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1、2.2.1动物细胞培养和核移植技术一、动物细胞培养二、动物体细胞核移植技术和克隆动物高频考点突破考点一动物细胞培养技术1.动物细胞培养的操作流程2.考点解读(1)培养条件①无菌、无毒的环境——无菌处理、加抗生素杀菌、定期更换培养液。②营养——葡萄糖、氨基酸、促生长因子、无机盐和微量元素+血清或血浆等天然成分。③温度和pH——(36.5±0.5)℃和(7.2～7.4)。④气体环境——95%空气+5%CO2。提醒①CO2作用——调节培养基pH;②空气中O2作用——细胞有氧呼吸;③所用装置——CO2培养箱。(2)原理：细胞增殖。(3)动物细胞培养时,一般选取幼龄动物的组织、器官,其细胞
2、的分化程序较低,增殖能力强,有丝分裂旺盛,容易培养。(4)在动物细胞培养过程中,一般情况下10代以前的细胞核型不变,10代以后有些细胞核型发生改变,50代以后的细胞可能发生癌变。(5)胰蛋白酶在动物细胞培养过程中的作用包括将组织分散成单个细胞,以及将贴壁细胞从瓶壁上分离下来,这样做的目的是避免动物细胞的接触抑制现象。3.应用(1)生产细胞产品：干扰素、疫苗、单克隆抗体。(2)检测并判断某毒性物质毒性的大小。(3)临床医学研究。拓展提升动物细胞培养与植物组织培养的比较项目动物细胞培养植物组织培养相同点都需无菌条件;都进行有丝分裂不同点原理细胞的增殖细胞的全能性培养基液体培养基,动物
3、血清及其他营养物质固体培养基,激素及其他营养物质目的获得细胞或细胞产物等快速繁殖、培育无病毒植株等对位训练1.关于动物细胞培养的有关叙述，正确的是()A.细胞的癌变发生于原代培养向传代培养的过渡过程中B.动物细胞培养液中通常含有葡萄糖、氨基酸、无机盐、生长素和动物血清等C.动物细胞培养的目的只是获得大量的细胞分泌蛋白D.动物细胞培养前和培养过程中都要用胰蛋白酶处理D2.回答下列有关动物细胞培养的问题：（1）在动物细胞培养过程中，当贴壁细胞分裂生长到细胞表面时，细胞会停止分裂增殖，这种现象称为细胞的。此时，瓶壁上形成的细胞层数是。要使贴壁的细胞从瓶壁上分离下来，需要用酶处理，可用的
4、酶是_______。（2）随着细胞传代次数的增多，绝大部分细胞分裂停止，进而出现的现象；但极少数细胞可以连续增殖，其中有些细胞会因遗传物质发生改变而变成细胞，该种细胞的黏着性降低,细胞膜表面蛋白质（糖蛋白）的量。相互接触接触抑制单层（或一层）胰蛋白酶衰老甚至死亡不死性减少（3）现用某种大分子染料，对细胞进行染色时，观察到死细胞被染色，而活细胞不染色，原因是。（4）检查某种毒物是否能改变细胞染色体的数目，最好选用细胞分裂到期的细胞用显微镜进行观察。由于活细胞的膜具有选择透过性，大分子染料不能进入活细胞内，故活细胞不能着色（或由于死细胞的膜丧失了选择透过性，大分子染料能够进入死细胞内
5、而着色）中（5）在细胞培养过程中，通常在________________条件下保存细胞。因为在这种条件下，细胞中的活性降低，细胞的速率降低。（6）给患者移植经细胞培养形成的皮肤组织后，发生了排斥现象，这是因为机体把移植的皮肤组织当作进行攻击。冷冻（或超低温、液氮）酶新陈代谢抗原考点二动物体细胞核移植技术与克隆动物1.动物体细胞核移植技术操作流程2.考点解读(1)原理：动物细胞核的全能性(不能说动物细胞全能性)。(2)卵母细胞选择时期及原因减Ⅱ中期的卵母细胞,此时具备受精能力,细胞质中合成与分裂分化有关的物质能刺激融合后重组细胞进行分裂分化,形成重组胚胎。(3)选卵细胞做受体细胞原
6、因①大,易于操作；②卵黄多,营养丰富,为发育提供充足的营养；③激发重组细胞分裂分化。(4)供体细胞：取供体动物的体细胞培养,一般选用传代10代以内的细胞,因为10代以内的细胞一般能保持正常的二倍体核型,保证了供体细胞正常的遗传基础。(5)动物体细胞不能经培养直接发育成完整个体,原因是动物体细胞的全能性受到限制。用体细胞核移植技术能够得到克隆动物,说明动物体细胞的细胞核具有全能性。(6)该过程用到的技术手段：动物细胞培养、动物细胞融合、早期胚胎培养和胚胎移植。(7)核移植产生的克隆动物与提供细胞核的亲本不同原因：①克隆动物细胞质基因来源于另一个亲本。所以与植物组织培养不同(只来自于
7、一个亲本),克隆动物遗传物质来自2个亲本。②在发育过程中可能发生基因突变,染色体变异导致性状改变。③外界环境条件的影响引起不可遗传的变异。3.应用及存在问题(1)应用：加速家畜遗传改良进程、促进优良畜群繁育、保护濒危物种、克隆器官用于移植等。(2)存在问题①成活率低②克隆动物的健康问题③克隆动物食品的安全性问题。对位训练4.下列哪项不属于体细胞核移植技术的应用（）A.加速家畜遗传改良进程，促进优良畜群繁育B.保护濒危物种C.获得组织器官异体移植的供体D.大量产生紫杉醇D5.下列有
