微生物的培养与应用学案精校

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1、考纲要求展示知识内容要求微生物的分离和培养Ⅱ某种微生物数量的测定Ⅱ培养基对微生物的选择作用Ⅱ知识网络构建一、微生物的实验室培养1.培养基(1)概念：人们按照微生物对________的不同需求，配制出供其生长繁殖的营养基质。(2)成分：一般都含有碳源、______、水和________，还需要满足不同微生物生长对____、特殊营养物质以及______的要求。2.无菌技术(1)含义：指在培养微生物的操作中，所有____________的方法。(2)关键：防止外来______的入侵。(3)方法：消毒：__________、化学药剂消毒法、______

2、______。灭菌：______灭菌、干热灭菌、________灭菌。3.实验操作(1)制备牛肉膏蛋白胨固体培养基过程：计算、______、溶化、______、倒平板。(2)纯化大肠杆菌的原理：在培养基上将细菌稀释或分散成________，形成单个菌落，此菌落是由一个细胞繁殖而来的子细胞群体。(3)微生物的常用接种方法：__________和稀释涂布平板法，接种过程仍然是______操作。二、土壤中分解尿素的细菌的分离与计数1.分离原理：土壤中细菌之所以能分解尿素，是由于它们体内能合成______，这种物质在把尿素分解成无机物的过程中起到___

3、___作用。2.统计菌落数目：统计样品中的活菌一般用____________。3.实验流程：土壤取样、制备________、微生物的培养与观察、细菌的计数。三、分解纤维素的微生物的分离1.纤维素酶的组成：一种________，它至少包括三种组分，即C1酶、____酶和________酶。2.筛选方法：刚果红染色法，即通过是否产生________来筛选纤维素分解菌。3.实验操作步骤：土壤取样、________、________、将样品涂布到鉴别纤维素分解菌的培养基上、__________________。【自我校对】一、1.(1)营养物质(2)氮

4、源无机盐pH氧气2.(1)防止杂菌污染(2)杂菌(3)煮沸消毒法紫外线消毒法灼烧高压蒸汽3.(1)称量灭菌(2)单个细胞(3)平板划线法无菌二、1.脲酶催化2.稀释涂布平板法3.培养基三、1.复合酶Cx葡萄糖苷2.透明圈3.选择培养梯度稀释挑选产生透明圈的菌落微生物的培养一、培养基的类型及其应用标准培养基类型配制特点主要应用物理性质固体培养基加入琼脂较多菌种分离，鉴定，计数半固体培养基加入琼脂较少菌种保存液体培养基不加入琼脂工业生产，连续培养化学组成合成培养基由已知成分配制而成，成分明确菌种分类、鉴定天然培养基由天然成分配制而成，培养基成分不明

5、确工业生产，降低成本目的用途鉴别培养基添加某种指示剂或化学药剂菌种的鉴别选择培养基添加(或缺少)某种化学成分菌种的分离二、培养基的营养构成营养物质定义作用主要来源碳源能提供碳元素的物质构成生物体的物质，异养生物的能源物质无机物：CO2、NaHCO3有机物：糖类、脂肪酸、石油、花生粉饼等氮源能提供氮元素的物质合成蛋白质、核酸以及含氮代谢产物无机物：N2、NH3、氨盐、硝酸盐有机物：尿素、牛肉膏、蛋白胨等生长因子生长不可少的微量有机物酶和核酸的成分维生素、氨基酸、碱基等(1)微生物最常利用的碳源是糖类(特别是葡萄糖)，常利用的氮源是氨盐、硝酸盐。(

6、2)在微生物所需要的化合物中需要量最大的是碳源。(3)微生物之所以需要补充生长因子，是由于缺乏合成这些物质所需要的酶或合成能力有限。三、无菌技术1.消毒与灭菌的区别灭菌方法条件结果常用方法消毒较为温和的物理或化学方法仅杀死物体表面或内部一部分对人体有害的微生物(不包括芽孢和孢子)煮沸消毒法，还有化学药剂(如酒精、氯气、石炭酸等)消毒、紫外线消毒灭菌强烈的理化因素杀死物体内外所有的微生物，包括芽孢和孢子灼烧灭菌、干热灭菌、高压蒸汽灭菌2.实验室常用灭菌方法的比较灭菌方法适用对象所需条件灭菌时间灼烧灭菌接种的金属工具(如接种针、接种环)在酒精灯的火

7、焰外焰灼烧直至烧红干热灭菌耐高温需干燥的物品(如玻璃器皿、金属用具)干热灭菌箱内160～170℃1～2h高压灭菌培养基100kPa；121℃15～30min1.芽孢是细菌发育后期形成的休眠体，耐高温，故消毒仅杀死物体表面或内部一部分对人体有害的微生物而不包括其芽孢和孢子。2.灭菌和消毒的实质大都是使微生物的蛋白质或核酸发生变性。3.微生物分离中的无菌技术：获得纯净培养物的关键是防止杂菌污染，无菌技术可从如下四个方面展开：(1)对实验操作的空间，操作者的衣着和手进行清洁和消毒。(2)将用于微生物培养的器皿、接种用具和培养基等进行灭菌。(3)为避免

8、周围环境中微生物的污染，实验操作应在酒精灯火焰附近进行。(4)实验操作时，应避免已经灭菌处理的材料用具与周围的物品相接触。【例1】下列说法正确的是()