副猪嗜血杆菌及致病因子的研究进展

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1、副猪嗜血杆菌及致病因子的研究进展摘要:副猪嗜血杆菌是猪上呼吸道的一种常在条件性致病菌，该菌引起的副猪嗜血杆菌病以纤维素性多发性浆膜炎、关节炎和脑膜炎主要特征。对该菌的毒力因子进行了概述，以期为副猪嗜血杆菌病的早期诊断和及时防治提供一定的指导。关键词:副猪嗜血杆菌致病菌毒力因子副猪嗜血杆菌病又称格拉泽氏病(Glasser’sdisease)。副猪嗜血杆菌病又称纤维素性浆膜炎和关节炎，是由副猪嗜血杆菌(Haemophilusparasuis，HPS)[1]引起,以纤维素性多发性浆膜炎、关节炎和脑膜炎

2、为特征，在一定条件下，可引起猪只发生以呼吸道症状为主的全身性疾病[2]，死亡率较高。副猪嗜血杆菌是猪上呼吸道一种常在菌，属于条件性和继发性病原菌，在特定条件下可以侵入机体并引起严重的全身性疾病，是近年来严重危害养猪业的新发细菌性传染病，呈世界性分布。其十分娇嫩，对培养基的要求很高，分离培养往往不能成功，而且副猪嗜血杆菌对外界抵抗力不强，干燥环境易死亡。HPS属于巴氏杆菌科，嗜血杆菌属，是一种革兰氏阴性菌，为形态多变、兼性厌氧、非溶血性、依赖V因子（烟酰胺腺嘌呤二核苷酸，NAD）性、无芽孢的短小杆

3、菌，最适宜生长的温度为35～37℃，pH为7.6～7.8[3]，临床上以5～8周龄的保育猪最易发病。多年来国内外一些研究人员对该菌做了大量的研究工作，但对于该菌的研究还很浅，尤其是其致病机理、毒力因子等方面的认识还很少。1形态学、血清学及流行病学1.1痛原形态学及培养特性副猪嗜血杆菌是1922年首次由Schermer等分离到的一种细小杆菌，在显微镜下呈多形态，非溶血性，不运动，烟酰胺腺嘌呤二核苷酸(NAD)依赖型，革兰氏阴性，大小为1．5／um×(O．3～O．4)um。新分离的菌株多呈球杆状或双

4、球状，有时可呈短链状，在陈旧培养物中多呈多形态，有长杆状和丝状。Hps属于需氧或兼性厌氧菌，最适生长温度为35～37℃，pH7.6～7.8，C023％～5％。在适宜培养基上生长的菌落呈圆形，隆起，表面光滑，边缘整齐，灰白色半透明，针尖大小，无芽孢，无鞭毛。Hps培养条件严格，生长依赖烟酰胺腺嘌呤二核苷酸(NAD或V因子)，不需要X因子。在巧克力培养基上生长较差，在加NAD、马血清的M96支原体培养基或加酵母浸出物的PPLO培养基上生长良好。如与金黄色葡萄球菌同时培养，Hps在该菌两侧生长良好，菌

5、落直径可达1～2mm，形成卫星现象。蔡旭旺等[4,5]对该菌做了生化鉴定，结果为尿酶试验阴性、氧化酶阴性、接触酶试验阳性，可发酵葡萄糖、蔗糖、果糖、半乳糖、D-核糖和麦芽糖等。1.2血清学传统的血清学分型方法是根据热稳定性可溶性抗原和琼脂扩散试验,已有15种血清型得到证实[6,7]，同时20％以上的分离株不能分型[8]。目前，细菌的血清型已普遍作为其毒力的标志，不同血清型的Hps，毒力和致病力存在差异。研究报道SPF猪腹腔接种血清1、5、10、12、13、14型Hps后，在4d内发病或死亡，这些

6、菌株归类为高毒力菌株；接种血清2、4、15型Hps后，引起多发性浆膜炎但不致死，这些菌株归类为中等毒力菌株；接种血清3、6、7、8、11型Hps后，感染症状较缓慢或无临床表现，这些菌株归类为无毒力菌株[9]。由于琼脂扩散试验的局限性，已有建议将其它技术如间接血凝试验(IHA)和协同凝集试验(CA)作为血清学分型的候选方法。协同凝集表现出多种交叉反应，而间接血凝试验提高了特异性反应，除了少数例外。90％以上的菌株可以通过间接血凝试验确定血清型，而琼脂扩散试验只能确定63％的菌株血清型。目前，PCR

7、-RFLP方法建立并应用于副猪嗜血杆菌流行病学分型，通过PCRRFLP对tbpA(编码转铁结合蛋白的基因)进行分析，从而对副猪嗜血杆菌菌株进行分型。101株副猪嗜血杆菌分离株有33种RFLP图谱，其中10株与标准株获得一致的图谱[10]。通过免疫扩散试验分型的66株分离株分为25种RFLP群，表明同一血清型副猪嗜血杆菌具有遗传多样性；而27株不能分型的分离株形成14种不同的RFLP群。以上结果表明，血清型和RFLP型没有直接的相关性，PCR—RFLP分析结果显示5型流行最广泛(占所研究的20.8

8、％)，其中包含血清4、5、13、15型和不能分型的分离株。1.1流行病学Hps是猪上呼吸道的正常定居菌，可以从1日龄健康猪的鼻腔、支气管分泌物，尤其是大支气管的分泌物中分离到本菌[11]，也可以从患病猪肺中分离到本菌，但健康猪肺部分离不到。它可在特定条件下侵入机体从而引起严重的全身性疾病，以纤维素性多发性浆膜炎、关节炎和脑膜炎为特征。副猪嗜血杆菌侵入全身的有关机制还不清楚。Hps只感染猪，有很强的宿主特异性，可以影响2周龄～4月龄的猪，主要在断奶前后和保育舍阶段发病，常见于5～8周龄，感染高峰通