｃｅｐ＜０．００１）．ＴｈｅｄｉｆｆｅｒｅｎｃｅｓｂｅｔｗｅｅｎＨＣＰＴａｎｄＭＴＸａｒｅｔｈａｔｔｈｅｖａｌｕｅｏｆＩＣ５０ｏｆＭＴＸｉｓｓｍａｌｌｅｒｔｈａｎｔｈａｔｏｆＨＣＰＴａ

7、ｎｄｔｈｅｍａｘｉｍｕｍｉｎｈｉｂｉｔｉｏｎｒａｔｅｏｆＨＣＰＴｉＳａｂｏｕｔｔｗｏｔｉｍｅｓｌａｒｇｅｒｔｈａｎｔｈａｔｏｆＭＴＸ：ＢｏｔｈＨＣＰＴａｎｄＭＴＸｃａｎｃｈａｎｇｅｔｈｅｅｅｌｌｃｙｃｌｅａｎｄｔｈｅｅｆｆｅｃｔｉＳｅｎｈａｎｃｅｄｗｉｔｈｔｈｅｉｎｃｒｅａｓｉｎｇｏｆｔｈｅｄｒ”ｇｄｏｓｅｓ（ｐ＜Ｏ．００５）ＴｈｅｙｂｏｔｈａｃｔｉｎＳｐｈａｓｅ．ＭＴＸＣａｎｍａｋｅｔｈｅｎｕｍｂｅｒｏｆｃｅｌｌｓｉｎＳｐｈａｓｅｄｅｃｒｅａｓｉｎｇａｎｄｔｈｅｎｕｍｂｅｒｏｆｃｅｌｌｓｉｎＧ０／Ｇｌ

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