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时间:2019-08-06
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1、(HIV)珠海丽珠试剂简明操作步骤一、开机1、所有实验用的仪器提前打开预热30分,空调设置20~25℃。2、打开酶标仪的电源开关,打开电脑然后双击桌面上的应用程序,选择用户并输入密码123,点击进入,仪器自检完后即可进入主菜单。注意:必须先开酶标仪后再打开程序,否则仪器无法完成自检。3、在开始一个新项目前,或新试剂前填写项目设置;(按RT—6100简明操作步骤中B项目设置填写)二、操作步骤:1、配洗液:将20倍浓缩50ml的洗液,倒1000ml塑料量桶中;将蒸馏水加至1000ml,再倒入洗板机当前设置的洗液桶中。2、
2、加样:将已经平衡室温的试剂所需数量的板条固定于板架,未完成的放置于有干燥剂的封口袋中密封保存。在通风柜中操作,每次实验设阴性对照3孔、阳性对照2孔、质控对照2孔分别加入阴、阳性对照和质控对照50ul,其余孔加入50ul待测样品。3、温育:盖上封板膜,放置水温箱,置37℃温育30分钟,用定时钟定时。4、洗涤:到时后,拿出板架,将板架放置洗板机上洗涤,弃去孔内液体,将稀释后的洗液注满各孔,静置30—60秒,弃去孔内洗液。重复洗4次后,用蒸馏水再洗两次拍干。5、加酶:将洗好的板放置通风柜内,用加样枪给各孔加入酶标记物50u
3、l。6、温育:盖上封板膜,放置水温箱,置37℃温育30分钟,用定时钟定时。7、洗涤:到时后,拿出板架,将板架放置洗板机上洗涤,弃去孔内液体,将稀释后的洗液注满各孔,静置30—60秒,弃去孔内洗液。重复洗4次,后用蒸馏水再洗两次拍干。8、显色:将洗好的板放置通风柜中,每孔加入底物缓冲液50ul,再加入底物液50ul,振荡混匀,盖上封板膜,置37℃温育30分钟,用定时钟定时。9、终止:到时取出板架放置通风柜中,每孔加入终止液50ul,轻拍混匀。10、读值:把板架放置酶标仪上,用酶标仪读值,在单波长450nm或双波长450
4、nm/630nm下读取各孔A值,应在15分钟内完成、保存、打印。三、结果判定:1、要求:阳性对照A值应≥0.8阴性对照A值应≤0.122、临界值(C.O)计算:临界值(C.O)=0.15+阴性对照平均A值备注:阴性对照平均A值小于0.08按0.08计算,大于0.08按实际值计算。3、结果判断:样品A值≥临界值(C.O)为HIV抗体阳性样品A值<临界值(C.O)为HIV抗体阴性4、初次实验阳性者应重新取样进行双孔复试,如果复试中任何一孔为阳性,则样品视为HIV抗体阳性,对复试结果为阳性的样本请按《全国艾滋病检测技术规范
5、》处理。四、注意事项:样品收集及保存1、待测的血清或血浆样品不可用NaN3防腐。2、短期(1周)内进行检测的血清或血浆样品可存放于2~8℃,如需长期保存,应置于-20℃。避免反复冻融。实验准备1、本试剂的使用单位必须是经各级卫生行政部门批准的HIV检测实验室。2、整个HIV检测必须符合《全国艾滋病检测技术规范》,严格防止交叉感染。操作时必须戴手套、穿工作服,严格健全和执行消毒隔离制度。3、从冷藏环境中取出的试剂盒应平衡至室温后方可打开使用。4、未使用完的预包被板条应置于有干燥剂的封口袋中密封保存。5、若20倍浓缩洗液
6、出现结晶,请置于37℃至溶解后再使用。6、不同批号的试剂组份不可混用。7、本试剂盒及各种废弃物应按传染性物品处理。实验操作1、试剂使用前应充分摇匀。2、洗涤时各孔均需加满洗液,以防止孔口有游离酶标记物未被洗净。3、结果判读请在反应终止后15分钟内完成。4、测定结果必须以酶标仪读数为准。
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