实验七动物染色体标本的制备与观察

《实验七动物染色体标本的制备与观察》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在教育资源-天天文库。

1、动物染色体标本的制备与观察一、实验目的二、实验原理三、实验步骤四、作业一、实验目的1.掌握动物骨髓细胞染色体标本制备基本过程，了解各个操作步骤的原理。2.了解常用实验动物染色体的数目及特点。二、实验原理凡处于增殖状态的细胞，或者经过处理进入分裂的细胞即可用于染色体分析。在动物的各种组织中，骨髓是不断分裂的组织之一，是细胞遗传学研究的好材料。进行染色体观察、分析，需要选择处于分裂中期的细胞。给动物注射一定量的秋水仙素即可使许多处于早期分裂相的细胞停滞于中期。三、实验步骤动物按30µg/g体重的剂量经腹腔注射

2、秋水仙素，7—8小时后杀死蛙，取后肢股骨和胫骨，剥掉全部肌肉，剪去股骨和胫骨两端。★用注射器将6ml1%柠檬酸钠溶液通过针头注入骨髓腔，冲出骨髓细胞至小碟内，直至股骨变为白色为止。摘掉针头，用注射器轻轻反复吸打，使分散成单个细胞。将骨髓细胞转入离心管，以1500r/min离心8min，弃上清。★在离心管中加入事先预热至30℃的0.4%KCL溶液5ml，将沉淀轻轻吹散，置30℃水浴中低渗30min。以1500r/min离心8min。弃上清液，沿离心管壁缓慢加入新配制的甲醇:冰醋酸(3:1)固定液5ml，加固

3、定液时注意不要冲动细胞团块。加完固定液后，立即用吸管将细胞轻轻吸打均匀,静置固定10min，1500r/min离心10min，弃上清液。如此反复固定1次，离心10min。固定的细胞经离心后，吸去上层固定液，视管底细胞多寡加入1--2ml新配制的固定液，将细胞团块轻轻吸打成悬液。★在干净、湿、冷的载玻片上滴2--3滴上层细胞悬液，自然干燥（滴片）。将玻片标本插入吉姆萨染液中，染色5min。用小烧杯盛蒸馏水略洗，再用吸水纸擦干玻片标本底面和四周，显微镜观察和分析。青蛙骨髓细胞染色体核型（2n=26）四、作业绘

4、制染色体图并作简要分析。例如：细胞密度是否适中，分裂细胞的比例如何，处于分裂中期相的细胞数量情况，染色体形态、数目、有否重叠等。滴片的制作1m