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时间:2019-06-26
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1、动物细胞工程多莉克隆猴动物细胞工程的常用技术有哪些?1)动物细胞培养技术2)动物细胞融合技术3)单克隆抗体技术4)胚胎移植技术(如试管婴儿)5)核移植技术(如克隆动物)以上技术的基础是什么?动物细胞培养液的主要成分是什么?较植物组织培养基有什么特别的地方?为什么选用动物胚胎或幼龄动物个体的器官或组织做动物细胞培养的材料?为什么培养前要将组织细胞分散成单个细胞?为什么选用胰蛋白酶做上述处理?培养的细胞为何贴壁生长?如何界定原代培养和传代培养?动物细胞培养能否像植物组织培养那样最终培养成为生物个体?一、动物细胞培养从动物机体中取出相关的组织,将它分散
2、成单个细胞,然后,放在适宜的培养基中,让这些细胞生长和繁殖。动物细胞培养过程基本过程要从原代培养到传代培养原代培养的细胞动物组织(常取胚胎或幼体组织)分散的单个细胞细胞悬液培养瓶培养可继续传代的细胞[胰蛋白酶等]“10代危机”,大多数死亡细胞贴壁过程两种贴壁的培养细胞遗传性尚稳定[胰蛋白酶等]细胞悬液培养瓶培养“50代危机”绝大多数死亡可无限传代的细胞遗传性改变,具癌变特点传代培养的细胞接触抑制定义:细胞从接种到长满底物表面后,由于细胞繁殖数量增多相互接触后,不再增加。动物细胞培养过程动物组织分散成单个细胞细胞悬液培养(原代传代培养培养)胰蛋
3、白酶胶原蛋白酶胰蛋白酶胶原蛋白酶原理:细胞增殖(有丝分裂)结果:细胞群,细胞产物培养条件无菌、无毒消毒、灭菌抗生素定期更换培养液,清除代谢废物营养合成培养基:糖、氨基酸、生长因子、无机盐、微量元素(血清、血浆)温度和pH36.5±0.5℃,7.2---7.4气体95%空气,5%CO2?动物细胞培养技术的应用(1)用于制造有重要价值的蛋白质生物制品:病毒疫苗、干扰素、单克隆抗体等。(2)获得大量自身的皮肤细胞,用于植皮。(3)用于检测有毒物质(4)用于生理、病理、药理等方面的研究,为治疗和预防疾病提供理论依据植物细胞和动物细胞培养的比较比较项目植物
4、组织培养动物细胞培养原理培养基性质培养基特有成分培养结果培养目的分散处理脱分化细胞的全能性细胞增殖固体培养基液体培养基蔗糖植物激素葡萄糖动物血清植物体细胞或细胞产物快速繁殖、培育无病毒植株细胞群无有有无问题讨论1、某植物非常具有观赏价值,你采取什么方法来繁殖后代,使它们继承该植物的全部优良性状?2、1997年,美国威斯康星州的一个奶牛场有一头名叫卢辛达的奶牛,年产奶量为30.8t,创造了世界奶牛产量的最高记录。目前世界各国高产牛奶场的奶牛,平均每年产量为十几吨,而我国平均水平仅有3-4吨。你能想办法繁殖卢辛达的后代,使年产奶量为30.8t吗?1、
5、什么是克隆?2、以前学习过动物克隆的实例吗?3、请简述多莉克隆的过程?多莉羊动物体细胞核移植技术和克隆就是无性繁殖,具体的说,是指从一个共同的祖先,通过无性繁殖的方法产生出来的一群遗传特性相同的DNA分子、细胞或个体。二、动物体细胞核移植技术和克隆动物概念:将动物的一个细胞的细胞核,移入一个已经去掉细胞核的卵母细胞中,使其重组并发育成一个新的胚胎,这个新的胚胎最终发育为动物个体。分类胚胎细胞核移植、体细胞核移植采用此方法可以将两个不同种、属的动物优点集中在一起,产生具有双亲优点的可繁殖的杂种动物。此外,细胞核移植对动物优良杂交种的无性繁殖具有重大
6、意义。这一技术的成功与完善对于优良家禽的无性繁殖和濒临绝迹的珍贵动物的传种意义重大克隆羊多莉黑面绵羊去核卵细胞白面绵羊乳腺细胞核细胞核移植重组细胞电脉冲刺激早期胚胎胚胎移植另一头绵羊的子宫妊娠、出生克隆羊多利克隆步骤上克隆步骤下阅读与思考以概念图的形式表示体细胞核移植过程?取供体细胞取卵母细胞供体细胞培养培养到MⅡ中期卵母细胞去核供体细胞注入去核的卵母细胞供体核进入受体卵母细胞重组胚胎代孕母牛生出与供体遗传物质基本相同的个体请归纳动物体细胞核移植概念:将动物的一个细胞的细胞核,移入一个已经去掉细胞核的卵母细胞中,使其重组并发育成一个新的胚胎,这个
7、新胚胎最终发育成动物个体。用核移植的方法得到的动物称为克隆动物核移植胚胎细胞核移植体细胞核移植(难度高)受体细胞:MⅡ期的卵母细胞思考题1、在进行体细胞核移植之前,为何要去掉受体卵母细胞的核?卵母细胞的细胞质可使体细胞核的全能性得以表达;卵母细胞体积比较大,容易操作;卵母细胞的细胞质多,营养丰富,能为早期胚胎的形成提供营养。2、为什么选卵母细胞作核移植的受体细胞?为使核移植动物的遗传物质全部来自有利用价值的动物提供的体细胞。3.用于核移植的供体细胞一般都选用传代10代以内的细胞,为什么?10代以内的细胞保持一般保持正常二倍体的核型,未突变.思考题
8、二倍体的核型:是指染色体组在有丝分裂中期的表型,是染色体数目、大小、形态特征的总和思考题4.细胞核移植生产的克隆动物是对体细胞供体动物进
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