新品回顾之表达系统篇

《新品回顾之表达系统篇》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在行业资料-天天文库。

1、2008新品回顾之表达系统篇生物通编者按：每一年，生命科学领域都迸发出许多创新的闪光点。技术的创新正推动生命科学飞速地发展；而创新的产品也在争相亮相。在即将过去的2008年，有哪些创新的技术让你印象深刻，又有哪些创新的产品让你受益无穷？在2008年末，生物通推出“2008生命科学十大创新产品评选”活动。通过这次活动，我们将盘点出2007-2008年对生命科学领域影响最大的新产品，让更多的人了解科学发展的新方向，也早日享受到科技创新带来的成果。在表达系统方面，新产品当然没有像干细胞、说无就无。不过，Clontech公司革新的miRNA那

2、样出现井喷。现有的原核、真核表达系ProteoTuner系统，能让研究人员随心所欲地调统已经相当成熟，大部分新产品为了让表达量更控细胞内目的蛋白的表达水平。它有两个关键元高或溶解性增加，对载体进行例牌的局部改善。件：破坏稳定结构域（DD）和小分子配体Shield1。当然，也有一些新鲜的东西，吸引我们的眼球，向细胞培养基中加入Shield1稳定配体，就能保如膜蛋白表达试剂盒和自由调控目的蛋白表达量护你的目的蛋白不被蛋白酶体降解，在细胞内迅的ProteoTuner系统。速积累。相反地，为了降解你的目的蛋白，就将细胞转移至不含Shield1

3、的培养基中。没有了以往，膜蛋白的表达总是让人相当头疼，产Shield1的保护，目的细胞就迅速降解。蛋白表达量不高，或总是形成包涵体。Invitrogen首家推出量的调控就是这么简单而直接，比以前的四环素了MembraneMax膜蛋白表达试剂盒，能克服以诱导系统可快多了。ProteoTuner系统也入围了上的困难，得到高产量可溶性的膜蛋白。它的秘十大创新产品的评选。密武器就在于其中专利的MembraneMax试剂。MembraneMax试剂与细胞膜有点类似，是优化除了这两个与众不同的新产品，其他新品都的脂-蛋白配方，外环是一种专利配方的

4、支架蛋是对现有系统的改造。如QIAGEN公司的白，中间是脂双层。它提供了与细胞内相似的环QIAgenes表达载体，上面已包含完全测序的人境，帮助膜蛋白正确折叠，避免了蛋白聚集，同类基因的cDNA。目前已有35,000个人类ORF时也省去了反复优化的繁琐步骤。与Invitrogen的全长cDNA构建在载体上。如果只是克隆好的的Expressway体外表达系统结合，重组载体，那并不稀奇。关键是为了在E.coli表MembraneMax试剂就能生产出微克至毫克级的达系统中得到最高产量的蛋白，QIAgenes大肠可溶膜蛋白。在蛋白合成结束之后

5、，膜蛋白可以杆菌表达载体上的蛋白编码序列从密码子偏好从脂双层的任一侧取出。经Invitrogen内部验证，性、mRNA稳定性及二级结构等多方面来考虑，许多膜蛋白的表达量都大于0.1mg/ml，这对于很通过专利的软件进行了优化。你得到的是即用型多下游应用来说都是足够的，且蛋白可溶性明显的重组载体，无需克隆、测序和优化，非常方便。增加。在体外表达系统方面，Promega公司今年推我们都不是魔术师，不能让蛋白说有就有，出了两个新产品，一种是利用大肠杆菌S30提取2009年1月7日第五十四期第16页，共26页下一页返回物，另一种则是昆虫细胞提

6、取物。S30T7表达系测。正是由于系统成份的高纯度，产品寿命也得统的最大特点是产量高。T7启动子的载体在1小到了延长，试剂盒经得起反复冻融5次，而不影时内最高能表达500ug/ml的蛋白。而昆虫细胞响其活性。体外表达系统则源自Sf21细胞系，有着独特的优做真核表达的对pcDNA系列载体应该不会势：表达温度比其他系统低。在低温下表达能增陌生。Invitrogen公司今年推出了一个改良版：强蛋白的折叠以及稳定性，是进行突变研究的科pcDNA3.3-TOPO载体。此载体利用CMV启动学家的首选。子/增强子的组合在大多数哺乳动物细胞中实现NE

7、B公司也推出了新一代的体外表达系统高水平表达。它可以瞬时转染贴壁细胞，也可与——PURE。这种“纯净”的表达系统最特别的地方悬浮的FreeStyleMAX系列结合，大量表达就是去除了所有污染可能。PURE中的所有活性native蛋白。克隆方式是TOPO，很快很省心。组份都来自于重组制备，避免了天然提取物中核今年在表达系统方面的新品就这么多，报告酸外切酶，RNase和蛋白酶的污染，使DNA模完毕。板不被降解，表达的蛋白也不会有任何降解和修（生物通薄荷）饰。由于翻译混合液的背景表达很低，因此，合成后的蛋白质通常不需要提纯就可以直接用于检w

8、ww.ebiotrade.com第17页，共26页下一页返回