GBT5009.194-2003 保健食品中免疫球蛋白IgG的测定.pdf

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1、ICS67.040C53中华人民共和国国家标准GB/T5009.194-2003保健食品中免疫球蛋白IgG的测定Determinationofimmunoglobulininhealthfoods2003-08-11发布2004-01-01实施中华人民共和国卫生部食太中国国家标准化管理委员会“.‘GB/T5009.194-2003目U吕本标准由中华人民共和国卫生部提出并归口。本标准由卫生部食品卫生监督检验所负责起草。本标准主要起草人:杨祖英、宋书锋。GB/T5009.194-2003引言免疫球蛋白IgG，目前已作为功效成分添加于保健食品中

2、，该成分对于增强免疫力、调节动物体的生理功能和某些特定物质的代谢等均有一定效果。本方法在参考新西兰健康食品有限公司免疫球蛋白IgG测定方法的基础上，根据我国的仪器设备条件进行改进，建立了片剂、胶囊、粉剂类型保健食品中免疫球蛋白含量的高效液相色谱测定方法。GB/T5009.194-2003保健食品中免疫球蛋白IgG的测定1适用范围本标准规定了保健食品中免疫球蛋白IgG的测定方法。本标准适用于片剂、胶囊、粉剂类型保健食品中免疫球蛋白IgG的测定。本方法检出限:当取样量0.1g,稀释至25mL，进样量20pL时，检出浓度为。.5mg/mL,2原

3、理根据高效亲和色谱的原理，在磷酸盐缓冲液条件下免疫球蛋白IgG与配基连接，在pH2.5的盐酸甘氨酸条件下洗脱免疫球蛋白IgG,试剂3.1流动相A:pH6.5,0.05mol/L磷酸盐缓冲液。3.2流动相B:pH2.5,0.05mol/L甘氨酸盐酸缓冲液。3.3IgG标准贮备液:称取IgG标准品(Sigma化学公司)0.0100g，用流动相A(3.1)溶解并定容至10.0mL，摇匀，浓度为1.0mg/mL,3.4IgG标准系列溶液:取IgG标准贮备液，用流动相A(3.1)稀释成含IgG0.2,0.4,0.6,0.1.0mg/mL的标准系列。

4、临用时配制。仪器和设备高效液相色谱仪具紫外检测器和梯度洗脱装置。5分析步骤5.1试样处理:称取0.1g精确至。001g)试样，用流动相A(3.1)稀释至25.0mL,M匀，通过0.45}cm微孔滤膜后进样。5.2先用5倍柱体积的重蒸水洗柱，再用10倍柱体积的流动相A(3.1)平衡柱，进样，按洗脱程序进行洗脱。5.3HPLC参考条件色谱柱:PharmaciaHI-TrapProteinG柱，1mL,波长:280n,进样量:20yL,梯度洗脱表见表1,表1时间流速/(mL/min)A/(%)B/(%)梯度00.410004.50.410006

5、5.50.40100615.00.40100615.50.41000622.00.410006GB/T5009.194一20036结果计算c又VXIOOmX1000式中:X—试样中烤G的含量，单位为克每百克(9/109);m—试样的质量，单位为克(9);c—被测液中IgG的含量，单位为毫克每毫升(mg/mL);V—试样定容的体积，单位为毫升(mL)。计算结果保留两位有效数字。精密度在重复性条件下获得的两次独立测定结果的绝对差值不得超过算术平均值的10%。色谱图亡勺侧.IgG峰O叫/玫G峰委圈，1酮标准色谱图图2初乳素色谱图{