资源描述：
《GBT5009.189-2003 银耳中米酵菌酸的测定.pdf》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在行业资料-天天文库。
1、ICS67.040C53中华人民共和国国家标准GBJT5009.189-2003部分代替Gs11675-1989银耳中米酵菌酸的测定Determinationofbongkrekicacidintremellafuciformisberk2003-08-11发布2004-01-01实施中华人民共和国卫生部**中国国家标准化管理委员会‘’”GB/T5009.189-2003前言本标准代替GB11675-1989K银耳卫生标准》中5.1米酵菌酸的测定。本标准由中华人民共和国卫生部提出并归口。本标准由河南
2、省食品卫生监督检验所、河南省南阳地区卫生防疫站负责起草。本标准主要起草人:任中善、马军、赵国庆、张丁、韦喜亭。GB/T5009.189-2003引言米酵菌酸[bongkrekicacid(BA)，即酵米面黄杆菌毒素A(flavotoxinA)]是由椰毒假单胞菌(pseudomanascocovenenans)产生的一种可以引起食物中毒的毒素。系统命名为:3-甲基一17一甲氧基-6,18,21一三甲基一廿二碳-2,4,8,12,14,18,20一七烯二酸。GB/T5009.189-2003银耳中米酵菌
3、酸的测定范围本标准规定了银耳中米酵菌酸的测定方法。本标准适用于银耳中米酵菌酸的测定。薄层色谱测定法2原理试样中的米酵菌酸经提取、净化及浓缩后，根据其在短波紫外光GFzs,硅胶薄层色谱上显示黑色点的最低检出量测定含量。3仪器3.1层析槽(内径长X宽X高，25cmX6cmX4cm),3.2GF254硅胶薄层50mmX200rnmX0.3mm).自制，经1100C^V1150C活化2h--3h,置干燥器中可保存一周。3.3紫外线灯(波长254nm),3.4紫外分光光度计。试荆本标准所用的试剂除特殊规定外，
4、均为分析纯，水为蒸馏水或同等纯度的水，溶液为水溶液。4.1硅胶:G玩。层析用。4.2薄层色谱展开剂:石油醚一无水乙醚一冰乙酸红60+4。十1.51.4.3米酵菌酸标准溶液:称取米酵菌酸标准品，用甲醇配制成每毫升含有米酵菌酸20rcg供测定用，置于4℃冰箱中避光保存。4.4甲醇。4.5冰乙酸。4.6石油醚，沸程30'C-60r.4.7无水乙醚。4.8三氯甲烷。4.985x/100mL磷酸。4.1040g/L碳酸氢钠水溶液。4.116mol/L盐酸。5分析步骤5.1米酵菌酸的提取干银耳试样经粉碎过40目
5、筛后，称取20g,置具塞锥形瓶中，加人甲醇20mL，于室温中避光浸泡1h.然后再加人三氮甲烷80mL和85g/100mL磷酸。.2mL，鲜银耳试样经剪碎、磨细及混匀后称取10g，加人甲醇16mL于室温中避光浸泡1h，然后再加人三氯甲烷64mL和85g/100mL的磷酸0.16mL;振荡30min，过滤，干银耳取滤液50mL，鲜银耳取滤液40mL503GB/T5009.189-2003将以上滤液移人分液漏斗中，加人与滤液体积相同的碳酸氢钠水溶液，振摇2min，静置分层，用带自动控制球吸管吸出上层于另一
6、分液漏斗中，再用碳酸氢钠水溶液重复提取两次，每次10mL，轻摇，静置，将三次碳酸氢钠水层合并，加人三氯甲烷25mL，振摇2min，静置分层后弃去三抓甲烷层，于分液漏斗中慢慢滴人6mol/L盐酸以调该溶液pH至2-3，加人石油醚(沸程30V-60*C)50mL(鲜银耳试样加40ml,),振摇3min，静置分层，取出石油醚层于梨形瓶中，再重复用石油醚30mL和20mL各提取一次(鲜银耳试样两次均为20mL)，将石油醚层并人同一瓶中，于40℃水浴中减压吹气浓缩至干，用甲醇移至带1mL刻度的浓缩管中，于40
7、℃用减压法浓缩至0.2mL以下，并用少许甲醇洗管壁，继续浓缩至干.加甲醇0.125mL，将干物质溶解，混匀，作为样液以供薄层色谱测定用。5.2薄层色谱测定以薄层板的短边为底边，距底边3em的基线上用微量注射器滴加20pg/mL标准液8kL与10叮两个点，以及样液两个点，每点10IL(鲜银耳试样滴加20KL)，在样液的一个点上再滴加20pg/mL标准液10;}L。用展开剂展开16cm，取出挥干。在254nm萦外灯光下观察结果如下:a)标准点应出现黑色点;b)如样液点在标准点相应位置上未出现黑色点，则试
8、样中米酵菌酸的含量在测定方法灵敏度。25Wg/g以下;如在相应位置上有黑色点，而另一点中样液与标准液点重叠，则为阳性，根据样液黑点的强度估计减少滴加微升数，或经稀释后再滴人不同微升数，直至样液与标准色点的强度与面积一致为止。米醉菌酸的比移值为0.22.5.3结果计算见式(1),_。V，1⋯’，·.......·.·······一(1)人=U.LX干;'XIJIN一v2f刀式中:X—米酵菌酸含量，单位为微克每克印g/g)。，2—米酵菌酸的最低检出量，单位为微克单g);V
