大豆活性成分析与抗

《大豆活性成分析与抗》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在教育资源-天天文库。

1、大豆活性成分析與抗老化之研究計畫編號：CNAL94-01子計畫(1)大豆製品中異黃酮之ELISA分析計畫總主持人：范晉嘉子計畫主持人：范晉嘉執行機關：嘉南藥理科技大學生活應用與保健系執行期間：94年01月01日至94年12月31日摘要近年來，國人罹患心血管疾病之比例日漸提高，飲食習慣是原因之ㄧ。根據報告指出，西方國家居民罹患乳癌、大腸癌和前列腺癌的機率較亞洲國家高出許多，學者們普遍認為這與東方人的飲食習慣有關，而非遺傳的影響。Leeetal.(1991)的實驗結果，證明新加坡國民的大豆飲食與減少癌症

2、風險有直接相關。大豆含豐富的營養成分及一些機能性成分，如：異黃酮、皂素、植酸、固醇、卵磷脂等。本研究使用ELISA方法利用其快速、簡便、靈敏的優點分析國產大豆和市面上販售大豆之異黃酮含量。結果顯示，國產大豆種中毛豆高雄6號總異黃酮含量高達47.71(µg/gFW)，是其中含量最高者。針對國產之黑豆比較發現以青仁黑豆台南3號總異黃酮量高於黃仁台南5號。在市售大豆方面，以妙鷹牌黑豆最高，達110.56(µg/gFW)。整體而言，其中daidzein含量比genistein含量要高。將市售大豆與國產大豆做

3、比較，發現除了妙鷹黑豆外，其黑豆的異黃酮含量低於黃豆。前言大豆(soybean)學名為Glycinemax(L.)Merrill，它屬於豆科（Leguminosae）大豆屬（Glycine）一年生草本植物。大豆品種甚多，依種皮顏色不同取名，包如：黃豆、黑豆皆屬大豆，而毛豆則是大豆豆莢發育至八分飽滿時採收(R6)的鮮果莢，此時因為豆莢附有許多絨毛，因而稱之為毛豆(吳和連，1998)。大豆含有豐富及高營養價值的蛋白質和脂質，其中蛋白質含量約為34%，係由18種人體所需胺基酸構成，其中以麩氨酸(gluta

4、micacid)、天冬胺酸(asparticAcid)及白胺酸(leucine)的含量較高(Friedman,2001)；脂肪含量約18%，其中不飽和脂肪酸高達86%(高，2002)；另外還含有一些微量成份，包含在約5%的灰份中，如：鉀、磷、鈣等。大豆尚含有一些特殊的機能性成份，如：卵磷脂(lecithin)、皂素(saponins)、固醇(sterols)、植酸、異黃酮(genistein,daidzeinandglycitein)和蛋白酶抑制劑(BBI)等(張，2002)。近年來許多研究證實大豆

5、具有預防癌症的特性，尤其是與荷爾蒙有關的癌症，如：乳癌、前列腺癌及肺癌。除了抑癌作用之外，異黃酮特殊的結構使其具有雌激素的功能及具抗氧化活性等，因此異黃酮在近幾年逐漸受到重視。本研究採用免疫酵素結合分析法(ELISA)分析自台南農改場及高雄農改場提供之大豆以及市面上所販售之大豆其異黃酮含量。材料與方法一、試驗材料本研究所使用的國產大豆品種有：毛豆台南選1號、青仁黑豆台南選3號、黃仁黑豆台南選5號、綠肥大豆台南選6號、毛豆高雄5號、毛豆高雄6號以及毛豆高雄7號。市售大豆包括：日正大豆、義美大豆、日正黑

6、豆、政豐黑豆、妙鷹黑豆。二、試驗方法1.大豆異黃酮之萃取取大豆種子15g，用磨豆機磨碎。秤取2g大豆粉置於15ml離心管，加入10mln-hexane進行脫脂，共一小時(每30min更換萃取液)。其粉末自離心管中挖出，置於秤藥盤上，使其在抽氣櫥中自然揮發風乾，待粉末風乾後，精秤1g，置於15ml離心管中，並加入7ml萃取液。均勻混合後，置於水平式震盪器上搖1hr後，離心(3000rpm)15min，取上清液。其上清液經減壓濃縮後，剩下液體用氮氣吹乾，置於-20℃下冷凍備用。2.ELISA分析96we

7、llplate中每一well加入200µl的Thyrconjugatessolution，4℃反應overnight。PBS-T-PS-DMSObuffer37℃反應30min後PBS-T-DMSObuffer。。wash3次，每次3min，加入樣品和1Antibody於37℃反應2hr，1Antibody洗掉加入2∘antibody於37℃反應30min後洗掉，加Substratesolution，室溫下反應30min在加4MH2SO4中止反應並以ELISAreader偵測OD490。3.統計分析

8、本研究之統計方法主要採用SPSS10.0(1999)系統，使用OneWayANOVA(analysisofvariance)及LSD(leastsignificantdifference)分析各組間的差異性。結果與討論由表一得知國產大豆的總異黃酮含量以毛豆高雄5號較高，黃仁台南5號較低。另外將青仁黑豆與黃仁黑豆做比較發現其青仁黑豆之異黃酮含量較黃仁黑豆高。在市售大豆(表二)方面則以妙鷹牌黑豆之異黃酮含量位居第一，且daidzein含量比genistein含量要高。將市