苯的氨基硝基化合物

《苯的氨基硝基化合物》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在教育资源-天天文库。

1、苯唑西林耐药金黄色葡萄球分子流行病学调查及糖肽类抗生素对葡萄球菌体外活性研究孙宏莉王辉陈民钧1研究背景2S.aureusPenicillin[1944]Penicillin-resistantS.aureusEvolutionofDrugResistanceinS.aureusMethicillin[1962]Methicillin-resistantS.aureus(MRSA)Vancomycin-resistantenterococci(VRE)Vancomycin[1990s][1997]VancomycinintermediateS.aureus(VISA)

2、[2002]Vancomycin-resistantS.aureusCDC,MMWR2002;51(26):565-567研究背景3苯唑西林耐药的金黄色葡萄球（MRSA）是引起医院感染的主要病因，常发生于免疫力低下的住院患者。世界首例MRSA：1961年，英国目前在许多国家仍在增长：研究背景4世界约100,000人/年感染MRSA国疾病控制和预防中心（CDC）统计研究背景5欧洲部分国家MRSA发生率比较%TiemersmaEW,etal.MRSAinEurope1999-2002.EmerginginfetiousDiseases,2004,10(9)1627-1634

3、研究背景61989-2001年美国ICU病房MRSA发病率美国国家医院感染监测中心（NNIS）提供研究背景72001-2003年协和医院MRSA发生率比较研究背景8ß内酰胺类抗生素对金黄色葡萄球菌的作用机制青霉素结合蛋白（PBP）是参与细胞壁肽聚糖成分合成的酶。ß-内酰胺类抗生素能与细菌胞膜的PBP结合使其失活，从而细胞壁合成受到抑制，导致细菌死亡研究背景9对ß内酰胺类抗生素（如苯唑西林）耐药机制：低水平耐药：产生过量的ß内酰胺酶、PBPs过量表达、PBP与苯唑西林亲和力下降；高水平耐药：产生由mecA基因编码的PBP2a，可替代其它PBP合成细胞壁，但与ß内酰胺类抗生

4、素亲和力差，而产生耐药。对其它抗生素耐药机制：mecA基因位于一个可移动元件SCCmecDNA，该元件由不同的整合子、转座子等组成，分别编码不同抗生素的耐药基因。MRSA耐药机制研究背景10MRSA治疗上的困难多重耐药有效治疗药物：万古霉素、替考拉宁、利萘唑烷、链阳霉素、甲氧苄啶/磺胺甲恶唑、氯霉素等已出现对万古霉素敏感性下降的金黄色葡萄球菌：多为MRSA在住院患者间易传播，造成爆发流行研究背景11MRSA耐药性及流行病学研究对于正确治疗其引起的感染、防止其播散有重要意义。研究意义12技术路线13从协和医院2002年住院患者分离212株MRSA（表型测定）MRSA的确证

5、（苯唑西林－盐琼脂筛选法mecA-femB双重PCR法)ICU、RCU病房的MRSA耐药性检测回顾性分子流行病学调查（琼脂稀释法；抗生素纸片琼脂扩散法）（脉冲场凝胶电泳）替考拉宁和万古霉素对葡萄球体外活性技术路线为临床正确防治并减少MRSA的感染提供参考依据同源性分析，跟踪爆发流行趋势，区分新生感染/复发感染、污染菌/病原菌14MRSA的筛选及耐药性检测MRSA医院流行病学调查MRSA感染病例临床资料分析Part1Part2Part315第一部分：MRSA的筛选及耐药性检测16MRSA的表型鉴定MRSA的确证试验,平板/PCRMRSA耐药性检测药敏结果数据分析及处理17

6、一、MRSA的表型鉴定待测菌株革兰氏染色触酶试验（＋）（阳性且呈双、链、葡萄状球菌）胶乳凝集试验（测凝集因子、蛋白A）（＋）疑难菌：API系统和VITEK系统鉴定苯唑西林药敏试验（抑菌圈直径≤10mm）18二、MRSA的确证试验mecA～femB双重PCR法苯唑西林-盐琼脂筛选法19苯唑西林－盐琼脂筛选试验检测MRSA方法：（参照NCCLSM100-S13文件中的规定）待测新鲜菌悬液（0.5号比浊管浊度）点种于苯唑西林－盐琼脂筛选平皿（含4%NaCl、6µg/ml苯唑西林的M-H平皿）空气，35℃孵育24-48小时生长菌落数≥1检测结果：212株中有165株金葡菌在筛选

7、平皿生长MRSA检测20mecA～femB双重PCR法检测MRSA（原理及方法）mecA：编码PBP2a，苯唑西林耐药的决定子。femB：某些葡萄球菌属染色体辅助基因，编码细胞壁合成所需的一种重要酶。MRSA检测21mecA～femB双重PCR法检测MRSA（原理及方法）mecA、femB基因在不同种类葡萄球菌中的表达*MRSAMSSAMRSCoNMSSCoNmecA＋－＋－femB＋＋――注：MRSA－苯唑西林耐药的金黄色葡萄球菌；MRSCoN－苯唑西林耐药的凝固酶阴性葡萄球菌MSSA－苯唑西林敏感的金黄色葡萄球菌；MSSCoN－苯唑西